摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
1 绪论 | 第8-16页 |
·柽柳简介 | 第8页 |
·Peroxiredoxin(Prx)的研究状况 | 第8-11页 |
·关于Prx蛋白家族 | 第8-9页 |
·植物中Prx的分类及作用 | 第9-11页 |
·Prx在植物中的功能 | 第11页 |
·启动子的研究进展 | 第11-13页 |
·启动子的分类 | 第11页 |
·植物启动子的结构 | 第11-12页 |
·启动子克隆的方法 | 第12-13页 |
·启动子克隆的意义 | 第13页 |
·酵母双杂交的原理及应用 | 第13-15页 |
·酵母双杂交的原理 | 第13-14页 |
·酵母双杂交的组成部分 | 第14页 |
·酵母双杂交的优点 | 第14页 |
·酵母双杂交的缺点 | 第14页 |
·酵母双杂交的应用 | 第14-15页 |
·研究目的和意义 | 第15-16页 |
2 ThPrx1序列分析及启动子克隆 | 第16-28页 |
·ThPrx1序列分析 | 第16页 |
·ThPrx1启动子的克隆 | 第16-19页 |
·材料与试剂 | 第16页 |
·实验方法 | 第16-19页 |
·结果与分析 | 第19-26页 |
·柽柳ThPrx1基因的生物信息学分析 | 第19-22页 |
·启动子克隆结果分析 | 第22-26页 |
·讨论 | 第26-27页 |
·本章小结 | 第27-28页 |
3 ThPrx1基因的酵母转化及抗性分析 | 第28-38页 |
·材料 | 第28-29页 |
·菌株与载体 | 第28页 |
·主要化学试剂 | 第28页 |
·培养基 | 第28-29页 |
·主要仪器设备 | 第29页 |
·方法 | 第29-33页 |
·酵母表达载体pYES2-ThPrx1的构建 | 第29-30页 |
·柽柳ThPrx1基因和醉母表达载体pYES2双酶切 | 第30页 |
·柽柳ThPrx1基因与载体连接 | 第30-31页 |
·酵母表达载体重组质粒pYES2-ThPrx1的鉴定 | 第31页 |
·表达载体pYES2-ThPrx1及空载体pYES2的酵母遗传转化 | 第31页 |
·重组酵母INVSc1(pYES2-ThPrx1)逆境胁迫试验 | 第31-33页 |
·结果与分析 | 第33-36页 |
·目的基因的PCR扩增及酶切 | 第33页 |
·大肠杆菌重组质粒pYES2-ThPrx1 PCR检测 | 第33-34页 |
·大肠杆菌重组质粒pYES2-ThPrx1双酶切检测 | 第34页 |
·酵母重组质粒pYES2-ThPrx1的PCR检测 | 第34-35页 |
·转Peroxiredoxin基因酵母抗逆性实验 | 第35-36页 |
·讨论 | 第36-37页 |
·本章小结 | 第37-38页 |
4 酵母双杂交筛选与ThPrx1相互作用的蛋白 | 第38-57页 |
·材料 | 第38-39页 |
·植物材料 | 第38页 |
·菌种和载体 | 第38页 |
·试剂和酶 | 第38页 |
·培养基 | 第38-39页 |
·方法 | 第39-46页 |
·柽柳酵母cDNA文库构建 | 第39-42页 |
·酵母双杂交 | 第42-46页 |
·结果与分析 | 第46-54页 |
·柽柳总RNA提取 | 第46页 |
·双链cDNA的纯化 | 第46-47页 |
·文库的鉴定 | 第47页 |
·pGBKT7-ThPrx1载体的构建 | 第47-48页 |
·诱饵质粒的自激活及毒性检测 | 第48页 |
·与ThPrx1互作蛋白的筛选 | 第48-49页 |
·阳性克隆的进一步检测 | 第49-53页 |
·阳性克隆酵母质粒的电转及序列信息的获得 | 第53-54页 |
·讨论 | 第54-55页 |
·本章小结 | 第55-57页 |
结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-64页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第64-65页 |
致谢 | 第65-66页 |