摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第1章 引言 | 第10-18页 |
1.1 神经环路发育 | 第10-11页 |
1.1.1 神经环路 | 第10页 |
1.1.2 神经突起 | 第10-11页 |
1.1.3 生长锥 | 第11页 |
1.1.4 细胞骨架 | 第11页 |
1.2 轴突导向 | 第11-13页 |
1.2.1 轴突导向简介 | 第11-12页 |
1.2.2 轴突导向因子 | 第12-13页 |
1.3 CRMPs蛋白家族 | 第13-15页 |
1.3.1 CRMPs的发现 | 第13页 |
1.3.2 CRMPs结构 | 第13-14页 |
1.3.3 CRMPs的表达和分布 | 第14页 |
1.3.4 CRMPs与神经疾病 | 第14-15页 |
1.4 CRMP4 | 第15-16页 |
1.4.1 CRMP4简介 | 第15页 |
1.4.2 CRMP4功能研究 | 第15-16页 |
1.5 斑马鱼视神经发育 | 第16-17页 |
1.6 斑马鱼在神经系统发育研究中的优点 | 第17-18页 |
第2章 斑马鱼CRMPs cDNA制备 | 第18-32页 |
2.1 概述 | 第18-19页 |
2.2 主要试剂和仪器设备 | 第19页 |
2.3 实验方法与步骤 | 第19-25页 |
2.3.1 斑马鱼总RNA的提取 | 第19-20页 |
2.3.2 斑马鱼总cDNA制备 | 第20-21页 |
2.3.3 斑马鱼CRMPs目的片段制备 | 第21-22页 |
2.3.4 TA克隆与转化 | 第22-23页 |
2.3.5 碱裂解法大量制备CRMPs cDNA克隆 | 第23-25页 |
2.4 实验结果 | 第25-31页 |
2.4.1 crmp1及其选择性拼接体DNA制备 | 第25-27页 |
2.4.2 crmp4及其选择性拼接体DNA制备 | 第27-29页 |
2.4.3 crmp5a、crmp5b cDNA制备 | 第29-31页 |
2.5 本章小结 | 第31页 |
2.6 讨论 | 第31-32页 |
第3章 斑马鱼CRMPs的早期时空表达 | 第32-50页 |
3.1 概述 | 第32页 |
3.2 主要试剂和仪器设备 | 第32页 |
3.3 实验方法与步骤 | 第32-37页 |
3.3.1 原位杂交探针制备 | 第32-34页 |
3.3.2 斑马鱼原位杂交 | 第34-37页 |
3.4 实验结果 | 第37-49页 |
3.4.1 CRMPs原位杂交探针制备 | 第37-41页 |
3.4.2. CRMPs在斑马鱼体内早期表达图式 | 第41-48页 |
3.4.3 CRMP4不同拼接体在斑马鱼体内早期表达图式 | 第48-49页 |
3.5 本章小结 | 第49页 |
3.6 讨论 | 第49-50页 |
第4章 CRMP4在斑马鱼轴突生长导向中的作用 | 第50-60页 |
4.1 概述 | 第50页 |
4.2 主要试剂和仪器设备 | 第50页 |
4.3 实验原理 | 第50-53页 |
4.3.1 MO作用原理 | 第50-51页 |
4.3.2 斑马鱼RGC轴突投射模型在研究轴突导向中的应用 | 第51-52页 |
4.3.3 Morpholino半剂量共敲减原理 | 第52页 |
4.3.4 CRMPs与Semaphorin信号 | 第52-53页 |
4.4 实验方法与步骤 | 第53-56页 |
4.4.1 显微注射 | 第53-54页 |
4.4.2 斑马鱼视神经染色 | 第54-55页 |
4.4.3 CRMP4 MO定量 | 第55-56页 |
4.5 实验结果 | 第56-58页 |
4.5.1 CRMP4敲减导致视神经同侧投射 | 第56-57页 |
4.5.2 CRMP4敲减减弱视神经轴突生长投射的能力 | 第57-58页 |
4.5.3 CRMP4与Semaphorin信号通路的关系 | 第58页 |
4.6 本章小结 | 第58页 |
4.7 讨论 | 第58-60页 |
第5章 结论与展望 | 第60-62页 |
5.1 结论 | 第60-61页 |
5.2 展望 | 第61-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-66页 |