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多发性骨髓瘤中lncRNA H19结合miR-29b-3p靶向作用MCL-1诱导硼替佐米耐药

摘要第7-9页
Abstract第9-10页
第一章 绪论第11-13页
    1.1 课题来源、研究的目的和意义第11页
    1.2 国内外研究概况第11-12页
    1.3 论文的主要研究内容第12-13页
第二章 材料与方法第13-26页
    2.1 研究资料及仪器设备第13-14页
        2.1.1 研究对象第13页
        2.1.2 主要仪器与试剂第13-14页
    2.2 实验流程与方法第14-26页
        2.2.1 骨髓磁珠分选CD138+细胞第14-15页
        2.2.2 血清标本收集和处理第15页
        2.2.3 血清和细胞总RNA提取第15-17页
        2.2.4 逆转录反应第17页
        2.2.5 实时荧光定量PCR第17-18页
        2.2.6 临床血清标本中H19、miR-29b-3p和MCL-1的检测第18页
        2.2.7 琼脂糖凝胶电泳第18-19页
        2.2.8 悬浮细胞培养第19-20页
        2.2.9 细胞转染第20-21页
        2.2.10 细胞功能试验第21-22页
        2.2.11 总蛋白提取第22-23页
        2.2.12 蛋白免疫印迹第23-24页
        2.2.13 核浆分离第24页
        2.2.14 FISH第24-25页
        2.2.15 双荧光素酶报告基因第25页
        2.2.16 统计学分析第25-26页
第三章 结果第26-48页
    3.1 H19的血清表达及方法学评价第26-31页
        3.1.1 H19在血清和细胞中的表达水平第26页
        3.1.2 H19检测的方法学评价第26-27页
        3.1.3 H19的表达与临床相关指标的相关性第27-29页
        3.1.4 血清H19临床分期的应用第29页
        3.1.5 血清中H19对MM的动态监测第29-30页
        3.1.6 对血清H19作为MM相关诊断指标的评价第30-31页
    3.2 H19对MM细胞功能的影响第31-35页
        3.2.1 H19在MM细胞中的转染效率第31-32页
        3.2.2 H19促进MM细胞的迁移第32-33页
        3.2.3 H19促进MM细胞的增殖第33页
        3.2.4 H19延长S期加快细胞周期进程第33-34页
        3.2.5 H19抑制MM细胞凋亡第34-35页
        3.2.6 细胞凋亡相关蛋白检测结果第35页
    3.3 H19靶miRNA的预测及验证第35-38页
        3.3.1 H19在MM细胞中的定位第35页
        3.3.2 miR-29b-3p作为H19的靶miRNA第35-36页
        3.3.3 miR-29b-3p在MM细胞和血清中的表达水平第36-37页
        3.3.4 H19与miR-29b-3p在血清中的表达呈负相关第37页
        3.3.5 双荧光素酶报告基因证实H19与miR-29b-3p的结合第37-38页
    3.4 miR-29b-3p对MM细胞的功能影响第38-40页
        3.4.1 miR-29b-3p在MM细胞中的转染效率第38页
        3.4.2 miR-29b-3p抑制MM细胞的恶性表型第38-39页
        3.4.3 细胞凋亡相关蛋白检测结果第39-40页
    3.5 H19竞争结合miR-29b-3p对MM细胞迁移、增殖和凋亡的影响第40-42页
        3.5.1 H19竞争结合miR-29b-3p而促进MM细胞迁移第40页
        3.5.2 H19竞争结合miR-29b-3p而促进MM细胞增殖第40-41页
        3.5.3 H19竞争结合miR-29b-3p而抑制MM细胞凋亡第41页
        3.5.4 细胞凋亡相关蛋白检测结果第41-42页
    3.6 MCL-1的异常增多诱导骨髓瘤细胞对硼替佐米的耐药第42-48页
        3.6.1 miR-29b-3p靶蛋白的MCL-1第42-43页
        3.6.2 BTZ耐药的MM患者血清中H19/miR-29b-3p/MCL-1的表达第43页
        3.6.3 MCL-1的mRNA和蛋白水平的验证第43-44页
        3.6.4 H19/miR-29b-3p调控MCL-1的表达第44页
        3.6.5 H19/miR-29b-3p/MCL-1调控网参与调控MM细胞对BTZ的耐药第44-45页
        3.6.6 不同浓度BTZ对细胞增殖的影响第45页
        3.6.7 H19/miR-29b-3p/MCL-1调控网抑制凋亡而降低细胞对BTZ敏感性第45-46页
        3.6.8 凋亡相关蛋白的检测结果第46-48页
第四章 讨论第48-50页
第五章 结论第50-51页
参考文献第51-54页
英文缩写词表第54-56页
综述第56-68页
    综述参考文献第62-68页
在攻读硕士学位期间公开发表的论文与参加的项目第68-69页
    A:在国内外刊物上发表的论文第68页
    B:所参加的项目第68-69页
致谢第69页

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