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新蚜虫疠霉弹孢前中后阶段的表达谱与代谢组分析及其电转化初探

致谢第6-7页
摘要第7-10页
Abstract第10-12页
1 绪论第20-34页
    1.1 虫霉目真菌研究进展第20-23页
        1.1.1 虫霉目真菌概述第20页
        1.1.2 虫霉目真菌的致病机理第20-22页
        1.1.3 虫霉目真菌的分子生物学研究进展第22-23页
    1.2 真菌孢子主动弹射研究进展第23-26页
        1.2.1 真菌孢子主动弹射的生理机理研究情况第23-24页
        1.2.2 真菌孢子主动弹射的分子机制研究进展第24-26页
    1.3 RNA-seq技术及应用第26-27页
        1.3.1 RNA-seq技术概述第26页
        1.3.2 RNA-seq在昆虫病原真菌中的应用第26-27页
    1.4 代谢组(Metabolome)检测技术及应用第27-29页
        1.4.1 代谢组检测技术概述第27-28页
        1.4.2 代谢组学研究的重要性第28页
        1.4.3 代谢组学研究的基本流程第28页
        1.4.4 代谢组学检测技术的应用第28-29页
    1.5 昆虫病原真菌遗传转化研究进展第29-32页
        1.5.1 昆虫病原真菌遗传转化的方法与研究进展第29-31页
        1.5.2 接合菌门真菌遗传转化研究进展第31-32页
    1.6 研究目标与意义第32-33页
    1.7 课题来源及论文的内容安排第33-34页
2 新蚜虫疠霉不同状态菌丝RNA-seq数据分析及弹孢相关基因的筛选第34-62页
    2.1 实验材料及仪器第34-35页
        2.1.1 实验材料第34页
        2.1.2 主要试剂第34-35页
        2.1.3 主要仪器设备第35页
    2.2 实验方法第35-39页
        2.2.1 样本准备第35页
        2.2.2 样本菌丝扫描电镜拍照第35-36页
        2.2.3 样本RNA提取第36页
        2.2.4 测序样品的准备第36页
        2.2.5 转录组文库构建第36页
        2.2.6 RNA-seq测序信息分析流程第36页
        2.2.7 数据比对与质控第36-37页
        2.2.8 基因定量分析第37-38页
        2.2.9 差异表达基因的筛选与分析第38-39页
        2.2.10 弹孢相关基因的筛选第39页
    2.3 结果与分析第39-59页
        2.3.1 样本菌丝电镜拍照结果第39-40页
        2.3.2 样本RNA检测结果第40-41页
        2.3.3 RNA-seq测序数据比对与质控结果第41页
        2.3.4 基因定量分析结果第41-44页
        2.3.5 差异基因的筛选结果第44-46页
        2.3.6 DD vs AD显著差异基因分析第46-49页
        2.3.7 AD vs BD显著差异基因分析第49-52页
        2.3.8 DD vs BD显著差异基因分析第52-55页
        2.3.9 弹孢相关基因的筛选结果第55-59页
    2.4 讨论第59-62页
3 新蚜虫疠霉不同状态菌丝代谢组数据分析第62-94页
    3.1 实验材料及仪器第62页
        3.1.1 实验材料第62页
        3.1.2 主要试剂第62页
        3.1.3 主要仪器设备第62页
    3.2 实验方法第62-67页
        3.2.1 样本收集第62-63页
        3.2.2 测序样本的准备第63页
        3.2.3 各样本代谢物提取第63页
        3.2.4 液相色谱—质谱(LC-MS)检测第63-64页
        3.2.5 信息分析流程第64-65页
        3.2.6 数据预处理第65页
        3.2.7 质控分析第65-66页
        3.2.8 统计分析第66-67页
        3.2.9 差异离子的筛选与鉴定第67页
        3.2.10 差异代谢物通路分析第67页
    3.3 结果与分析第67-92页
        3.3.1 质控分析结果第67-68页
        3.3.2 T检验和变异倍数分析结果第68页
        3.3.3 主成分分析(PCA)结果第68-71页
        3.3.4 PLS-DA分析结果第71页
        3.3.5 差异离子的筛选与鉴定结果第71-74页
        3.3.6 差异代谢物鉴定与分析结果第74-92页
    3.4 讨论第92-94页
4 新蚜虫疠霉遗传转化体系初探第94-107页
    4.1 实验材料及仪器第94-95页
        4.1.1 菌株及质粒第94页
        4.1.2 主要试剂第94-95页
        4.1.3 主要仪器设备第95页
    4.2 实验方法第95-99页
        4.2.1 F98028(萌发)孢子的收集第95页
        4.2.2 F98028(萌发)孢子萎锈灵筛选第95页
        4.2.3 质粒pACeG的构建第95-98页
        4.2.4 电激转化新蚜虫疠霉F98028(萌发)孢子第98-99页
    4.3 结果与分析第99-105页
        4.3.1 F98028(萌发)孢子萎锈灵筛选结果第99-100页
        4.3.2 目的片段eGFP与Cbx的扩增结果第100-101页
        4.3.3 质粒pAN52-eGFP与pAN52-Cbx的构建结果第101-102页
        4.3.4 质粒pET-eGFP的构建结果第102-103页
        4.3.5 质粒pACeG的构建结果第103页
        4.3.6 电激转化结果第103-105页
    4.4 讨论第105-107页
5 总结与展望第107-110页
    5.1 总结第107-108页
    5.2 创新点第108-109页
    5.3 展望第109-110页
参考文献第110-123页
作者简历第123页

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