英文缩略词表 | 第7-8页 |
摘要 | 第8-9页 |
1 文献综述 | 第9-18页 |
1.1 逆境胁迫对植物的影响 | 第9-11页 |
1.1.1 对生长发育的影响 | 第9页 |
1.1.2 对光合作用的影响 | 第9-10页 |
1.1.3 渗透胁迫 | 第10页 |
1.1.4 离子胁迫 | 第10页 |
1.1.5 活性氧的危害 | 第10-11页 |
1.2 植物耐逆性机制 | 第11-14页 |
1.2.1 渗透调节 | 第11页 |
1.2.2 离子调节 | 第11-12页 |
1.2.3 活性氧的清除 | 第12-13页 |
1.2.4 信号转导途径 | 第13-14页 |
1.3 甜瓜抗逆性研究进展 | 第14页 |
1.4 糖基转移酶研究进展 | 第14-16页 |
1.4.1 糖基转移酶的特点 | 第15页 |
1.4.2 糖基转移酶的功能 | 第15-16页 |
1.5 技术路线 | 第16-17页 |
1.6 本研究目的与意义 | 第17-18页 |
2 甜瓜CmGnT基因克隆及生物信息学分析 | 第18-31页 |
2.1 实验材料 | 第18页 |
2.1.1 植物材料 | 第18页 |
2.1.2 主要试剂 | 第18页 |
2.2 实验方法 | 第18-21页 |
2.2.1 试验材料与处理 | 第18页 |
2.2.2 甜瓜总RNA提取 | 第18-19页 |
2.2.3 RNA检测 | 第19页 |
2.2.4 反转录 | 第19-20页 |
2.2.5 甜瓜CmGnT基因的克隆 | 第20-21页 |
2.2.6 琼脂糖凝胶电泳检测及凝胶回收 | 第21页 |
2.2.7 基因测序 | 第21页 |
2.2.8 生物信息学分析 | 第21页 |
2.3 结果与分析 | 第21-29页 |
2.3.1 总RNA的提取及反转录 | 第21-22页 |
2.3.2 甜瓜CmGnT基因克隆 | 第22页 |
2.3.3 测序结果 | 第22页 |
2.3.4 生物信息学分析 | 第22-29页 |
2.4 讨论 | 第29-31页 |
3 甜瓜CmGnT基因实时荧光定量PCR检测 | 第31-36页 |
3.1 实验材料 | 第31页 |
3.1.1 材料处理 | 第31页 |
3.1.2 仪器及试剂 | 第31页 |
3.2 实验方法 | 第31-33页 |
3.2.1 甜瓜RNA提取及反转录 | 第31-32页 |
3.2.2 实时荧光定量PCR | 第32-33页 |
3.3 结果与分析 | 第33-35页 |
3.3.1 甜瓜CmGnT基因表达分析 | 第33页 |
3.3.2 非生物胁迫下甜瓜CmGnT基因表达分析 | 第33-35页 |
3.4 讨论 | 第35-36页 |
4 甜瓜CmGnT蛋白亚细胞定位 | 第36-42页 |
4.1 实验材料 | 第36页 |
4.1.1 材料与仪器 | 第36页 |
4.1.2 载体和菌株 | 第36页 |
4.1.3 主要试剂 | 第36页 |
4.2 实验方法 | 第36-39页 |
4.2.1 构建甜瓜CmGnT GFP融合蛋白表达载体 | 第36-37页 |
4.2.2 PCR反应 | 第37页 |
4.2.3 pCAMBIA1302质粒载体酶切 | 第37页 |
4.2.4 载体连接 | 第37页 |
4.2.5 大肠杆菌转化 | 第37-38页 |
4.2.6 菌液PCR验证 | 第38页 |
4.2.7 提取质粒 | 第38-39页 |
4.2.8 阳性质粒测序检测 | 第39页 |
4.2.9 基因枪子弹制备 | 第39页 |
4.2.10 基因枪法转化洋葱内表皮细胞 | 第39页 |
4.2.11 亚细胞定位的观察 | 第39页 |
4.3 结果与分析 | 第39-41页 |
4.3.1 胶回收PCR扩增产物 | 第39页 |
4.3.2 大肠杆菌菌液PCR结果 | 第39-41页 |
4.3.3 甜瓜CmGnT亚细胞定位结果 | 第41页 |
4.4 讨论 | 第41-42页 |
5 过表达载体和RNAi干扰载体构建 | 第42-52页 |
5.1 实验材料 | 第42页 |
5.1.1 载体和菌株 | 第42页 |
5.1.2 培养基 | 第42页 |
5.2 实验方法 | 第42-46页 |
5.2.1 过表达载体构建 | 第42-44页 |
5.2.2 RNAi干扰载体的构建 | 第44-46页 |
5.3 结果与分析 | 第46-50页 |
5.3.1 过表达载体构建结果 | 第46页 |
5.3.2 pBI121-CmGnT质粒载体转化农杆菌鉴定 | 第46-47页 |
5.3.3 RNAi干扰载体构建结果 | 第47-50页 |
5.4 讨论 | 第50-52页 |
6 研究结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-59页 |
Abstract | 第59页 |
致谢 | 第61页 |