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江西省星子县鄱阳湖血吸虫病流行区日本血吸虫生物控制资源调查及硫氧还蛋白(TRP14)在不同处理钉螺体内的分布情况

摘要第11-13页
Abstract第13-14页
第一章 鄱阳湖血吸虫疫区湖北钉螺感染情况的调查以及鲶鱼感染外睾吸虫情况的调查第15-29页
    1.1 前言第15-24页
        1.1.1 血吸虫病与日本血吸虫第15-16页
        1.1.2 日本血吸虫的生活史第16-18页
        1.1.3 日本血吸虫病的流行的趋势和主要的防治策略第18-20页
        1.1.4 外睾吸虫及其生活史第20页
        1.1.5 湖北钉螺分类及分布第20-22页
        1.1.6 本研究的目的及意义第22-24页
    1.2 材料来源和方法第24-25页
        1.2.1 材料来源第24页
        1.2.2 实验方法第24-25页
    1.3 实验结果和结论第25-29页
        1.3.1 湖北钉螺的寄生虫感染率第25页
        1.3.2 鲶鱼的外睾吸虫感染率第25-28页
        1.3.3 实验结论第28-29页
第二章 硫氧还蛋白(Thioredoxin Related Protein of 14KDa,TRP14)在不同处理的湖北钉螺体内的观察第29-84页
    2.1 前言第29-38页
        2.1.1 自由基及其产生第29-31页
        2.1.2 硫氧还蛋白第31-34页
        2.1.3 硫氧还蛋白的生物学作用第34-35页
        2.1.4 TRP14蛋白的研究第35-36页
        2.1.5 日本血吸虫的生物控制第36-37页
        2.1.6 本研究的目的及意义第37-38页
    2.2 材料与方法第38-57页
        2.2.1 实验仪器第38页
        2.2.2 试剂第38-41页
        2.2.3 实验方法第41-57页
    2.3 结果与结论第57-81页
        2.3.1 OhTRP14蛋白的序列比对及分析第57-60页
            2.3.1.1 TRP14蛋白三维分子结构模型的比较第57-58页
            2.3.1.2 不同物种之间TRP14蛋白的一级结构的比对第58-59页
            2.3.1.3 TRP14蛋白的进化树分析第59-60页
        2.3.2 TRP14蛋白阴性钉螺体内的分布第60-63页
            2.3.2.1 阴性钉螺TRP14蛋白的免疫组化第60-61页
            2.3.2.2 钉螺各个组织的荧光定量PCR第61页
            2.3.2.3 TRP14蛋白在钉螺血淋巴细胞中的定位第61-62页
            2.3.2.4 多克隆抗体的特异性验证第62-63页
        2.3.3 重组OhTRP14氧化还原酶活性测定及分析第63-66页
            2.3.3.1 OhTRP14点突变质粒的构建第63-64页
            2.3.3.2 OhTRP14点突变质粒的测序第64-65页
            2.3.3.3 AOhTRP14表达和纯化第65页
            2.3.3.4 TRP14蛋白氧化还原酶活性的测定第65-66页
        2.3.4 日本血吸虫阳性钉螺不同时期OhTRP14表达情况第66-69页
            2.3.4.1 血吸虫毛蚴侵染湖北钉螺cDNA模板的制备第66-67页
            2.3.4.2 血吸虫毛蚴侵染钉螺不同时间螺体TRP14 mRNA表达情况第67页
            2.3.4.3 血吸虫毛蚴侵染钉螺不同时间的全蛋白免疫印迹第67-68页
            2.3.4.4 不同时期血吸虫阳性钉螺的免疫组化第68页
            2.3.4.5 血吸虫感染后不同时间钉螺血淋巴细胞氧化还原状态的变化第68-69页
        2.3.5 不同吸虫处理的钉螺TRP14蛋白的分布第69-72页
            2.3.5.1 不同吸虫感染后钉螺TRP14基因表达情况第69-70页
            2.3.5.2 不同吸虫感染后钉螺TRP14的蛋白含量第70页
            2.3.5.3 不同吸虫感染后钉螺组织切片的免疫组化第70-72页
        2.3.6 双重感染外睾吸虫和血吸虫后钉螺血淋巴细胞氧化还原状态第72-74页
            2.3.6.1 外睾吸虫阳性钉螺感染血吸虫后TRP14基因的表达量第73页
            2.3.6.2 外睾吸虫阳性钉螺感染血吸虫后TRP14蛋白的表达量第73-74页
            2.3.6.3 外睾吸虫阳性钉螺感染血吸虫后血淋巴细胞的氧化还原状态第74页
        2.3.7 湖北钉螺TRP14基因干扰(RNA interference,RNAi)实验第74-79页
            2.3.7.1 OhTRP14干扰载体的构建第74-75页
            2.3.7.2 OhTRP14-LA440重组质粒测序结果第75-77页
            2.3.7.3 RT-PCR检测OhTRP14 RNAi第77页
            2.3.7.4 RNAi处理后不同时间TRP14蛋白免疫印迹第77-78页
            2.3.7.5 RNAi处理后不同时间TRP14蛋白在钉螺体内的表达量第78页
            2.3.7.6 TRP14基因被干扰后钉螺血淋巴细胞的氧化还原状态第78-79页
        2.3.8 OhTRP14 RNAi处理后血吸虫幼虫在钉螺体内的发育情况第79-81页
    2.4 讨论第81-83页
    2.5 总结与展望第83-84页
参考文献第84-90页
致谢第90页

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