摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第1章 研究背景 | 第9-17页 |
1.1 阿尔茨海默病 | 第9-10页 |
1.2 小胶质细胞 | 第10-12页 |
1.3 淀粉样蛋白 | 第12-13页 |
1.4 溶酶体 | 第13-14页 |
1.5 自噬与溶酶体 | 第14-15页 |
1.6 V-ATPase与溶酶体 | 第15-17页 |
第2章 材料与方法 | 第17-28页 |
2.1 实验材料 | 第17-20页 |
2.1.1 实验动物 | 第17页 |
2.1.2 实验细胞 | 第17页 |
2.1.3 实验试剂 | 第17-19页 |
2.1.4 实验工具及耗材 | 第19-20页 |
2.2 实验仪器 | 第20页 |
2.3 实验方法 | 第20-28页 |
2.3.1 实验试剂配制 | 第20-22页 |
2.3.2 行为学检测 | 第22-23页 |
2.3.2.1 Morris水迷宫检测 | 第22页 |
2.3.2.2 Y-迷宫检测 | 第22-23页 |
2.3.3 小胶质细胞培养 | 第23-24页 |
2.3.4 溶酶体酸化以及pH值测定 | 第24页 |
2.3.5 溶酶体内蛋白酶活性的测定 | 第24页 |
2.3.6 蛋白质提取 | 第24-25页 |
2.3.7 蛋白质定量 | 第25页 |
2.3.8 SDS凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第25-26页 |
2.3.9 转膜和抗体孵育 | 第26页 |
2.3.10 化学发光、显影、定影 | 第26-27页 |
2.3.11 分析显影图象 | 第27页 |
2.3.12 荧光染色与成像 | 第27页 |
2.3.13 统计学分析 | 第27-28页 |
第3章 实验结果 | 第28-36页 |
3.1 Aβ_(25-35)可诱导HT22细胞产生自噬 | 第28-29页 |
3.2 细胞活力随Aβ_(25-35)处理时间增长而降低 | 第29-30页 |
3.3 BafilomycinA1(BafA1)能提升HT22细胞活力 | 第30-32页 |
3.4 LC3及V-ATPase表达的Western-blot实验结果 | 第32-33页 |
3.5 小胶质细胞浆内以及溶酶体内pH值差异 | 第33-35页 |
3.6 小胶质细胞溶酶体膜上V-ATPase的变化 | 第35-36页 |
第4章 讨论 | 第36-39页 |
4.1 Aβ_(25-35)刺激细胞产生自噬体结构与浓度正相关 | 第36页 |
4.2 小胶质细胞胞浆及溶酶体pH值的变化 | 第36-37页 |
4.3 V-ATPase表达与Aβ诱导的溶酶体自噬现象的关系 | 第37-39页 |
第5章 结论 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-46页 |
附录 | 第46-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
攻读硕士学位期间的研究成果 | 第62页 |