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保幼激素和胰岛素激活Met-及ERK-信号通路调控飞蝗卵黄蛋白原表达的分子机制

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
第一章 研究背景第10-18页
    1.1 飞蝗的生殖特点第10页
        1.1.1 飞蝗的灾害性第10页
        1.1.2 飞蝗的发育第10页
    1.2 卵黄发生第10-11页
    1.3 激素调控昆虫的生殖发育第11-12页
    1.4 保幼激素调控雌性昆虫生殖第12-15页
        1.4.1 保幼激素作用的分子机制第13页
        1.4.2 保幼激素诱导调控昆虫卵黄发生和卵巢成熟第13-15页
    1.5 胰岛素信号通路调控卵黄发生第15-16页
        1.5.1 AA/TOR和Insulin信号通路在卵黄发生的作用第15-16页
    1.6 拟解决的科学问题和实验方案第16-18页
第二章 JH和insulin信号通路调控飞蝗Vg的表达第18-30页
    2.1 实验材料第18-19页
        2.1.1 实验对象第18页
        2.1.2 实验试剂第18-19页
    2.2 实验方法第19-30页
        2.2.1 飞蝗组织RNA的提取第19-20页
        2.2.2 cDNA的反转录第20页
        2.2.3 飞蝗组织蛋白质的提取第20-21页
        2.2.4 Vg基因的克隆第21页
        2.2.5 荧光定量PCR反应第21-23页
        2.2.6 兔源多克隆抗体制备第23-24页
        2.2.7 蛋白免疫印迹(Western blot)第24-25页
        2.2.8 虫体干扰第25-27页
        2.2.9 早熟素,dsRNA和保幼激素类似物处理第27页
        2.2.10 激素处理诱导飞蝗蛋白表达水平的变化第27-28页
        2.2.11 细胞系过表达第28-30页
第三章 实验结果第30-48页
    3.1 飞蝗VgA和VgB基因序列第30页
    3.2 飞蝗Vg、Met和β-Actin抗体制备第30-33页
        3.2.1 飞蝗Vg抗体制备第30-31页
        3.2.2 飞蝗Met的抗体制备第31-32页
        3.2.3 飞蝗β-Actin的抗体制备第32-33页
    3.3 飞蝗Vg的mRNA水平表达谱第33-34页
    3.4 Met、ERK调控飞蝗Vg蛋白水平表达第34-35页
    3.5 Met调控飞蝗Vg的mRNA和蛋白水平表达第35-36页
    3.6 Met在保幼激素信号通路调控Vg表达中起关键作用第36-37页
    3.7 Vg启动子区活性双荧光素酶报告分析第37-39页
    3.8 ERK调控飞蝗Vg的mRNA和蛋白水平表达第39-40页
    3.9 ERK在胰岛素信号通路协同调控飞蝗Vg表达第40-42页
    3.10 保幼激素类似物诱导Vg、ERK表达第42-44页
    3.11 胰岛素诱导Vg、ERK表达第44-45页
    3.12 ERK下游转录因子CREB、ER和SRF影响飞蝗Vg表达第45-48页
第四章 讨论第48-52页
第五章 总结第52-54页
参考文献第54-66页
致谢第66-68页
攻读学位期间发表的学术论文第68-70页
附录A 符号说明第70-72页
附录B VgA基因cDNA序列第72-76页
附录C VgB基因cDNA序列第76-79页

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