摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-9页 |
第1章 猪霍乱沙门氏菌研究进展 | 第9-21页 |
·猪霍乱沙门氏菌的危害 | 第9-10页 |
·病原学 | 第10-13页 |
·形态及培养特性 | 第10-11页 |
·抗原结构 | 第11页 |
·毒力特性 | 第11-13页 |
·发病机制 | 第13页 |
·诊断 | 第13-15页 |
·猪霍乱沙门氏菌疫苗 | 第15-17页 |
·载体研究 | 第17-20页 |
·展望 | 第20-21页 |
第2章 猪霍乱沙门氏菌 C78-1 株△crp 缺失株的构建 | 第21-42页 |
·材料 | 第21-26页 |
·质粒、菌株和培养条件 | 第21-23页 |
·培养基、试剂和实验动物 | 第23页 |
·主要培养基及试剂配制 | 第23-24页 |
·主要溶液的配制 | 第24-25页 |
·PCR 引物的设计与合成 | 第25页 |
·主要实验器材 | 第25-26页 |
·方法 | 第26-31页 |
·基因组DNA 的提取 | 第26页 |
·PCR 产物和酶切产物的回收与纯化 | 第26页 |
·感受态细胞的制备 | 第26-27页 |
·目的片段与T 载体的连接转化 | 第27页 |
·质粒的提取 | 第27-28页 |
·重组质粒的鉴定 | 第28页 |
·猪霍乱沙门氏菌C78-1 株crp 基因前后臂片段的扩增与鉴定 | 第28页 |
·重组自杀性质粒pRE△crp 的构建 | 第28-30页 |
·猪霍乱沙门氏菌△crp 缺失株的构建 | 第30-31页 |
·结果与分析 | 第31-39页 |
·C78-1 株crp 基因的克隆与序列分析 | 第31-32页 |
·重组自杀性质粒pRE△crp 的构建 | 第32-37页 |
·缺失菌株△crpC78-1 的筛选 | 第37-39页 |
·讨论 | 第39-42页 |
·重组自杀性质粒介导细菌缺失基因的等位交换 | 第39-40页 |
·靶基因的选择 | 第40-41页 |
·菌株的选择 | 第41-42页 |
第3章 减毒猪霍乱沙门氏菌△crpC78-1 株生物学特性初步研究 | 第42-53页 |
·材料 | 第42-44页 |
·试验用菌株、试剂和培养基 | 第42页 |
·实验动物 | 第42页 |
·主要培养基及试剂配制 | 第42-44页 |
·主要实验器材 | 第44页 |
·方法 | 第44-45页 |
·沙门氏菌的PCR 鉴定 | 第44页 |
·缺失菌株ΔcrpC78-1 表型鉴定 | 第44页 |
·缺失菌株ΔcrpC78-1 遗传稳定性 | 第44-45页 |
·缺失菌株ΔcrpC78-1 生长特性 | 第45页 |
·缺失菌株ΔcrpC78-1 对小白鼠的毒力实验 | 第45页 |
·结果与分析 | 第45-50页 |
·缺失菌株ΔcrpC78-1 表型鉴定 | 第45-47页 |
·缺失菌株ΔcrpC78-1 遗传稳定性 | 第47页 |
·缺失菌株ΔcrpC78-1 生长特性 | 第47-48页 |
·缺失菌株ΔcrpC78-1 对小白鼠的毒力实验 | 第48-50页 |
·讨论 | 第50-52页 |
·crp 基因缺失对毒力的影响 | 第50-51页 |
·crp 基因缺失对碳源代谢能力的影响 | 第51-52页 |
·展望 | 第52-53页 |
第4章 结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
攻读硕士学位期间的研究成果 | 第63页 |