| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-10页 |
| 专业名词缩写中英对照表 | 第10-11页 |
| 前言 | 第11-13页 |
| 实验技术路线 | 第13-14页 |
| 1 显微注射片段的制备 | 第14-18页 |
| ·材料和试剂 | 第14-15页 |
| ·主要仪器 | 第15页 |
| ·感受态菌种的制备 | 第15-16页 |
| ·受体菌的培养 | 第15页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第15-16页 |
| ·转化 | 第16页 |
| ·质粒的中量制备 | 第16-17页 |
| ·转基因片段的制备 | 第17-18页 |
| 2 转基因小鼠的构建 | 第18-21页 |
| ·材料与试剂 | 第18-19页 |
| ·主要仪器 | 第19页 |
| ·结扎公鼠 | 第19页 |
| ·超超排母鼠及受精卵的获得 | 第19-20页 |
| ·假孕母鼠的准备 | 第20页 |
| ·显微注射及输卵管移植 | 第20-21页 |
| 3 转基因鼠阳性检测 | 第21-29页 |
| ·材料与试剂 | 第21页 |
| ·主要仪器 | 第21-22页 |
| ·鼠尾gDNA的抽提 | 第22页 |
| ·PCR筛选 | 第22-23页 |
| ·Southern进一步检查插入片段的完整性 | 第23-25页 |
| ·FISH检测转基因鼠外源片段SPC-neu-polyA的整合位点 | 第25-27页 |
| ·Western检测转基因鼠蛋白表达 | 第27-28页 |
| ·IHC检测neu蛋白在转基因小鼠中的表达 | 第28-29页 |
| ·脱蜡和水化 | 第28页 |
| ·抗原修复 | 第28页 |
| ·免疫组化染色 | 第28-29页 |
| 4 转基因小鼠的表型鉴定 | 第29-34页 |
| ·灌注小鼠进行石蜡组织包埋及HE染色进行病理鉴定 | 第29-30页 |
| ·小鼠灌注 | 第29页 |
| ·石蜡包埋及HE染色进行病理鉴定 | 第29-30页 |
| ·实时定量PCR检测相关mRNA表达水平 | 第30-34页 |
| ·从组织中提取总RNA | 第30页 |
| ·DNase Ⅰ处理总RNA | 第30-31页 |
| ·RNA的纯化 | 第31页 |
| ·逆转录得到cDNA | 第31-32页 |
| ·cDNA内参基因G3PDH的扩增 | 第32页 |
| ·实时定量PCR检测炎症因子mRNA表达水平 | 第32-33页 |
| ·IHC检测炎症因子转基因鼠和肺癌病人肺组织的表达 | 第33-34页 |
| 5 结果 | 第34-52页 |
| ·转基因小鼠的制备结果 | 第34-40页 |
| ·SPC-neu质粒鉴定结果 | 第34页 |
| ·酶切结果 | 第34-36页 |
| ·转基因小鼠构建结果 | 第36页 |
| ·转基因阳性鼠的筛查结果 | 第36-40页 |
| ·转基因阳性小鼠的表型鉴定结果 | 第40-46页 |
| ·病理切片HE染色结果 | 第40-42页 |
| ·Real Time-PCR检测肺部炎症因子mRNA的表达结果 | 第42-44页 |
| ·IHC检测炎症因子在转基因阳性鼠肺组织中的表达结果 | 第44-46页 |
| ·IHC检测炎症因子在neu阳性肺癌病人肺组织中的表达结果 | 第46-52页 |
| ·IHC检测neu在肺癌病人肺组织中的表达结果 | 第46-48页 |
| ·IHC检测炎症因子TNF-α在肺癌病人中的表达结果 | 第48-50页 |
| ·IHC检测炎症因子IL-6在肺癌病人肺组织中的表达结果 | 第50-52页 |
| 6 讨论 | 第52-55页 |
| 7 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-60页 |
| 综述 | 第60-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 攻读硕士学位期间发表的文章 | 第71-72页 |
| 个人简介 | 第72页 |
