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溶酶体内酸性环境改变致AD发病机制的研究

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
第1章 研究背景第9-17页
    1.1 阿尔茨海默病第9-10页
    1.2 小胶质细胞第10-12页
    1.3 淀粉样蛋白第12-13页
    1.4 溶酶体第13-14页
    1.5 自噬与溶酶体第14-15页
    1.6 V-ATPase与溶酶体第15-17页
第2章 材料与方法第17-28页
    2.1 实验材料第17-20页
        2.1.1 实验动物第17页
        2.1.2 实验细胞第17页
        2.1.3 实验试剂第17-19页
        2.1.4 实验工具及耗材第19-20页
    2.2 实验仪器第20页
    2.3 实验方法第20-28页
        2.3.1 实验试剂配制第20-22页
        2.3.2 行为学检测第22-23页
            2.3.2.1 Morris水迷宫检测第22页
            2.3.2.2 Y-迷宫检测第22-23页
        2.3.3 小胶质细胞培养第23-24页
        2.3.4 溶酶体酸化以及pH值测定第24页
        2.3.5 溶酶体内蛋白酶活性的测定第24页
        2.3.6 蛋白质提取第24-25页
        2.3.7 蛋白质定量第25页
        2.3.8 SDS凝胶电泳(SDS-PAGE)第25-26页
        2.3.9 转膜和抗体孵育第26页
        2.3.10 化学发光、显影、定影第26-27页
        2.3.11 分析显影图象第27页
        2.3.12 荧光染色与成像第27页
        2.3.13 统计学分析第27-28页
第3章 实验结果第28-36页
    3.1 Aβ_(25-35)可诱导HT22细胞产生自噬第28-29页
    3.2 细胞活力随Aβ_(25-35)处理时间增长而降低第29-30页
    3.3 BafilomycinA1(BafA1)能提升HT22细胞活力第30-32页
    3.4 LC3及V-ATPase表达的Western-blot实验结果第32-33页
    3.5 小胶质细胞浆内以及溶酶体内pH值差异第33-35页
    3.6 小胶质细胞溶酶体膜上V-ATPase的变化第35-36页
第4章 讨论第36-39页
    4.1 Aβ_(25-35)刺激细胞产生自噬体结构与浓度正相关第36页
    4.2 小胶质细胞胞浆及溶酶体pH值的变化第36-37页
    4.3 V-ATPase表达与Aβ诱导的溶酶体自噬现象的关系第37-39页
第5章 结论第39-40页
参考文献第40-46页
附录第46-61页
致谢第61-62页
攻读硕士学位期间的研究成果第62页

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