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木质纤维素水解液抑制物耐受菌发酵生产木糖醇的研究及产乙醇基因工程探索

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-14页
第一章 研究背景综述第14-33页
   ·木质纤维素水解液第14-19页
     ·木质纤维素原料的组成第14-16页
     ·木质纤维素的稀酸水解及抑制物的形成第16-17页
     ·抑制物对细胞的抑制作用第17-18页
     ·木质纤维素水解液的脱毒第18-19页
   ·酵母发酵生产木糖醇第19-26页
     ·木糖醇的性质及用途第19-21页
     ·酵母代谢木糖生产木糖醇的机理第21-22页
     ·氧限制条件对酵母发酵生产木糖醇的影响第22-24页
     ·影响酵母发酵生产木糖醇的其他因素第24-26页
   ·微生物发酵生产燃料乙醇第26-31页
     ·燃料乙醇概述第26-27页
     ·发酵木质纤维素水解液产乙醇的潜力菌种第27-28页
     ·基因工程细菌的构建第28-31页
   ·本研究的目的内容与意义第31-33页
     ·本研究的目的与内容第31页
     ·本研究的意义第31-33页
第二章 季氏毕赤酵母在抑制物存在条件下发酵产木糖醇的研究第33-53页
   ·材料与仪器第34-36页
     ·菌种及筛选第34页
     ·培养基第34-35页
     ·主要试剂及溶液第35-36页
     ·主要仪器第36页
   ·实验方法与步骤第36-41页
     ·培养方法第36-38页
     ·细胞生长量的测定第38-39页
     ·木糖、木糖醇和乙酸浓度的测定第39页
     ·糠醛和羟甲基糠醛浓度的测定第39页
     ·粗酶液的制备第39页
     ·粗酶液总蛋白量的测定第39-40页
     ·酶活的测定第40-41页
   ·实验结果第41-50页
     ·接种量对木糖醇生产的影响第41-43页
     ·葡萄糖与木糖的比例对木糖醇生产的影响第43-45页
     ·不同浓度抑制物下的细胞生长及木糖醇发酵第45-47页
     ·季氏毕赤酵母对不同浓度抑制物的降解第47-48页
     ·不同浓度的抑制物对木糖发酵关键酶酶活的影响第48-50页
   ·讨论第50-53页
第三章 氧供应对季氏毕赤酵母发酵产木糖醇的影响第53-67页
   ·材料与仪器第53-54页
     ·菌种第53页
     ·培养基第53-54页
     ·主要试剂及溶液第54页
     ·主要仪器第54页
   ·实验方法与步骤第54-56页
     ·培养方法第54-55页
     ·发酵系统KLa 的测定第55页
     ·细胞生长量的测定第55-56页
     ·木糖和木糖醇浓度的测定第56页
     ·粗酶液的制备第56页
     ·粗酶液总蛋白量的测定第56页
     ·酶活的测定第56页
   ·实验结果第56-63页
     ·好氧、厌氧及氧限制发酵第56页
     ·不同氧限制发酵条件下的KLa 值第56-57页
     ·不同KLa 条件下的菌体生长和木糖醇发酵第57-60页
     ·不同KLa 对木糖发酵关键酶酶活的影响第60-63页
   ·讨论第63-67页
第四章 耐受水解液抑制物细菌的产乙醇基因工程改造初探第67-82页
   ·材料与仪器第68-71页
     ·菌种及载体第68页
     ·培养基第68-69页
     ·引物第69-70页
     ·主要试剂及溶液第70-71页
     ·主要仪器第71页
   ·实验方法与步骤第71-77页
     ·技术路线第71-73页
     ·分子生物学操作第73-75页
     ·大肠杆菌蛋白诱导表达及SDS-PAGE第75-76页
     ·细胞干重和残糖的测定第76页
     ·乙醇的检测第76-77页
   ·实验结果第77-80页
     ·pldh、pcd 和adhB 基因片段的克隆第77页
     ·产乙醇质粒的构建第77-79页
     ·pcd 基因和adhB 基因在大肠杆菌中的表达第79-80页
   ·讨论第80-82页
第五章 结论与展望第82-84页
   ·结论第82-83页
   ·展望第83-84页
     ·木质纤维素水解液直接发酵产木糖醇第83页
     ·进一步研究木糖醇的生产机理第83页
     ·基因工程菌的进一步构建第83-84页
参考文献第84-95页
攻读学位期间发表的学术论文第95-96页
致谢第96页

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