| 摘要 | 第6-7页 |
| abstract | 第7页 |
| 英文缩略表 | 第10-11页 |
| 第一章 引言 | 第11-18页 |
| 1.1 猪瘟及猪瘟病毒 | 第11-13页 |
| 1.1.1 猪瘟 | 第11页 |
| 1.1.2 猪瘟病毒 | 第11-13页 |
| 1.1.3 猪瘟病毒NS4B蛋白 | 第13页 |
| 1.2 E3泛素连接酶 | 第13-16页 |
| 1.2.1 RING E3 泛素连接酶 | 第14-15页 |
| 1.2.2 RING E3 泛素连接酶抗病毒作用 | 第15-16页 |
| 1.3 猪瘟病毒及其它黄病毒科成员与E3泛素连接酶的相互关系 | 第16页 |
| 1.4 研究目的和意义 | 第16-18页 |
| 第二章 E3 泛素连接酶PRNF114 的抗猪瘟病毒活性研究 | 第18-41页 |
| 2.1 材料和方法 | 第18-26页 |
| 2.1.1 细胞和毒株 | 第18页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第18页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第18页 |
| 2.1.4 动物感染试验 | 第18-19页 |
| 2.1.5 外周血单个核细胞的分离 | 第19页 |
| 2.1.6 RNA提取及反转录 | 第19页 |
| 2.1.7 荧光定量RT-qPCR | 第19-20页 |
| 2.1.8 质粒的构建及细胞转染 | 第20-21页 |
| 2.1.9 稳定表达pRNF114和pRNF114(C64/67A)的PK-15 细胞系构建 | 第21-22页 |
| 2.1.10 敲除RNF114的PK-15 细胞系构建 | 第22-23页 |
| 2.1.11 细胞活力测定 | 第23页 |
| 2.1.12 病毒滴度测定 | 第23-24页 |
| 2.1.13 免疫共沉淀试验 | 第24页 |
| 2.1.14 GST蛋白纯化 | 第24-25页 |
| 2.1.15 GST pulldown试验 | 第25页 |
| 2.1.16 体外泛素化试验 | 第25页 |
| 2.1.17 Western blotting检测 | 第25-26页 |
| 2.1.18 激光共聚焦试验 | 第26页 |
| 2.1.19 统计学分析 | 第26页 |
| 2.2 结果 | 第26-39页 |
| 2.2.1 CSFV感染诱导pRNF114 表达上调 | 第26-28页 |
| 2.2.2 过表达pRNF114 抑制CSFV复制 | 第28-29页 |
| 2.2.3 敲除内源性RNF114 促进CSFV复制 | 第29-30页 |
| 2.2.5 pRNF114 抑制CSFV复制依赖其E3 泛素连接酶活性 | 第30-31页 |
| 2.2.6 pRNF114 与CSFV NS4B蛋白相互作用 | 第31-33页 |
| 2.2.7 pRNF114(69-228)结构域与NS4B(180-347)结构域相互作用 | 第33-35页 |
| 2.2.8 pRNF114 通过蛋白酶体途径降解NS4B蛋白 | 第35-36页 |
| 2.2.9 pRNF114 泛素化NS4B蛋白 | 第36-38页 |
| 2.2.10 pRNF114 催化NS4B蛋白发生K27 连接的聚泛素化修饰 | 第38-39页 |
| 2.3 讨论 | 第39-41页 |
| 第三章 全文结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-50页 |
| 致谢 | 第50-52页 |
| 作者简历 | 第52页 |
