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大豆种子特异型启动子SACPD-Cp的克隆和功能分析

缩略词第1-5页
中文摘要第5-7页
Abstract第7-14页
第一章 文献综述第14-32页
   ·真核生物启动子的结构特点第14-16页
     ·转录起始位点第15页
     ·TATA-box第15-16页
     ·CAAT-box第16页
     ·GC-box第16页
   ·植物基因启动子的分类第16-23页
     ·组成型启动子第16-19页
     ·诱导型启动子第19-20页
     ·组织特异型启动子第20-23页
   ·种子特异型启动子第23-27页
     ·种子特异型启动子的结构第23-25页
     ·种子特异型启动子的研究现状第25-26页
     ·大豆种子特异性启动子的研究进展第26-27页
   ·GUS 基因表达检测第27-31页
     ·组织化学染色定位法第28-29页
     ·荧光法测定 GUS 活性第29-30页
     ·GUS 活性荧光法定性检测第30页
     ·分光光度法测定 GUS 活性第30-31页
   ·本研究的目的和意义第31-32页
第二章 大豆硬脂酰 ACP 去饱和酶启动子的克隆和序列分析第32-52页
   ·材料第33-34页
     ·植物材料第33页
     ·菌液与质粒第33页
     ·主要试剂第33页
     ·主要仪器设备第33-34页
     ·主要试剂和培养基的配制第34页
   ·实验方法第34-44页
     ·实时荧光定量PCR检测SACPD-C基因在各个组织中的表达量第34-37页
     ·TAIL-PCR 方法获得 SACPD-C 基因的上游远端序列第37-43页
     ·SACPD-C 基因上游启动子序列的克隆及其序列分析第43-44页
   ·结果与分析第44-51页
     ·大豆各组织中 RNA 的提取第44-45页
     ·大豆各组织 RNA 反转录第45页
     ·大豆各组织中 SACPD-C 基因表达量分析第45-46页
     ·SACPD-C 基因上游序列的克隆第46-48页
     ·SACPD-C 基因 5’端上游序列的序列分析第48-51页
   ·讨论第51页
   ·结论第51-52页
第三章 SACPD-C 启动子各表达载体的构建第52-61页
   ·材料第52页
   ·主要生化试剂和仪器设备第52页
   ·方法第52-57页
     ·引物设计第52-53页
     ·SACPD-C 启动子 5’端缺失片段的获得第53页
     ·启动子克隆载体的构建及鉴定第53-54页
     ·SACPD-C 启动子及各缺失片段表达载体构建第54-56页
     ·表达载体转化农杆菌第56-57页
   ·结果第57-60页
     ·SACPD-C 启动子缺失片段的克隆第57-58页
     ·启动子 SAC-Cp 各表达载体构建第58-59页
     ·SAC-Cp 各缺失表达载体转化农杆菌第59-60页
   ·结论第60-61页
第四章 嵌合表达载体的瞬时表达分析第61-73页
   ·材料第61-62页
     ·植物材料第61页
     ·主要生化试剂第61页
     ·主要仪器设备第61-62页
     ·试验试剂的配制第62页
   ·方法第62-66页
     ·大豆各组织的侵染第62-63页
     ·GUS 组织化学染色分析第63-64页
     ·GUS 荧光定量分析第64-66页
   ·结果与分析第66-71页
     ·启动子 SAC-Cp 组织化学染色分析第66-68页
     ·GUS 荧光定量分析第68-71页
   ·讨论第71-72页
   ·结论第72-73页
第五章 嵌合表达载体的稳定表达分析第73-89页
   ·材料第73-75页
     ·植物材料第73页
     ·主要生化试剂第73页
     ·主要仪器设备第73页
     ·MS 固体培养基和 PNS 的配制第73-75页
   ·方法第75-79页
     ·拟南芥的培养和侵染第75-77页
     ·转基因拟南芥的检测第77-78页
     ·GUS 组织化学染色及荧光定量第78-79页
   ·结果第79-87页
     ·拟南芥的培养和转基因植株抗性筛选第79-80页
     ·转基因拟南芥的鉴定第80-83页
     ·SAC-Cp 启动子及各缺失载体的荧光定量分析第83-86页
     ·GUS 组织化学染色分析第86-87页
   ·讨论第87-88页
   ·结论第88-89页
结论第89-90页
参考文献第90-101页
作者简介第101-102页
科研成果第102-103页
致谢第103页

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