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猪霍乱沙门氏菌C78-1株crp缺失株的构建及其生物学特性初步研究

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-9页
第1章 猪霍乱沙门氏菌研究进展第9-21页
   ·猪霍乱沙门氏菌的危害第9-10页
   ·病原学第10-13页
     ·形态及培养特性第10-11页
     ·抗原结构第11页
     ·毒力特性第11-13页
   ·发病机制第13页
   ·诊断第13-15页
   ·猪霍乱沙门氏菌疫苗第15-17页
   ·载体研究第17-20页
   ·展望第20-21页
第2章 猪霍乱沙门氏菌 C78-1 株△crp 缺失株的构建第21-42页
   ·材料第21-26页
     ·质粒、菌株和培养条件第21-23页
     ·培养基、试剂和实验动物第23页
     ·主要培养基及试剂配制第23-24页
     ·主要溶液的配制第24-25页
     ·PCR 引物的设计与合成第25页
     ·主要实验器材第25-26页
   ·方法第26-31页
     ·基因组DNA 的提取第26页
     ·PCR 产物和酶切产物的回收与纯化第26页
     ·感受态细胞的制备第26-27页
     ·目的片段与T 载体的连接转化第27页
     ·质粒的提取第27-28页
     ·重组质粒的鉴定第28页
     ·猪霍乱沙门氏菌C78-1 株crp 基因前后臂片段的扩增与鉴定第28页
     ·重组自杀性质粒pRE△crp 的构建第28-30页
     ·猪霍乱沙门氏菌△crp 缺失株的构建第30-31页
   ·结果与分析第31-39页
     ·C78-1 株crp 基因的克隆与序列分析第31-32页
     ·重组自杀性质粒pRE△crp 的构建第32-37页
     ·缺失菌株△crpC78-1 的筛选第37-39页
   ·讨论第39-42页
     ·重组自杀性质粒介导细菌缺失基因的等位交换第39-40页
     ·靶基因的选择第40-41页
     ·菌株的选择第41-42页
第3章 减毒猪霍乱沙门氏菌△crpC78-1 株生物学特性初步研究第42-53页
   ·材料第42-44页
     ·试验用菌株、试剂和培养基第42页
     ·实验动物第42页
     ·主要培养基及试剂配制第42-44页
     ·主要实验器材第44页
   ·方法第44-45页
     ·沙门氏菌的PCR 鉴定第44页
     ·缺失菌株ΔcrpC78-1 表型鉴定第44页
     ·缺失菌株ΔcrpC78-1 遗传稳定性第44-45页
     ·缺失菌株ΔcrpC78-1 生长特性第45页
     ·缺失菌株ΔcrpC78-1 对小白鼠的毒力实验第45页
   ·结果与分析第45-50页
     ·缺失菌株ΔcrpC78-1 表型鉴定第45-47页
     ·缺失菌株ΔcrpC78-1 遗传稳定性第47页
     ·缺失菌株ΔcrpC78-1 生长特性第47-48页
     ·缺失菌株ΔcrpC78-1 对小白鼠的毒力实验第48-50页
   ·讨论第50-52页
     ·crp 基因缺失对毒力的影响第50-51页
     ·crp 基因缺失对碳源代谢能力的影响第51-52页
   ·展望第52-53页
第4章 结论第53-54页
参考文献第54-62页
致谢第62-63页
攻读硕士学位期间的研究成果第63页

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