| 摘要 | 第3-7页 |
| abstract | 第7-10页 |
| 中英文缩略表 | 第11-17页 |
| 第1章 引言 | 第17-24页 |
| 1.1 神经病理性疼痛概述 | 第17-18页 |
| 1.2 HIV感染及gp120诱发神经病理痛概述 | 第18-19页 |
| 1.3 HAART加重HIV感染并发的神经病理痛 | 第19页 |
| 1.4 ATP及其P2受体介导周围神经病理痛 | 第19-20页 |
| 1.5 DRG神经元与卫星胶质细胞的异常相互作用涉及神经病理痛 | 第20-22页 |
| 1.6 HIV感染相关神经病理痛的中药干预作用 | 第22-24页 |
| 第2章 P2X_3受体介导gp120诱发神经病理痛 | 第24-45页 |
| 2.1 材料 | 第24-29页 |
| 2.1.1 动物与细胞 | 第24页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第24-26页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第26-27页 |
| 2.1.4 溶液配制 | 第27-29页 |
| 2.2 方法 | 第29-36页 |
| 2.2.1 动物分组及gp120+ddC大鼠建模 | 第29-30页 |
| 2.2.2 大鼠痛行为测定 | 第30页 |
| 2.2.3 总RNA提取及qPCR检测 | 第30-32页 |
| 2.2.4 免疫组织化学检测 | 第32页 |
| 2.2.5 蛋白印迹检测 | 第32-34页 |
| 2.2.6 DRG神经元原代培养、分组及处理 | 第34页 |
| 2.2.7 ATPlite1step检测细胞ATP释放量 | 第34-35页 |
| 2.2.8 神经元全细胞膜片钳实验 | 第35页 |
| 2.2.9 同源建模及分子对接 | 第35-36页 |
| 2.2.10 统计学方法 | 第36页 |
| 2.3 结果 | 第36-43页 |
| 2.3.1 A317491降低gp120模型大鼠机械痛敏(MWT)与热痛敏(TWL) | 第36-37页 |
| 2.3.2 A317491下调gp120模型大鼠DRG中P2X_3受体mRNA及蛋白的高表达 | 第37-38页 |
| 2.3.3 A317491下调gp120模型大鼠DRG中高表达的P2X_3受体免疫反应性 | 第38-39页 |
| 2.3.4 A317491下调gp120模型大鼠DRG中ERK1/2的磷酸化水平 | 第39-40页 |
| 2.3.5 A317491抑制gp120处理后原代DRG神经元的ATP释放 | 第40页 |
| 2.3.6 A317491抑制gp120处理神经元增大的α,β-meATP激动电流 | 第40-41页 |
| 2.3.7 A317491与gp120分子对接结果 | 第41-43页 |
| 2.4 讨论 | 第43-45页 |
| 2.4.1 P2X_3受体介导gp120诱发的大鼠机械痛敏与热痛敏 | 第43页 |
| 2.4.2 A317491与gp120相互作用抑制ATP释放、降低DRG神经元兴奋性 | 第43-44页 |
| 2.4.3 Gp120诱发的NPP涉及ERK1/2信号通路 | 第44-45页 |
| 第3章 第3章P2Y_12受体介导gp120加ddC诱发神经病理痛 | 第45-68页 |
| 3.1 材料 | 第45-50页 |
| 3.1.1 动物及细胞 | 第45页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第45-47页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第47-48页 |
| 3.1.4 溶液配制 | 第48-50页 |
| 3.2 方法 | 第50-57页 |
| 3.2.1 P2Y_12shRNA质粒的构建、筛选与转染 | 第50-52页 |
| 3.2.2 NPP动物建模及分组 | 第52页 |
| 3.2.3 大鼠痛行为测定 | 第52页 |
| 3.2.4 总RNA提取及qPCR检测 | 第52-54页 |
| 3.2.5 免疫荧光双标 | 第54-55页 |
| 3.2.6 蛋白印迹检测 | 第55页 |
| 3.2.7 原代SGCs分离培养、细胞分组及药物处理 | 第55-56页 |
| 3.2.8 原代SGCs细胞内钙离子浓度测定 | 第56-57页 |
| 3.2.9 统计方法 | 第57页 |
| 3.3 结果 | 第57-65页 |
| 3.3.1 P2Y_12shRNA干扰片段及细胞转染比例筛选结果 | 第57-58页 |
| 3.3.2 gp120+ddC处理上调大鼠DRG内P2Y_12受体表达 | 第58-60页 |
| 3.3.3 下调P2Y_12受体表达降低gp120+ddC模型大鼠机械痛敏与热痛敏 | 第60-61页 |
| 3.3.4 P2Y_12shRNA下调gp120+ddC模型大鼠DRG中P2Y_12与GFAP共表达 | 第61-62页 |
| 3.3.5 P2Y_12shRNA下调gp120+ddC模型大鼠DRG中炎性因子表达 | 第62-63页 |
| 3.3.6 P2Y_12shRNA抑制gp120+ddC模型大鼠DRG中P38MAPK信号通路 | 第63-64页 |
| 3.3.7 P2Y12shRNA降低gp120+ddC处理的原代SGCs内升高的2-MeSADP诱发细胞内钙离子浓度 | 第64-65页 |
| 3.4 讨论 | 第65-68页 |
| 第4章 穿心莲内酯对P2X_7受体介导的HIVgp120加ddC诱发神经病理痛作用研究 | 第68-90页 |
| 4.1 材料 | 第68-71页 |
| 4.1.1 动物与细胞 | 第68页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第68-70页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第70-71页 |
| 4.1.4 溶液配制 | 第71页 |
| 4.2 方法 | 第71-75页 |
| 4.2.1 NPP动物建模及分组 | 第71-72页 |
| 4.2.2 大鼠痛行为测定 | 第72页 |
| 4.2.3 总RNA提取及qPCR检测 | 第72-73页 |
| 4.2.4 免疫荧光双标 | 第73页 |
| 4.2.5 蛋白印迹检测 | 第73-74页 |
| 4.2.6 原代SGCs分离培养、细胞分组及药物处理 | 第74页 |
| 4.2.7 原代SGCs细胞内钙离子浓度测定 | 第74页 |
| 4.2.8 同源建模及分子对接 | 第74-75页 |
| 4.2.9 统计方法 | 第75页 |
| 4.3 结果 | 第75-87页 |
| 4.3.1 穿心莲内酯降低gp120+ddC模型大鼠DRG中P2X_7受体表达 | 第75-76页 |
| 4.3.2 穿心莲内酯降低gp120+ddC模型大鼠机械痛敏与热痛敏 | 第76-77页 |
| 4.3.3 穿心莲内酯降低gp120+ddC模型大鼠DRG中P2X_7受体与GFAP共表达 | 第77-79页 |
| 4.3.4 穿心莲内酯降低gp120+ddC模型大鼠DRG中促炎因子TNF-α与IL-1β表达 | 第79-80页 |
| 4.3.5 穿心莲内酯升高gp120+ddC模型大鼠DRG中抗炎因子IL-10表达 | 第80-81页 |
| 4.3.6 穿心莲内酯降低gp120+ddC模型大鼠DRG中ERK1/2磷酸化水平 | 第81-82页 |
| 4.3.7 穿心莲内酯抑制gp120+ddC处理的SGCs内P2X_7受体受体介导的[Ca~2+]i增大 | 第82-85页 |
| 4.3.8 生物信息学预测穿心莲内酯与P2X_7受体蛋白相互作用 | 第85-87页 |
| 4.4 讨论 | 第87-90页 |
| 第5章 结论 | 第90-91页 |
| 5.1 结论 | 第90-91页 |
| 致谢 | 第91-92页 |
| 参考文献 | 第92-103页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第103-105页 |
| 综述一 | 第105-116页 |
| 参考文献 | 第113-116页 |
| 综述二 | 第116-127页 |
| 参考文献 | 第122-127页 |
