摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一章 研究背景 | 第10-18页 |
1.1 飞蝗的生殖特点 | 第10页 |
1.1.1 飞蝗的灾害性 | 第10页 |
1.1.2 飞蝗的发育 | 第10页 |
1.2 卵黄发生 | 第10-11页 |
1.3 激素调控昆虫的生殖发育 | 第11-12页 |
1.4 保幼激素调控雌性昆虫生殖 | 第12-15页 |
1.4.1 保幼激素作用的分子机制 | 第13页 |
1.4.2 保幼激素诱导调控昆虫卵黄发生和卵巢成熟 | 第13-15页 |
1.5 胰岛素信号通路调控卵黄发生 | 第15-16页 |
1.5.1 AA/TOR和Insulin信号通路在卵黄发生的作用 | 第15-16页 |
1.6 拟解决的科学问题和实验方案 | 第16-18页 |
第二章 JH和insulin信号通路调控飞蝗Vg的表达 | 第18-30页 |
2.1 实验材料 | 第18-19页 |
2.1.1 实验对象 | 第18页 |
2.1.2 实验试剂 | 第18-19页 |
2.2 实验方法 | 第19-30页 |
2.2.1 飞蝗组织RNA的提取 | 第19-20页 |
2.2.2 cDNA的反转录 | 第20页 |
2.2.3 飞蝗组织蛋白质的提取 | 第20-21页 |
2.2.4 Vg基因的克隆 | 第21页 |
2.2.5 荧光定量PCR反应 | 第21-23页 |
2.2.6 兔源多克隆抗体制备 | 第23-24页 |
2.2.7 蛋白免疫印迹(Western blot) | 第24-25页 |
2.2.8 虫体干扰 | 第25-27页 |
2.2.9 早熟素,dsRNA和保幼激素类似物处理 | 第27页 |
2.2.10 激素处理诱导飞蝗蛋白表达水平的变化 | 第27-28页 |
2.2.11 细胞系过表达 | 第28-30页 |
第三章 实验结果 | 第30-48页 |
3.1 飞蝗VgA和VgB基因序列 | 第30页 |
3.2 飞蝗Vg、Met和β-Actin抗体制备 | 第30-33页 |
3.2.1 飞蝗Vg抗体制备 | 第30-31页 |
3.2.2 飞蝗Met的抗体制备 | 第31-32页 |
3.2.3 飞蝗β-Actin的抗体制备 | 第32-33页 |
3.3 飞蝗Vg的mRNA水平表达谱 | 第33-34页 |
3.4 Met、ERK调控飞蝗Vg蛋白水平表达 | 第34-35页 |
3.5 Met调控飞蝗Vg的mRNA和蛋白水平表达 | 第35-36页 |
3.6 Met在保幼激素信号通路调控Vg表达中起关键作用 | 第36-37页 |
3.7 Vg启动子区活性双荧光素酶报告分析 | 第37-39页 |
3.8 ERK调控飞蝗Vg的mRNA和蛋白水平表达 | 第39-40页 |
3.9 ERK在胰岛素信号通路协同调控飞蝗Vg表达 | 第40-42页 |
3.10 保幼激素类似物诱导Vg、ERK表达 | 第42-44页 |
3.11 胰岛素诱导Vg、ERK表达 | 第44-45页 |
3.12 ERK下游转录因子CREB、ER和SRF影响飞蝗Vg表达 | 第45-48页 |
第四章 讨论 | 第48-52页 |
第五章 总结 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-66页 |
致谢 | 第66-68页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第68-70页 |
附录A 符号说明 | 第70-72页 |
附录B VgA基因cDNA序列 | 第72-76页 |
附录C VgB基因cDNA序列 | 第76-79页 |