| 英文缩略词 | 第4-5页 |
| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 1 前言 | 第9-13页 |
| 2 实验材料和方法 | 第13-33页 |
| 2.1 实验材料 | 第13-18页 |
| 2.1.1 材料 | 第13-15页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第15-16页 |
| 2.1.3 常用溶液配制 | 第16-17页 |
| 2.1.4 主要生物软件和分析工具 | 第17-18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-33页 |
| 2.2.1 细胞的冻存与复苏 | 第18页 |
| 2.2.2 细胞传代培养 | 第18-19页 |
| 2.2.3 RealTime-PCR | 第19-21页 |
| 2.2.4 细胞核质分离 | 第21-22页 |
| 2.2.5 Westernblot | 第22-25页 |
| 2.2.6 ELISA | 第25-26页 |
| 2.2.7 载体构建 | 第26-31页 |
| 2.2.8 建立hMSCsH2O2衰老模型 | 第31-33页 |
| 3 实验结果 | 第33-58页 |
| 3.1 Wnt家族因子在hMSCs复制衰老过程中的表达情况分析 | 第33-46页 |
| 3.1.1 不同来源的hMSCs中检测不同Wnt家族基因的表达情况 | 第33-36页 |
| 3.1.2 hUC1-MSCs标准细胞株中不同代次的Wnt家族基因的表达情况分析 | 第36-38页 |
| 3.1.3 Real Time-PCR法检测不同来源不同代次的hMSCs中Wnt2基因的表达 | 第38-42页 |
| 3.1.4 不同来源不同代次的hMSCs中Wnt2蛋白的表达 | 第42-46页 |
| 3.2 Wnt2在Wnt/β-catenin经典信号通路中的作用 | 第46-52页 |
| 3.2.1 Wnt2作用激活Wnt经典信号下游转录因子靶基因TCF1的表达 | 第46-48页 |
| 3.2.2 Wnt2作用激活Wnt经典信号下游靶基因WISP1的表达 | 第48-50页 |
| 3.2.3 hMSCs中Wnt2诱导的Wnt经典信号通路β-catenin的入核 | 第50-52页 |
| 3.3 Wnt2在hMSCsH2O2衰老模型中的分子机制研究 | 第52-58页 |
| 3.3.1 hMSCsH2O2衰老模型的建立 | 第52-53页 |
| 3.3.2 hMSCsH2O2衰老模型中β-catenin的变化 | 第53-54页 |
| 3.3.3 hMSCsH2O2衰老模型中Wnt2和GSK-3β随衰老的变化 | 第54-56页 |
| 3.3.4 GSK-3β抑制剂CHIR99021促进hMSCs中Wnt2的表达 | 第56-58页 |
| 4 讨论 | 第58-60页 |
| 5 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-66页 |
| 综述 | 第66-80页 |
| 参考文献 | 第75-80页 |
| 致谢 | 第80-82页 |
