致谢 | 第4-11页 |
摘要 | 第11-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-26页 |
1 牡丹组织培养研究概述 | 第13-14页 |
2 牡丹试管苗生根研究 | 第14-16页 |
2.1 基本培养基类型 | 第14页 |
2.2 生长调节物质 | 第14-15页 |
2.3 蔗糖 | 第15页 |
2.4 环境因子 | 第15-16页 |
2.4.1 温度 | 第15页 |
2.4.2 光照 | 第15-16页 |
2.5 多胺 | 第16页 |
3 植物酚类物质研究概述 | 第16-17页 |
3.1 植物酚类组成 | 第16页 |
3.2 酚类与IAA代谢 | 第16页 |
3.3 酚类与生根 | 第16-17页 |
3.4 酚类与牡丹不定根的发生 | 第17页 |
4 植物内源激素研究概述 | 第17-24页 |
4.1 植物内源激素测定方法 | 第18-19页 |
4.1.1 生物鉴定法 | 第18页 |
4.1.2 免疫检测法 | 第18-19页 |
4.1.3 理化检测法 | 第19页 |
4.2 LC-MS检测法的样品前处理 | 第19-20页 |
4.2.1 内源激素的提取溶剂 | 第20页 |
4.2.2 纯化与富集 | 第20页 |
4.3 植物内源激素与不定根的形成 | 第20-22页 |
4.3.1 生长素 | 第21页 |
4.3.2 细胞分裂素 | 第21页 |
4.3.3 赤霉素 | 第21-22页 |
4.3.4 脱落酸 | 第22页 |
4.4 免疫组织定位技术研究概况 | 第22-24页 |
4.4.1 免疫胶体金技术 | 第22-23页 |
4.4.2 免疫酶技术 | 第23页 |
4.4.3 免疫荧光技术 | 第23-24页 |
5 植物代谢组学研究概况 | 第24-26页 |
5.1 代谢组学的检测技术 | 第24-25页 |
5.1.1 核磁共振(NMR)技术 | 第24页 |
5.1.2 色谱-质谱技术 | 第24-25页 |
5.2 植物代谢组学对酚类的研究 | 第25-26页 |
第二章 研究背景与意义 | 第26-29页 |
技术路线 | 第28-29页 |
第三章 反应产物的分离提纯与结构鉴定 | 第29-51页 |
1 材料与方法 | 第29-31页 |
1.1 药品与仪器 | 第29页 |
1.2 方法 | 第29-31页 |
1.2.1 在PPO的作用下酚类物质与IAA反应 | 第29页 |
1.2.2 C18固相萃取柱与产物回收率关系 | 第29页 |
1.2.3 产物的分离提纯条件优化 | 第29-30页 |
1.2.4 产物结构表征 | 第30-31页 |
2 结果分析 | 第31-50页 |
2.1 在PPO的作用下不同酚类物质与IAA的反应结果 | 第31页 |
2.2 C18固相萃取柱对产物回收率的影响 | 第31-34页 |
2.3 产物的分离提纯结果 | 第34-36页 |
2.4 产物III结构鉴定 | 第36-45页 |
2.4.1 产物III核磁共振(NMR)表征 | 第36页 |
2.4.2 产物III质谱表征 | 第36页 |
2.4.3 产物III真空热裂解-气质联用(PY-GC-MS)表征 | 第36-45页 |
2.5 产物I结构鉴定 | 第45-50页 |
2.5.1 产物I的NMR表征 | 第45页 |
2.5.2 产物I的质谱与红外光谱表征 | 第45-50页 |
3 结论与讨论 | 第50-51页 |
第四章 反应产物生理活性研究 | 第51-68页 |
1 材料与方法 | 第51-54页 |
1.1 药品与仪器 | 第51页 |
1.2 不同浓度的产物与小麦芽鞘伸长的关系 | 第51页 |
1.2.1 制备芽鞘 | 第51页 |
1.2.2 不同产物处理 | 第51页 |
1.3 不同浓度的产物与绿豆下胚轴生根的关系 | 第51-54页 |
1.3.1 插条制备 | 第51-52页 |
1.3.2 生根培养 | 第52页 |
1.3.3 绿豆插条下胚轴生根过程中细胞学观察 | 第52-53页 |
1.3.4 绿豆下胚轴生根期间相关酶活性的测定 | 第53-54页 |
1.4 数据处理 | 第54页 |
2 结果与分析 | 第54-65页 |
2.1 不同浓度的产物I对小麦芽鞘伸长的影响 | 第54-56页 |
2.1.1 不同浓度的产物I处理不同时间对与小麦芽鞘伸长的影响 | 第54-56页 |
2.1.2 不同时间段内产物I对小麦芽鞘伸长的影响 | 第56页 |
2.2 不同浓度产物I对绿豆下胚轴不定根形成的影响 | 第56-61页 |
2.2.1 不同浓度产物I对绿豆下胚轴不定根形成的影响 | 第56-57页 |
2.2.2 绿豆下胚轴不定根发生的细胞学观察 | 第57-59页 |
2.2.3 产物I对绿豆下胚轴生根期间酶活性的影响 | 第59-61页 |
2.3 不同浓度的产物III对小麦芽鞘伸长的影响 | 第61-62页 |
2.3.1 不同浓度的产物III处理不同时间对与小麦芽鞘伸长的影响 | 第61-62页 |
2.3.2 不同时间段内产物III对小麦芽鞘伸长的影响 | 第62页 |
2.4 不同浓度产物III对绿豆下胚轴不定根形成的影响 | 第62-65页 |
2.4.1 不同浓度产物III对绿豆下胚轴生根的影响 | 第62-63页 |
2.4.2 产物III对绿豆下胚轴生根期间酶活性的影响 | 第63-65页 |
3 结论与讨论 | 第65-68页 |
3.1 产物与IAA生长素活性比较 | 第65-66页 |
3.2 产物对绿豆下胚轴不定根形成过程酶活性的影响 | 第66-68页 |
第五章 反应产物与牡丹试管苗生根研究 | 第68-78页 |
1 材料与方法 | 第68-71页 |
1.1 药品与仪器 | 第68页 |
1.2 牡丹试管苗培养 | 第68-70页 |
1.2.1 外植体的消毒 | 第68页 |
1.2.2 诱导培养 | 第68页 |
1.2.3 增殖培养基筛选 | 第68-69页 |
1.2.4 生根培养基筛选 | 第69-70页 |
1.3 不同浓度产物处理 | 第70页 |
1.4 牡丹试管苗生根过程中相关酶活性的测定 | 第70-71页 |
1.5 不同浓度酚类处理 | 第71页 |
2 结果分析 | 第71-76页 |
2.1 不同激素浓度对牡丹试管苗增殖的影响 | 第71-72页 |
2.2 不同浓度IAA对牡丹试管苗生根的影响 | 第72-73页 |
2.3 不同浓度产物对牡丹试管苗生根的影响 | 第73页 |
2.4 不同产物处理对牡丹试管苗酶活性的影响 | 第73-75页 |
2.4.1 不同产物处理对牡丹试管苗POD活性的影响 | 第73-74页 |
2.4.2 不同产物处理对牡丹试管苗PPO活性的影响 | 第74页 |
2.4.3 不同产物处理对牡丹试管苗IAAO活性的影响 | 第74-75页 |
2.5 添加不同浓度酚类物质对牡丹试管苗生根的影响 | 第75-76页 |
3 结论与讨论 | 第76-78页 |
3.1 添加产物对牡丹试管苗生根的影响 | 第76-77页 |
3.2 添加产物对牡丹试管苗生根期间酶活性的影响 | 第77-78页 |
第六章 牡丹试管苗生根期间内源激素及IAA免疫定位研究 | 第78-100页 |
1 材料与方法 | 第78-81页 |
1.1 药品与仪器 | 第78页 |
1.2 内源激素检测方法建立 | 第78-79页 |
1.2.1 植物激素标准液配制 | 第78页 |
1.2.2 检测条件 | 第78-79页 |
1.2.2.1 色谱条件 | 第78-79页 |
1.2.2.2 质谱条件 | 第79页 |
1.3 牡丹试管苗生根期间内源激素的提取 | 第79-80页 |
1.4 牡丹试管苗生根期间的细胞学观察及IAA免疫学定位 | 第80-81页 |
2 结果分析 | 第81-97页 |
2.1 LC-MS对6种激素的分析结果 | 第81-89页 |
2.1.1 不同浓度甲酸对激素响应的影响 | 第81页 |
2.1.2 6种激素的液相与质谱分析 | 第81-87页 |
2.1.3 激素的检测方法考察结果 | 第87-89页 |
2.2 牡丹试管苗生根过程中不同部位内源激素变化 | 第89-93页 |
2.2.1 IAA含量变化 | 第89页 |
2.2.2 ZT含量变化 | 第89-90页 |
2.2.3 GA3含量变化 | 第90页 |
2.2.4 ABA含量变化 | 第90-93页 |
2.3 牡丹试管苗生根期间IAA免疫荧光定位 | 第93-97页 |
2.3.1 不同浓度IAA单克隆抗体对免疫荧光定位的影响 | 第93-94页 |
2.3.2 牡丹试管苗生根期间细胞学观察及IAA免疫荧光定位 | 第94-97页 |
3 结论与讨论 | 第97-100页 |
3.1 UPLC-Q-TOF-MS植物激素检测方法的建立 | 第97页 |
3.2 牡丹试管苗生根过程中内源激素变化 | 第97-98页 |
3.3 牡丹试管苗生根期间IAA免疫定位 | 第98-100页 |
第七章 基于代谢组学对酚类物质与牡丹试管苗生根关系的初步分析 | 第100-112页 |
1 材料与方法 | 第100-102页 |
1.1 药品与仪器 | 第100页 |
1.2 试管苗预处理 | 第100页 |
1.3 代谢物提取 | 第100-101页 |
1.4 LC-MS检测方法 | 第101页 |
1.4.1 色谱条件 | 第101页 |
1.4.2 质谱条件 | 第101页 |
1.5 数据分析 | 第101-102页 |
2 结果分析 | 第102-106页 |
2.1 数据采集分析 | 第102-105页 |
2.2 不同处理下的模型分析 | 第105-106页 |
3 结论与讨论 | 第106-112页 |
附图 | 第112-115页 |
参考文献 | 第115-126页 |
缩略语词汇表 | 第126-128页 |
ABSTRACT | 第128-131页 |