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柽柳Peroxiredoxin基因(ThPrx1)的克隆及抗逆功能分析

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
1 绪论第8-16页
   ·柽柳简介第8页
   ·Peroxiredoxin(Prx)的研究状况第8-11页
     ·关于Prx蛋白家族第8-9页
     ·植物中Prx的分类及作用第9-11页
     ·Prx在植物中的功能第11页
   ·启动子的研究进展第11-13页
     ·启动子的分类第11页
     ·植物启动子的结构第11-12页
     ·启动子克隆的方法第12-13页
     ·启动子克隆的意义第13页
   ·酵母双杂交的原理及应用第13-15页
     ·酵母双杂交的原理第13-14页
     ·酵母双杂交的组成部分第14页
     ·酵母双杂交的优点第14页
     ·酵母双杂交的缺点第14页
     ·酵母双杂交的应用第14-15页
   ·研究目的和意义第15-16页
2 ThPrx1序列分析及启动子克隆第16-28页
   ·ThPrx1序列分析第16页
   ·ThPrx1启动子的克隆第16-19页
     ·材料与试剂第16页
     ·实验方法第16-19页
   ·结果与分析第19-26页
     ·柽柳ThPrx1基因的生物信息学分析第19-22页
     ·启动子克隆结果分析第22-26页
   ·讨论第26-27页
   ·本章小结第27-28页
3 ThPrx1基因的酵母转化及抗性分析第28-38页
   ·材料第28-29页
     ·菌株与载体第28页
     ·主要化学试剂第28页
     ·培养基第28-29页
     ·主要仪器设备第29页
   ·方法第29-33页
     ·酵母表达载体pYES2-ThPrx1的构建第29-30页
     ·柽柳ThPrx1基因和醉母表达载体pYES2双酶切第30页
     ·柽柳ThPrx1基因与载体连接第30-31页
     ·酵母表达载体重组质粒pYES2-ThPrx1的鉴定第31页
     ·表达载体pYES2-ThPrx1及空载体pYES2的酵母遗传转化第31页
     ·重组酵母INVSc1(pYES2-ThPrx1)逆境胁迫试验第31-33页
   ·结果与分析第33-36页
     ·目的基因的PCR扩增及酶切第33页
     ·大肠杆菌重组质粒pYES2-ThPrx1 PCR检测第33-34页
     ·大肠杆菌重组质粒pYES2-ThPrx1双酶切检测第34页
     ·酵母重组质粒pYES2-ThPrx1的PCR检测第34-35页
     ·转Peroxiredoxin基因酵母抗逆性实验第35-36页
   ·讨论第36-37页
   ·本章小结第37-38页
4 酵母双杂交筛选与ThPrx1相互作用的蛋白第38-57页
   ·材料第38-39页
     ·植物材料第38页
     ·菌种和载体第38页
     ·试剂和酶第38页
     ·培养基第38-39页
   ·方法第39-46页
     ·柽柳酵母cDNA文库构建第39-42页
     ·酵母双杂交第42-46页
   ·结果与分析第46-54页
     ·柽柳总RNA提取第46页
     ·双链cDNA的纯化第46-47页
     ·文库的鉴定第47页
     ·pGBKT7-ThPrx1载体的构建第47-48页
     ·诱饵质粒的自激活及毒性检测第48页
     ·与ThPrx1互作蛋白的筛选第48-49页
     ·阳性克隆的进一步检测第49-53页
     ·阳性克隆酵母质粒的电转及序列信息的获得第53-54页
   ·讨论第54-55页
   ·本章小结第55-57页
结论第57-58页
参考文献第58-64页
攻读学位期间发表的学术论文第64-65页
致谢第65-66页

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