| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 1 引言 | 第9-19页 |
| ·马传染性贫血概述 | 第9-11页 |
| ·EIAV 形态结构和理化特性 | 第11-12页 |
| ·EIAV 的细胞嗜性 | 第12页 |
| ·EIAV 的致病性 | 第12-13页 |
| ·病毒的细胞受体以及病毒受体的本质 | 第13-14页 |
| ·病毒受体的特征 | 第14-15页 |
| ·病毒受体的特异性 | 第14页 |
| ·病毒受体的高度亲和性 | 第14页 |
| ·病毒受体结合位点的有限性、靶细胞部位的有限性 | 第14页 |
| ·病毒受体的生物学效应 | 第14-15页 |
| ·病毒与细胞受体的结合 | 第15页 |
| ·选择性剪接变异体 | 第15-16页 |
| ·选择性剪接基本模式 | 第16页 |
| ·选择性剪接基本形式 | 第16-17页 |
| ·选择性剪接的调控 | 第17-18页 |
| ·病毒受体选择性剪接变异体在病毒感染中的作用 | 第18页 |
| ·马慢病毒受体1(Equine Lentivirus Receptor-1,ELR1)简介 | 第18-19页 |
| ·本实验的目的及意义 | 第19页 |
| 2 材料 | 第19-20页 |
| ·菌株和质粒 | 第19-20页 |
| ·抗体 | 第20页 |
| ·主要试剂 | 第20页 |
| ·主要仪器 | 第20页 |
| 3 方法 | 第20-30页 |
| ·引物的设计与合成 | 第20页 |
| ·目的片段的扩增 | 第20-22页 |
| ·表达载体的构建 | 第22-26页 |
| ·扩增产物的回收与纯化 | 第22-23页 |
| ·目的片段INR 的酶切 | 第23页 |
| ·表达载体质粒的酶切 | 第23-24页 |
| ·目的片段INR 与表达载体连接 | 第24页 |
| ·大肠杆菌超级感受态的制备 | 第24-25页 |
| ·重组克隆载体的转化 | 第25页 |
| ·质粒的小量提取 | 第25-26页 |
| ·重组阳性克隆载体的鉴定 | 第26页 |
| ·菌液PCR | 第26页 |
| ·酶切鉴定 | 第26页 |
| ·测序鉴定 | 第26页 |
| ·pGEX-INR 和pET-30a-INR 的优化表达 | 第26-29页 |
| ·E.coli BL21(DE3)超级感受态菌的制备 | 第26-27页 |
| ·重组质粒转化表达宿主菌E.coli BL21（DE3） | 第27页 |
| ·重组表达载体pGEX-INR 的优化表达 | 第27-28页 |
| ·重组表达载体pET-30a-INR 的优化表达 | 第28-29页 |
| ·融合蛋白sELR 的大量表达与可溶性分析 | 第29页 |
| ·融合蛋白sELR 的Western-blot 鉴定 | 第29-30页 |
| ·pGEX-INR 表达的融合蛋白sELR 的Western-blot 鉴定 | 第29页 |
| ·pET-30a-INR 表达的融合蛋白sELR 的Western-blot 鉴定 | 第29-30页 |
| 4 结果 | 第30-35页 |
| ·目的片段INR 的PCR 扩增 | 第30页 |
| ·重组质粒pGEX-INR、pET-30a-INR 的菌液PCR 鉴定 | 第30-31页 |
| ·重组质粒pGEX-INR、pET-30a-INR 的酶切鉴定 | 第31页 |
| ·重组质粒pGEX-INR、pET-30a-INR 的核苷酸序列测定 | 第31-34页 |
| ·目的片段INR 在原核表达载体pGEX-6p-1、pET-30a 中的诱导表达 | 第34页 |
| ·目的片段INR 在原核表达载体pGEX-6p-1 中的诱导表达 | 第34页 |
| ·目的片段INR 在原核表达载体pET-30a 中的诱导表达 | 第34页 |
| ·融合蛋白sELR 的Western blot 鉴定 | 第34-35页 |
| ·pGEX-INR 表达融合蛋白sELR 的Western blot 鉴定 | 第34-35页 |
| ·pET-30a-INR 表达融合蛋白sELR 的的Western blot 鉴定 | 第35页 |
| 5 讨论 | 第35-37页 |
| ·立体依据 | 第35-36页 |
| ·载体的选择 | 第36页 |
| ·目的蛋白表达条件的优化与表达结果分析 | 第36-37页 |
| ·融合蛋白sELR 表达结果检测分析 | 第37页 |
| 6 结论 | 第37-38页 |
| 致谢 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-44页 |
| 作者简介 | 第44页 |
