摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
第一章 绪论 | 第11-13页 |
1.1 课题来源、研究的目的和意义 | 第11页 |
1.2 国内外研究概况 | 第11-12页 |
1.3 论文的主要研究内容 | 第12-13页 |
第二章 材料与方法 | 第13-26页 |
2.1 研究资料及仪器设备 | 第13-14页 |
2.1.1 研究对象 | 第13页 |
2.1.2 主要仪器与试剂 | 第13-14页 |
2.2 实验流程与方法 | 第14-26页 |
2.2.1 骨髓磁珠分选CD138+细胞 | 第14-15页 |
2.2.2 血清标本收集和处理 | 第15页 |
2.2.3 血清和细胞总RNA提取 | 第15-17页 |
2.2.4 逆转录反应 | 第17页 |
2.2.5 实时荧光定量PCR | 第17-18页 |
2.2.6 临床血清标本中H19、miR-29b-3p和MCL-1的检测 | 第18页 |
2.2.7 琼脂糖凝胶电泳 | 第18-19页 |
2.2.8 悬浮细胞培养 | 第19-20页 |
2.2.9 细胞转染 | 第20-21页 |
2.2.10 细胞功能试验 | 第21-22页 |
2.2.11 总蛋白提取 | 第22-23页 |
2.2.12 蛋白免疫印迹 | 第23-24页 |
2.2.13 核浆分离 | 第24页 |
2.2.14 FISH | 第24-25页 |
2.2.15 双荧光素酶报告基因 | 第25页 |
2.2.16 统计学分析 | 第25-26页 |
第三章 结果 | 第26-48页 |
3.1 H19的血清表达及方法学评价 | 第26-31页 |
3.1.1 H19在血清和细胞中的表达水平 | 第26页 |
3.1.2 H19检测的方法学评价 | 第26-27页 |
3.1.3 H19的表达与临床相关指标的相关性 | 第27-29页 |
3.1.4 血清H19临床分期的应用 | 第29页 |
3.1.5 血清中H19对MM的动态监测 | 第29-30页 |
3.1.6 对血清H19作为MM相关诊断指标的评价 | 第30-31页 |
3.2 H19对MM细胞功能的影响 | 第31-35页 |
3.2.1 H19在MM细胞中的转染效率 | 第31-32页 |
3.2.2 H19促进MM细胞的迁移 | 第32-33页 |
3.2.3 H19促进MM细胞的增殖 | 第33页 |
3.2.4 H19延长S期加快细胞周期进程 | 第33-34页 |
3.2.5 H19抑制MM细胞凋亡 | 第34-35页 |
3.2.6 细胞凋亡相关蛋白检测结果 | 第35页 |
3.3 H19靶miRNA的预测及验证 | 第35-38页 |
3.3.1 H19在MM细胞中的定位 | 第35页 |
3.3.2 miR-29b-3p作为H19的靶miRNA | 第35-36页 |
3.3.3 miR-29b-3p在MM细胞和血清中的表达水平 | 第36-37页 |
3.3.4 H19与miR-29b-3p在血清中的表达呈负相关 | 第37页 |
3.3.5 双荧光素酶报告基因证实H19与miR-29b-3p的结合 | 第37-38页 |
3.4 miR-29b-3p对MM细胞的功能影响 | 第38-40页 |
3.4.1 miR-29b-3p在MM细胞中的转染效率 | 第38页 |
3.4.2 miR-29b-3p抑制MM细胞的恶性表型 | 第38-39页 |
3.4.3 细胞凋亡相关蛋白检测结果 | 第39-40页 |
3.5 H19竞争结合miR-29b-3p对MM细胞迁移、增殖和凋亡的影响 | 第40-42页 |
3.5.1 H19竞争结合miR-29b-3p而促进MM细胞迁移 | 第40页 |
3.5.2 H19竞争结合miR-29b-3p而促进MM细胞增殖 | 第40-41页 |
3.5.3 H19竞争结合miR-29b-3p而抑制MM细胞凋亡 | 第41页 |
3.5.4 细胞凋亡相关蛋白检测结果 | 第41-42页 |
3.6 MCL-1的异常增多诱导骨髓瘤细胞对硼替佐米的耐药 | 第42-48页 |
3.6.1 miR-29b-3p靶蛋白的MCL-1 | 第42-43页 |
3.6.2 BTZ耐药的MM患者血清中H19/miR-29b-3p/MCL-1的表达 | 第43页 |
3.6.3 MCL-1的mRNA和蛋白水平的验证 | 第43-44页 |
3.6.4 H19/miR-29b-3p调控MCL-1的表达 | 第44页 |
3.6.5 H19/miR-29b-3p/MCL-1调控网参与调控MM细胞对BTZ的耐药 | 第44-45页 |
3.6.6 不同浓度BTZ对细胞增殖的影响 | 第45页 |
3.6.7 H19/miR-29b-3p/MCL-1调控网抑制凋亡而降低细胞对BTZ敏感性 | 第45-46页 |
3.6.8 凋亡相关蛋白的检测结果 | 第46-48页 |
第四章 讨论 | 第48-50页 |
第五章 结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-54页 |
英文缩写词表 | 第54-56页 |
综述 | 第56-68页 |
综述参考文献 | 第62-68页 |
在攻读硕士学位期间公开发表的论文与参加的项目 | 第68-69页 |
A:在国内外刊物上发表的论文 | 第68页 |
B:所参加的项目 | 第68-69页 |
致谢 | 第69页 |