| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第一章 绪论 | 第14-37页 |
| 1.1 腈转化酶的概述 | 第14-19页 |
| 1.1.1 腈转化酶的催化途径及酶类 | 第14-15页 |
| 1.1.2 腈转化酶在精细化学品生产中的应用 | 第15-19页 |
| 1.2 腈水解酶的概述 | 第19-21页 |
| 1.2.1 腈水解酶的来源 | 第19页 |
| 1.2.2 腈水解酶的催化机理 | 第19-21页 |
| 1.3 Met的概述 | 第21-22页 |
| 1.3.1 Met的理化性质 | 第21页 |
| 1.3.2 Met的功能及应用 | 第21-22页 |
| 1.4 Met的合成方法及研究现状 | 第22-29页 |
| 1.4.1 化学法合成研究现状 | 第22-25页 |
| 1.4.1.1 丙烯醛法 | 第22-23页 |
| 1.4.1.2 丙二酸酯法 | 第23-24页 |
| 1.4.1.3 氨基内酯法 | 第24页 |
| 1.4.1.4 固-液相转移催化法 | 第24-25页 |
| 1.4.2 生物法合成研究现状 | 第25-29页 |
| 1.4.2.1 酶拆分法 | 第25-26页 |
| 1.4.2.2 发酵法 | 第26-27页 |
| 1.4.2.3 化学-酶法 | 第27-29页 |
| 1.5 论文的选题意义及研究内容 | 第29-30页 |
| 1.5.1 选题意义 | 第29页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第29-30页 |
| 参考文献 | 第30-37页 |
| 第二章 腈水解酶菌株的筛选及鉴定 | 第37-49页 |
| 2.1 引言 | 第37页 |
| 2.2 材料与方法 | 第37-40页 |
| 2.2.0 菌种来源 | 第38页 |
| 2.2.1 化学试剂与主要仪器 | 第38页 |
| 2.2.2 培养基 | 第38页 |
| 2.2.3 菌株的初筛 | 第38页 |
| 2.2.4 菌株的复筛 | 第38-39页 |
| 2.2.5 分析检测条件 | 第39页 |
| 2.2.6 酶活定义 | 第39页 |
| 2.2.7 形态特征观察 | 第39页 |
| 2.2.8 生理生化特征的测定 | 第39页 |
| 2.2.9 基因组提取 | 第39-40页 |
| 2.2.10 16S rDNA序列扩增 | 第40页 |
| 2.2.11 系统发育学分析 | 第40页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第40-47页 |
| 2.3.1 产腈水解酶菌株的筛选 | 第40-41页 |
| 2.3.2 形态特征 | 第41-42页 |
| 2.3.3 生理生化鉴定 | 第42-44页 |
| 2.3.4 16S rDNA序列测序结果 | 第44-46页 |
| 2.3.5 系统发育分析 | 第46-47页 |
| 本章小结 | 第47页 |
| 参考文献 | 第47-49页 |
| 第三章 腈水解酶产生菌P. fluorescens ZJB-12001培养条件的研究 | 第49-67页 |
| 3.1 引言 | 第49-50页 |
| 3.2 材料和方法 | 第50-51页 |
| 3.2.1 菌种 | 第50页 |
| 3.2.2 仪器与试剂 | 第50页 |
| 3.2.3 培养基 | 第50页 |
| 3.2.4 菌体培养 | 第50页 |
| 3.2.5 菌体制备 | 第50-51页 |
| 3.2.6 生物量测定 | 第51页 |
| 3.2.7 静息细胞转化 | 第51页 |
| 3.2.8 酶活的定义 | 第51页 |
| 3.2.9 分析检测方法 | 第51页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第51-65页 |
| 3.3.1 发酵培养基组成的优化 | 第51-61页 |
| 3.3.1.1 碳源的筛选 | 第52-53页 |
| 3.3.1.2 复合碳源不同比例对菌体产酶和生长的影响 | 第53页 |
| 3.3.1.3 复合碳源浓度对菌体产酶和生长的影响 | 第53-54页 |
| 3.3.1.4 氮源的筛选 | 第54-55页 |
| 3.3.1.5 复合氮源不同比例对产酶和菌体生长的影响 | 第55-56页 |
| 3.3.1.6 复合氮源浓度对产酶及菌体生长的影响 | 第56页 |
| 3.3.1.7 金属离子对产酶和生长的影响 | 第56-57页 |
| 3.3.1.8 金属离子浓度对产酶和生长的影响 | 第57-58页 |
| 3.3.1.9 诱导剂的筛选 | 第58-59页 |
| 3.3.1.10 诱导时机对产酶和菌体生长的影响 | 第59页 |
| 3.3.1.11 诱导剂浓度对产酶和菌体生长的影响 | 第59-60页 |
| 3.3.1.12 正交试验 | 第60-61页 |
| 3.3.2 其它培养条件对产酶和菌体生长的影响 | 第61-64页 |
| 3.3.2.1 培养基初始pH值对产酶和菌体生长的影响 | 第61-62页 |
| 3.3.2.2 培养温度对产酶和菌体生长的影响 | 第62-63页 |
| 3.3.2.3 接种量对产酶和菌体生长的影响 | 第63页 |
| 3.3.2.4 装液量对产酶和菌体生长的影响 | 第63-64页 |
| 3.3.3 发酵生长曲线的测定 | 第64-65页 |
| 本章小结 | 第65页 |
| 参考文献 | 第65-67页 |
| 第四章 P.fluorescens ZJB-12001静息细胞催化2-氨基-4-甲硫基丁腈制备Met反应条件的研究 | 第67-86页 |
| 4.1 引言 | 第67-68页 |
| 4.2 材料和方法 | 第68-70页 |
| 4.2.1 菌种 | 第68页 |
| 4.2.2 仪器与试剂 | 第68页 |
| 4.2.3 培养基 | 第68页 |
| 4.2.4 菌体培养及收集 | 第68页 |
| 4.2.5 静息细胞转化 | 第68-70页 |
| 4.2.6 酶活定义 | 第70页 |
| 4.2.7 分析检测方法 | 第70页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第70-82页 |
| 4.3.1 有机溶剂对催化的影响 | 第70-71页 |
| 4.3.2 反应体系pH对催化的影响 | 第71-72页 |
| 4.3.3 缓冲体系及水相体系转化进程对比 | 第72-73页 |
| 4.3.4 反应温度对催化的影响 | 第73-74页 |
| 4.3.5 温度稳定性的研究 | 第74-76页 |
| 4.3.6 金属离子及添加剂对催化反应的影响 | 第76页 |
| 4.3.7 底物抑制 | 第76-77页 |
| 4.3.8 产物抑制 | 第77-78页 |
| 4.3.9 不同底物浓度转化进程的研究 | 第78-79页 |
| 4.3.10 菌体使用批次的研究 | 第79-80页 |
| 4.3.11 催化途径的探究 | 第80-82页 |
| 本章小结 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-86页 |
| 第五章 结论与展望 | 第86-88页 |
| 5.1 结论 | 第86-87页 |
| 5.2 展望 | 第87-88页 |
| 附录1 | 第88-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第90页 |
