| 摘要 | 第1-12页 |
| ABSTRACT | 第12-16页 |
| 缩略语中英文对照 | 第16-18页 |
| 第一部分 文献综述 | 第18-56页 |
| 第一章 胚胎干细胞分化为肝细胞的研究进展 | 第18-42页 |
| 1 胚胎干细胞研究现状 | 第18-22页 |
| ·胚胎干细胞的概念和研究概况 | 第18页 |
| ·ES细胞的生物学特性和研究价值 | 第18-20页 |
| ·ES细胞的最新进展:iPS细胞 | 第20-21页 |
| ·ES细胞研究的重点领域 | 第21-22页 |
| ·ES细胞研究面临的主要问题 | 第22页 |
| 2 哺乳动物体内肝脏发育过程 | 第22-23页 |
| 3 ES细胞诱导分化为肝细胞的策略和方法 | 第23-29页 |
| ·体外拟胚体途径诱导分化 | 第23-27页 |
| ·体外细胞单层诱导分化 | 第27-29页 |
| ·体内诱导分化 | 第29页 |
| 4 诱导性多能干细胞在肝病细胞治疗中的应用潜力 | 第29-31页 |
| ·iPS细胞的分化研究 | 第29-30页 |
| ·iPS细胞分化为肝细胞的研究现状 | 第30-31页 |
| 5 胚胎干细胞诱导分化来源的肝细胞的筛选 | 第31-32页 |
| 6 ES细胞或iPS细胞诱导分化为肝细胞存在的问题与前景 | 第32-33页 |
| 参考文献 | 第33-42页 |
| 第二章 肝细胞移植的研究现状 | 第42-56页 |
| 1 哺乳动物肝脏的重要生理功能 | 第42页 |
| 2 细胞治疗与肝细胞移植 | 第42-44页 |
| ·肝移植 | 第42-43页 |
| ·细胞治疗 | 第43页 |
| ·肝细胞移植 | 第43页 |
| ·生物人工肝系统 | 第43-44页 |
| 3 移植用肝细胞的来源 | 第44-46页 |
| ·原代肝细胞 | 第45页 |
| ·永生化肝细胞系 | 第45-46页 |
| ·成体干细胞 | 第46页 |
| ·胚胎干细胞或诱导性多能干细胞 | 第46页 |
| 4 肝细胞移植的部位 | 第46-49页 |
| ·门静脉内移植 | 第46-47页 |
| ·脾脏移植 | 第47页 |
| ·腹腔内移植 | 第47-48页 |
| ·外周血静脉移植 | 第48-49页 |
| ·其它部位移植 | 第49页 |
| 5 肝细胞移植面临的主要问题 | 第49-50页 |
| ·供体肝细胞的来源、活性和保存 | 第49页 |
| ·免疫排斥 | 第49-50页 |
| ·移植肝细胞的追踪和长期功能评价 | 第50页 |
| 6 肝细胞移植的前景 | 第50-56页 |
| 第二部分 实验研究 | 第56-124页 |
| 第三章 小鼠ES-D3细胞的培养及定向诱导分化为肝细胞的形态学观察 | 第56-72页 |
| 1 试验材料与方法 | 第57-62页 |
| ·试验材料 | 第57-59页 |
| ·试验方法 | 第59-62页 |
| 2 结果与分析 | 第62-66页 |
| ·MEF的分离培养及饲养层的制备 | 第62-63页 |
| ·mESC-D3细胞在饲养层细胞上的生长和扩增 | 第63-64页 |
| ·mESC-D3细胞在明胶上的生长 | 第64-65页 |
| ·mESC-D3细胞单层分化为肝样细胞过程中的形态学观察 | 第65页 |
| ·ES-D3-Hep细胞的超微特征 | 第65-66页 |
| 3 讨论 | 第66-68页 |
| ·无血清无饲养层培养体系的建立 | 第67-68页 |
| ·胚胎干细胞诱导分化为肝细胞的策略 | 第68页 |
| 参考文献 | 第68-72页 |
| 第四章 ES-D3-Hep细胞的基因表达检测及EGF对分化中细胞凋亡的影响 | 第72-84页 |
| 1 试验材料与方法 | 第72-77页 |
| ·试验材料 | 第72-73页 |
| ·试验方法 | 第73-77页 |
| 2 结果与分析 | 第77-81页 |
| ·总RNA的提取 | 第77页 |
| ·肝脏发育相关标志基因的RT-PCR的结果 | 第77-78页 |
| ·细胞凋亡率的比较 | 第78-79页 |
| ·细胞周期的分布比较 | 第79-81页 |
| 3 讨论 | 第81-82页 |
| ·分化所得ES-D3-Hep细胞的基因表达的检测 | 第81页 |
| ·诱导分化中的细胞凋亡和周期分布 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-84页 |
| 第五章 ES-D3-Hep细胞的蛋白分子标记检测及功能分析 | 第84-94页 |
| 1 试验材料与方法 | 第84-87页 |
| ·试验材料 | 第84-85页 |
| ·试验方法 | 第85-87页 |
| 2 结果与分析 | 第87-91页 |
| ·细胞免疫荧光检测 | 第87-88页 |
| ·ICG的摄取和排泌 | 第88-89页 |
| ·PAS实验 | 第89-90页 |
| ·分化率 | 第90-91页 |
| 3 讨论 | 第91-92页 |
| 参考文献 | 第92-94页 |
| 第六章 小鼠四氯化碳肝损伤模型的建立 | 第94-106页 |
| 1 材料和方法 | 第94-99页 |
| ·试验材料 | 第94-95页 |
| ·试验方法 | 第95-99页 |
| 2 结果与分析 | 第99-103页 |
| ·小鼠精神状态观察及存活情况统计 | 第99页 |
| ·肝脏病理形态学观察 | 第99-100页 |
| ·血液生化指标检测 | 第100-101页 |
| ·小鼠肝脏组织学观察 | 第101-103页 |
| 3 讨论 | 第103-104页 |
| 参考文献 | 第104-106页 |
| 第七章 ES-D3-Hep细胞移植对小鼠四氯化碳急性肝损伤作用的研究 | 第106-114页 |
| 1 试验材料与方法 | 第106-108页 |
| ·试验材料 | 第106-107页 |
| ·试验方法 | 第107-108页 |
| 2 结果与分析 | 第108-111页 |
| ·DAPI标记效果及标记后细胞活率 | 第108-109页 |
| ·冰冻切片的观察 | 第109-110页 |
| ·存活率 | 第110-111页 |
| 3 讨论 | 第111-112页 |
| 参考文献 | 第112-114页 |
| 第八章 人胎肝细胞移植对四氯化碳肝损伤小鼠效果的研究 | 第114-124页 |
| 1 材料与方法 | 第115-117页 |
| ·实验动物和细胞 | 第115页 |
| ·仪器设备 | 第115页 |
| ·药品试剂 | 第115页 |
| ·试验方法 | 第115-117页 |
| 2 结果与分析 | 第117-120页 |
| ·人肝细胞系HL-7702的培养 | 第117页 |
| ·血液生化指标检测及肝脏白蛋白分析 | 第117-119页 |
| ·存活率分析 | 第119页 |
| ·组织病理学分析 | 第119-120页 |
| 3 讨论 | 第120-122页 |
| 参考文献 | 第122-124页 |
| 全文结论 | 第124-126页 |
| 创新点 | 第126-128页 |
| 附录 | 第128-130页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第130-132页 |
| 致谢 | 第132页 |
