| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 引言 | 第11-19页 |
| 1.1 飞蝗 | 第11页 |
| 1.2 昆虫的生殖 | 第11-13页 |
| 1.2.1 保幼激素调控昆虫生殖的分子机制 | 第12-13页 |
| 1.3 miRNA | 第13-16页 |
| 1.3.1 miRNA生物合成与功能 | 第13-14页 |
| 1.3.2 miRNA在昆虫中的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.3.3 miRNA调控昆虫生殖 | 第15-16页 |
| 1.3.4 miRNAcluster | 第16页 |
| 1.4 Notch信号通路 | 第16-18页 |
| 1.4.1 Notch信号通路主要特征 | 第17页 |
| 1.4.2 Notch信号通路的作用 | 第17-18页 |
| 1.5 待解决的科学问题 | 第18-19页 |
| 第二章 材料与方法 | 第19-31页 |
| 2.1 飞蝗的饲养 | 第19页 |
| 2.2 小RNA转录组测序及miRNA鉴定 | 第19页 |
| 2.3 飞蝗内源保幼激素的剥夺和保幼激素类似物的处理 | 第19-20页 |
| 2.4 在体内过表达miRNA | 第20页 |
| 2.5 RNA提取 | 第20页 |
| 2.6 反转录 | 第20-21页 |
| 2.6.1 miRNA反转录 | 第20-21页 |
| 2.6.2 mRNA反转录 | 第21页 |
| 2.7 荧光定量PCR | 第21-23页 |
| 2.7.1 mRNA荧光定量引物 | 第21-22页 |
| 2.7.2 miRNA定量引物 | 第22页 |
| 2.7.3 mRNA荧光定量反应 | 第22页 |
| 2.7.4 miRNA荧光定量反应 | 第22-23页 |
| 2.7.5 数据分析 | 第23页 |
| 2.8 表型观察 | 第23页 |
| 2.9 miRNA靶基因预测 | 第23页 |
| 2.10 双萤光素酶表达载体构建 | 第23-26页 |
| 2.10.1 PCR扩增 | 第23-25页 |
| 2.10.2 双酶切 | 第25页 |
| 2.10.3 连接 | 第25-26页 |
| 2.10.4 转化 | 第26页 |
| 2.11 双萤光素酶报告基因实验 | 第26-28页 |
| 2.11.1 细胞培养 | 第26页 |
| 2.11.2 转染 | 第26-27页 |
| 2.11.3 萤光素酶活性检测 | 第27-28页 |
| 2.12 RNA干扰 | 第28-29页 |
| 2.12.1 RNA干扰引物设计与模板合成 | 第28页 |
| 2.12.2 dsRNA合成与纯化 | 第28-29页 |
| 2.12.3 dsRNA注射 | 第29页 |
| 2.13 RNA免疫共沉淀 | 第29-31页 |
| 第三章 结果与分析 | 第31-43页 |
| 3.1 miRNAcluster的鉴定 | 第31-33页 |
| 3.2 JH抑制miR-2～13～71的表达 | 第33-34页 |
| 3.3 过表达miR-2～13～71抑制飞蝗卵黄生成和卵巢发育 | 第34-35页 |
| 3.4 miR-2～13～71靶基因的预测 | 第35-36页 |
| 3.5 Notch是miR-2～13～71的靶基因 | 第36-37页 |
| 3.6 Notch和miR-2～13～71在体内相互作用 | 第37-38页 |
| 3.7 miR-2～13～71通过Notch调控飞蝗卵黄生成 | 第38-43页 |
| 第四章 讨论 | 第43-45页 |
| 第五章 结论 | 第45-47页 |
| 参考文献 | 第47-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
