| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第1章 绪论 | 第17-25页 |
| 1.1 研究的目的和意义 | 第17-18页 |
| 1.2 研究现状 | 第18-23页 |
| 1.2.1 花青素研究进展 | 第18-21页 |
| 1.2.2 查尔酮异构酶基因 | 第21-22页 |
| 1.2.3 花青素合酶基因 | 第22页 |
| 1.2.4 二氢黄酮醇4-还原酶基因 | 第22-23页 |
| 1.3 研究内容 | 第23-25页 |
| 1.3.1 桑树CHI基因的克隆及序列分析 | 第23页 |
| 1.3.2 桑树ANS基因的克隆及序列分析 | 第23页 |
| 1.3.3 桑树DFR基因的克隆及序列分析 | 第23-24页 |
| 1.3.4 桑树CHI和ANS基因的原核表达 | 第24页 |
| 1.3.5 桑树花青素生物合成相关基因在不同种质成熟桑椹中的表达差异分析 | 第24页 |
| 1.3.6 桑树花青素生物合成相关基因在不同发育阶段桑椹中的表达差异分析 | 第24-25页 |
| 第2章 桑树CHI基因(MmCHI)克隆及序列分析 | 第25-37页 |
| 2.1 材料与主要试剂 | 第25-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-32页 |
| 2.2.1 常规试验 | 第26-27页 |
| 2.2.2 总RNA的提取 | 第27-28页 |
| 2.2.3 cDNA第1链的合成 | 第28页 |
| 2.2.4 SDS-PAGE | 第28-30页 |
| 2.2.5 桑树CHI基因克隆引物的设计与PCR程序设定 | 第30-31页 |
| 2.2.6 桑树CHI基因的验证 | 第31页 |
| 2.2.7 桑树CHI基因的全长及序列分析 | 第31页 |
| 2.2.8 桑树CHI基因的原核表达 | 第31-32页 |
| 2.3 结果与分析 | 第32-35页 |
| 2.3.1 桑树CHI基因保守区片段的克隆 | 第32页 |
| 2.3.2 桑树CHI基因完整CDS序列的获得 | 第32页 |
| 2.3.3 桑树CHI基因编码的蛋白序列分析 | 第32-33页 |
| 2.3.4 桑树CHI基因的生物信息学分析 | 第33-34页 |
| 2.3.5 桑树CHI在E.coli中的诱导表达 | 第34-35页 |
| 2.4 结论与讨论 | 第35-37页 |
| 第3章 桑树ANS基因(MmANS)克隆及序列分析 | 第37-45页 |
| 3.1 材料与主要试剂(同2.1) | 第37页 |
| 3.2 实验方法 | 第37-38页 |
| 3.2.1 常规实验(同2.2.1) | 第37页 |
| 3.2.2 桑树ANS基因扩增相关引物的设计 | 第37页 |
| 3.2.3 桑树总RNA提取(同2.2.3) | 第37页 |
| 3.2.4 cDNA第1链的合成和桑树ANS基因的克隆 | 第37页 |
| 3.2.5 桑树ANS基因的全长cDNA序列分析 | 第37-38页 |
| 3.2.6 桑树ANS基因的验证 | 第38页 |
| 3.2.7 桑树ANS基因的原核表达 | 第38页 |
| 3.3 结果与分析 | 第38-42页 |
| 3.3.1 桑树ANS基因保守区片段的克隆 | 第38-39页 |
| 3.3.2 桑树ANS基因完整CDS序列的获得 | 第39页 |
| 3.3.3 桑树ANS基因编码的蛋白序列分析 | 第39页 |
| 3.3.4 桑树ANS基因的生物信息学分析 | 第39-41页 |
| 3.3.5 桑树ANS在E.coli中的诱导表达 | 第41-42页 |
| 3.4 结论与讨论 | 第42-45页 |
| 第4章 桑树DFR基因(MmDFR)克隆及序列分析 | 第45-49页 |
| 4.1 材料与主要试剂(同2.1) | 第45页 |
| 4.2 实验方法 | 第45-46页 |
| 4.2.1 常规实验(同2.2.1) | 第45页 |
| 4.2.2 桑树DFR基因扩增相关引物的设计 | 第45页 |
| 4.2.3 桑树总RNA提取(同2.2.3) | 第45页 |
| 4.2.4 cDNA第1链的合成和桑树DFR基因的克隆 | 第45页 |
| 4.2.5 桑树DFR基因的全长cDNA序列分析 | 第45-46页 |
| 4.3 结果与分析 | 第46-48页 |
| 4.3.1 桑树DFR基因保守区片段的克隆 | 第46页 |
| 4.3.2 桑树DFR基因编码的蛋白序列分析 | 第46页 |
| 4.3.3 桑树DFR基因的生物信息学分析 | 第46-48页 |
| 4.4 结论与讨论 | 第48-49页 |
| 第5章 桑树花青素生物合成相关基因在不同种质成熟桑椹中的表达差异分析 | 第49-55页 |
| 5.1 材料与主要试剂 | 第49页 |
| 5.2 方法 | 第49-51页 |
| 5.2.1 桑树CHI、ANS、DFR、C4H、CHS、FLS、F3H基因定量引物的设计 | 第49-50页 |
| 5.2.2 桑树CHI、ANS、DFR、C4H、CHS、FLS、F3H基因表达的荧光定量PCR | 第50页 |
| 5.2.3 桑椹总花青素含量的测定 | 第50-51页 |
| 5.3 结果与分析 | 第51-53页 |
| 5.3.1 桑树CHI、ANS、DFR、C4H、CHS、FLS、F3H基因的表达分析 | 第51-52页 |
| 5.3.2 花青素积累和7 个基因的表达与果色之间的联系 | 第52-53页 |
| 5.4 讨论 | 第53-55页 |
| 第6章 桑树花青素生物合成相关基因在不同发育阶段桑椹中的表达差异分析 | 第55-61页 |
| 6.1 材料与主要试剂 | 第55页 |
| 6.2 方法 | 第55-56页 |
| 6.2.1 桑树CHI、ANS、DFR、C4H、CHS、FLS、F3H基因定量引物的设计 | 第55页 |
| 6.2.2 桑树CHI、ANS、DFR、C4H、CHS、FLS、F3H基因表达的荧光定量PCR | 第55页 |
| 6.2.3 桑椹总花青素含量的测定 | 第55-56页 |
| 6.2.4 数据分析 | 第56页 |
| 6.3 结果与分析 | 第56-59页 |
| 6.3.1 桑树CHI、ANS、DFR、C4H、CHS、FLS、F3H基因的表达分析 | 第56-58页 |
| 6.3.2 花青素和7个基因的表达与桑椹颜色之间的联系 | 第58页 |
| 6.3.3 总花青素含量与7个基因表达的相关性 | 第58-59页 |
| 6.4 讨论 | 第59-61页 |
| 结论 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-70页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第70-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
