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生物催化水解2-氨基-4-甲硫基丁腈制备蛋氨酸的研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-8页
第一章 绪论第14-37页
    1.1 腈转化酶的概述第14-19页
        1.1.1 腈转化酶的催化途径及酶类第14-15页
        1.1.2 腈转化酶在精细化学品生产中的应用第15-19页
    1.2 腈水解酶的概述第19-21页
        1.2.1 腈水解酶的来源第19页
        1.2.2 腈水解酶的催化机理第19-21页
    1.3 Met的概述第21-22页
        1.3.1 Met的理化性质第21页
        1.3.2 Met的功能及应用第21-22页
    1.4 Met的合成方法及研究现状第22-29页
        1.4.1 化学法合成研究现状第22-25页
            1.4.1.1 丙烯醛法第22-23页
            1.4.1.2 丙二酸酯法第23-24页
            1.4.1.3 氨基内酯法第24页
            1.4.1.4 固-液相转移催化法第24-25页
        1.4.2 生物法合成研究现状第25-29页
            1.4.2.1 酶拆分法第25-26页
            1.4.2.2 发酵法第26-27页
            1.4.2.3 化学-酶法第27-29页
    1.5 论文的选题意义及研究内容第29-30页
        1.5.1 选题意义第29页
        1.5.2 研究内容第29-30页
    参考文献第30-37页
第二章 腈水解酶菌株的筛选及鉴定第37-49页
    2.1 引言第37页
    2.2 材料与方法第37-40页
        2.2.0 菌种来源第38页
        2.2.1 化学试剂与主要仪器第38页
        2.2.2 培养基第38页
        2.2.3 菌株的初筛第38页
        2.2.4 菌株的复筛第38-39页
        2.2.5 分析检测条件第39页
        2.2.6 酶活定义第39页
        2.2.7 形态特征观察第39页
        2.2.8 生理生化特征的测定第39页
        2.2.9 基因组提取第39-40页
        2.2.10 16S rDNA序列扩增第40页
        2.2.11 系统发育学分析第40页
    2.3 结果与讨论第40-47页
        2.3.1 产腈水解酶菌株的筛选第40-41页
        2.3.2 形态特征第41-42页
        2.3.3 生理生化鉴定第42-44页
        2.3.4 16S rDNA序列测序结果第44-46页
        2.3.5 系统发育分析第46-47页
    本章小结第47页
    参考文献第47-49页
第三章 腈水解酶产生菌P. fluorescens ZJB-12001培养条件的研究第49-67页
    3.1 引言第49-50页
    3.2 材料和方法第50-51页
        3.2.1 菌种第50页
        3.2.2 仪器与试剂第50页
        3.2.3 培养基第50页
        3.2.4 菌体培养第50页
        3.2.5 菌体制备第50-51页
        3.2.6 生物量测定第51页
        3.2.7 静息细胞转化第51页
        3.2.8 酶活的定义第51页
        3.2.9 分析检测方法第51页
    3.3 结果与讨论第51-65页
        3.3.1 发酵培养基组成的优化第51-61页
            3.3.1.1 碳源的筛选第52-53页
            3.3.1.2 复合碳源不同比例对菌体产酶和生长的影响第53页
            3.3.1.3 复合碳源浓度对菌体产酶和生长的影响第53-54页
            3.3.1.4 氮源的筛选第54-55页
            3.3.1.5 复合氮源不同比例对产酶和菌体生长的影响第55-56页
            3.3.1.6 复合氮源浓度对产酶及菌体生长的影响第56页
            3.3.1.7 金属离子对产酶和生长的影响第56-57页
            3.3.1.8 金属离子浓度对产酶和生长的影响第57-58页
            3.3.1.9 诱导剂的筛选第58-59页
            3.3.1.10 诱导时机对产酶和菌体生长的影响第59页
            3.3.1.11 诱导剂浓度对产酶和菌体生长的影响第59-60页
            3.3.1.12 正交试验第60-61页
        3.3.2 其它培养条件对产酶和菌体生长的影响第61-64页
            3.3.2.1 培养基初始pH值对产酶和菌体生长的影响第61-62页
            3.3.2.2 培养温度对产酶和菌体生长的影响第62-63页
            3.3.2.3 接种量对产酶和菌体生长的影响第63页
            3.3.2.4 装液量对产酶和菌体生长的影响第63-64页
        3.3.3 发酵生长曲线的测定第64-65页
    本章小结第65页
    参考文献第65-67页
第四章 P.fluorescens ZJB-12001静息细胞催化2-氨基-4-甲硫基丁腈制备Met反应条件的研究第67-86页
    4.1 引言第67-68页
    4.2 材料和方法第68-70页
        4.2.1 菌种第68页
        4.2.2 仪器与试剂第68页
        4.2.3 培养基第68页
        4.2.4 菌体培养及收集第68页
        4.2.5 静息细胞转化第68-70页
        4.2.6 酶活定义第70页
        4.2.7 分析检测方法第70页
    4.3 结果与讨论第70-82页
        4.3.1 有机溶剂对催化的影响第70-71页
        4.3.2 反应体系pH对催化的影响第71-72页
        4.3.3 缓冲体系及水相体系转化进程对比第72-73页
        4.3.4 反应温度对催化的影响第73-74页
        4.3.5 温度稳定性的研究第74-76页
        4.3.6 金属离子及添加剂对催化反应的影响第76页
        4.3.7 底物抑制第76-77页
        4.3.8 产物抑制第77-78页
        4.3.9 不同底物浓度转化进程的研究第78-79页
        4.3.10 菌体使用批次的研究第79-80页
        4.3.11 催化途径的探究第80-82页
    本章小结第82-83页
    参考文献第83-86页
第五章 结论与展望第86-88页
    5.1 结论第86-87页
    5.2 展望第87-88页
附录1第88-89页
致谢第89-90页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第90页

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