| 致谢 | 第4-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| 1 文献综述 | 第8-14页 |
| 1.1 橄榄 | 第8页 |
| 1.1.1 橄榄概述 | 第8页 |
| 1.1.2 橄榄中的酚类化合物 | 第8页 |
| 1.2 天然药物 | 第8页 |
| 1.3 生物转化 | 第8-10页 |
| 1.3.1 生物转化的概念 | 第8-9页 |
| 1.3.2 生物转化的反应类型 | 第9-10页 |
| 1.3.2.1 氧化反应 | 第9页 |
| 1.3.2.2 还原反应 | 第9页 |
| 1.3.2.3 糖基化反应 | 第9页 |
| 1.3.2.4 水解反应 | 第9-10页 |
| 1.3.2.5 环氧化反应 | 第10页 |
| 1.3.2.6 其他反应 | 第10页 |
| 1.3.3 生物转化的实际应用 | 第10页 |
| 1.3.3.1 开发新活性药物 | 第10页 |
| 1.3.3.2 改变细胞毒性 | 第10页 |
| 1.3.3.3 提高水溶性、生物利用率 | 第10页 |
| 1.3.3.4 增强抗耐药性 | 第10页 |
| 1.4 羟基酪醇和酪醇 | 第10-12页 |
| 1.4.1 羟基酪醇和酪醇的经济学价值 | 第10页 |
| 1.4.2 羟基酪醇的生物学意义 | 第10-11页 |
| 1.4.3 羟基酪醇的药理作用 | 第11-12页 |
| 1.4.3.1 羟基酪醇抗肿瘤作用 | 第11页 |
| 1.4.3.2 抗心血管疾病 | 第11页 |
| 1.4.3.3 呼吸消化系统疾病 | 第11页 |
| 1.4.3.4 抗病毒作用 | 第11页 |
| 1.4.3.5 其它药理作用 | 第11-12页 |
| 1.4.4 酪醇 | 第12页 |
| 1.5 合成羟基酪醇的主要方法 | 第12-14页 |
| 1.5.1 分离提取法 | 第12页 |
| 1.5.2 化学合成法 | 第12页 |
| 1.5.3 光催化法 | 第12页 |
| 1.5.4 生物转化法 | 第12-14页 |
| 2 引言 | 第14-15页 |
| 3 材料与方法 | 第15-22页 |
| 3.1 材料 | 第15页 |
| 3.1.1 菌株、载体及主要试剂 | 第15页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第15页 |
| 3.2 方法 | 第15-22页 |
| 3.2.1 质粒构建 | 第15-17页 |
| 3.2.1.1 大肠杆菌BL21(DE3)基因组提取 | 第15页 |
| 3.2.1.2 HHA基因PCR克隆 | 第15-16页 |
| 3.2.1.3 克隆载体的构建 | 第16页 |
| 3.2.1.4 大肠杆菌(DH5α)感受态细胞的制备 | 第16页 |
| 3.2.1.5 大肠杆菌(DH5α)转化 | 第16页 |
| 3.2.1.6 阳性转化子的验证及测序 | 第16-17页 |
| 3.2.1.7 表达载体的构建 | 第17页 |
| 3.2.2 重组蛋白HHA在大肠杆菌中的表达 | 第17页 |
| 3.2.3 SDS－PAGE电泳 | 第17-19页 |
| 3.2.4 重组大肠杆菌催化合成羟基酪醇 | 第19-20页 |
| 3.2.5 产物检测 | 第20-21页 |
| 3.2.5.1 薄层法对羟基酪醇进行检测 | 第20-21页 |
| 3.2.5.2 气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)定性分析 | 第21页 |
| 3.2.6 生物转化条件优化 | 第21-22页 |
| 4 结果与分析 | 第22-28页 |
| 4.1 HHA基因PCR扩增结果 | 第22页 |
| 4.2 重组表达载体的酶切鉴定、PCR鉴定 | 第22-23页 |
| 4.3 SDS-PAGE法对重组菌表达蛋白的分析 | 第23页 |
| 4.4 生物转化产物鉴定 | 第23-25页 |
| 4.4.1 TLC检测结果 | 第23-24页 |
| 4.4.2 GC气相色谱检测结果 | 第24-25页 |
| 4.4.3 MS质谱检测结 | 第25页 |
| 4.5 转化条件的优化 | 第25-28页 |
| 4.5.1 PH对转化的影响 | 第25-26页 |
| 4.5.2 反应温度对转化的影响 | 第26页 |
| 4.5.3 底物量对转化的影响 | 第26-27页 |
| 4.5.4 底物加入时间对转化的影响 | 第27页 |
| 4.5.5 助溶剂对转化的影响 | 第27-28页 |
| 4.6 转化过程分析 | 第28页 |
| 5 结论与讨论 | 第28-30页 |
| 参考文献 | 第30-32页 |
| ABSTRACT | 第32页 |
