| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略语/符号说明 | 第11-13页 |
| 前言 | 第13-20页 |
| 研究现状、成果 | 第13-18页 |
| 研究目的、方法 | 第18-20页 |
| 一、小分子化合物诱导人和小鼠星形胶质细胞转分化为运动神经元 | 第20-52页 |
| 1.1 对象和方法 | 第20-35页 |
| 1.1.1 主要仪器和耗材 | 第20-21页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第21-24页 |
| 1.1.3 主要细胞和动物 | 第24页 |
| 1.1.4 主要溶液、缓冲液、培养基配置 | 第24-26页 |
| 1.1.5 人正常星形胶质细胞的传代培养、冻存和鉴定 | 第26页 |
| 1.1.6 神经球形成实验 | 第26-27页 |
| 1.1.7 流式细胞仪检测 | 第27页 |
| 1.1.8 小分子化合物诱导HA1800向运动神经元转分化 | 第27-28页 |
| 1.1.9 共聚焦时序拍照 | 第28页 |
| 1.1.10 采用差速贴壁法分离、培养新生大鼠成肌细胞 | 第28-29页 |
| 1.1.11 成肌细胞诱导分化和诱导的运动神经元共培养 | 第29页 |
| 1.1.12 膜片钳技术检测诱导神经元的神经电生理活动 | 第29-30页 |
| 1.1.13 小分子诱导ALS模型小鼠脊髓星形胶质细胞 | 第30-31页 |
| 1.1.14 细胞免疫荧光分析 | 第31-32页 |
| 1.1.15 细胞总RNA提取 | 第32页 |
| 1.1.16 RealtimePCR反应 | 第32-34页 |
| 1.1.17 数据处理和统计学分析 | 第34-35页 |
| 1.2 结果 | 第35-49页 |
| 1.2.1 人星形胶质细胞HA1800鉴定 | 第35-36页 |
| 1.2.2 筛选小分子化合物诱导HA1800向运动神经元转分化 | 第36-41页 |
| 1.2.3 小分子化合物诱导神经元的过程并不经历增殖的神经干/祖细胞中间状态 | 第41-44页 |
| 1.2.4 小分子诱导星形胶质细胞基因表达发生明显改变 | 第44-46页 |
| 1.2.5 诱导运动神经元的具有神经元电生理活动特征 | 第46页 |
| 1.2.6 诱导的神经元控制肌管的收缩 | 第46-47页 |
| 1.2.7 小分子化合物诱导ALS模型小鼠脊髓星形胶质细胞变成运动神经元 | 第47-49页 |
| 1.3 讨论 | 第49-51页 |
| 1.4 小结 | 第51-52页 |
| 二、小分子化合物诱导人和小鼠成纤维细胞转分化为运动神经元 | 第52-69页 |
| 2.1 对象和方法 | 第52-57页 |
| 2.1.1 主要仪器和耗材 | 第52页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第52页 |
| 2.1.3 主要细胞和动物 | 第52页 |
| 2.1.4 主要溶液、缓冲液和培养基配置 | 第52-53页 |
| 2.1.5 成人皮肤成纤维细胞(HSF)分离、培养 | 第53-54页 |
| 2.1.6 小鼠胚胎成纤维细胞(Mouseembryonicfibroblasts,MEF)分离、培养 | 第54页 |
| 2.1.7 小分子化合物诱导人胚肺成纤维细胞转分化为运动神经元 | 第54-55页 |
| 2.1.8 小分子化合物诱导新生儿皮肤成纤维细胞和成人皮肤成纤维细胞 | 第55-56页 |
| 2.1.9 小分子诱导小鼠胚胎成纤维细胞向运动神经元分化 | 第56页 |
| 2.1.10 细胞免疫荧光 | 第56页 |
| 2.1.11 细胞总RNA提取 | 第56页 |
| 2.1.12 RealtimeqPCR分析 | 第56-57页 |
| 2.1.13 数据处理和统计学分析 | 第57页 |
| 2.2 结果 | 第57-67页 |
| 2.2.1 鉴定人胚肺成纤维细胞IMR-90的表型 | 第57-58页 |
| 2.2.2 小分子化合物诱导IMR-90变成运动神经元 | 第58-62页 |
| 2.2.3 小分子诱导人胚肺成纤维细胞转分化为运动神经元不经历神经干/祖细胞中间状态 | 第62-63页 |
| 2.2.4 小分子诱导人胚肺成纤维细胞的基因表达发生改变 | 第63-64页 |
| 2.2.5 小分子化合物诱导新生儿皮肤成纤维细胞和成人皮肤成纤维细胞转分化为运动神经元 | 第64-65页 |
| 2.2.6 小分子化合物诱导小鼠胚胎成纤维细胞变成运动神经元 | 第65-67页 |
| 2.3 讨论 | 第67-68页 |
| 2.4 小结 | 第68-69页 |
| 三、小分子化合物诱导人骨髓间充质干细胞转分化为运动神经元 | 第69-76页 |
| 3.1 对象和方法 | 第69-72页 |
| 3.1.1 主要仪器和耗材 | 第69页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第69-70页 |
| 3.1.3 主要的细胞 | 第70页 |
| 3.1.4 主要溶液、缓冲液、培养基配置 | 第70页 |
| 3.1.5 人骨髓间充质干细胞表面分子表达鉴定 | 第70页 |
| 3.1.6 流式细胞仪检测HBMSC的表面抗原 | 第70-71页 |
| 3.1.7 HBMSC的体外分化鉴定 | 第71-72页 |
| 3.1.8 小分子化合物诱导人骨髓间充质干细胞转分化为运动神经元 | 第72页 |
| 3.2 结果 | 第72-74页 |
| 3.2.1 HBMSC的表型和体外分化鉴定 | 第72-74页 |
| 3.2.2 小分子化合物诱导HBMSC直接转分化为运动神经元 | 第74页 |
| 3.3 讨论 | 第74-75页 |
| 3.4 小结 | 第75-76页 |
| 四、小分子化合物体内诱导细胞表达运动神经元标志物 | 第76-85页 |
| 4.1 对象和方法 | 第76-78页 |
| 4.1.1 主要仪器和耗材 | 第76页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第76-77页 |
| 4.1.3 主要细胞和动物 | 第77页 |
| 4.1.4 主要溶液、缓冲液、培养基配置 | 第77页 |
| 4.1.5 小分子在体诱导细胞转分化实验 | 第77-78页 |
| 4.1.6 组织切片和免疫荧光检测 | 第78页 |
| 4.2 结果 | 第78-83页 |
| 4.2.1 小分子化合物在体内诱导小鼠皮下组织细胞表达运动神经元的标志物 | 第78-82页 |
| 4.2.2 小分子化合物体内诱导坐骨神经周围细胞表达运动神经元的标志物 | 第82-83页 |
| 4.3 讨论 | 第83-84页 |
| 4.4 小结 | 第84-85页 |
| 全文结论 | 第85-89页 |
| 论文创新点 | 第89-90页 |
| 参考文献 | 第90-99页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第99-100页 |
| 综述 | 第100-111页 |
| 综述参考文献 | 第105-111页 |
| 致谢 | 第111-112页 |
| 个人简历 | 第112页 |
