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巴马香猪ASCs和BMSCs的分离培养与鉴定并用它们生产手工克隆胚胎的初步研究

摘要第4-7页
ABSTRACT第7-9页
英文缩略词第14-15页
第一章 文献综述第15-28页
    1 核移植技术概述第15-20页
        1.1 核移植技术及其存在的问题第15-16页
        1.2 手工克隆技术研究进展第16-17页
        1.3 手工克隆的应用前景和存在的问题第17-18页
        1.4 细胞核移植重编程第18-19页
        1.5 干细胞作为核移植的供体第19-20页
    2 间充质干细胞概述第20-21页
    3 ASCs和BMSCs研究进展第21-27页
        3.1 ASCs和BMSCs生物学特性第21-23页
            3.1.1 分离培养第21-23页
            3.1.2 ASCs和BMSCs的表面标志第23页
        3.2 分化潜能第23-25页
            3.2.1 ASCs和BMSCs成脂分化第24页
            3.2.2 ASCs和BMSCs成骨分化第24-25页
            3.2.3 ASCs和BMSCs成软骨分化第25页
        3.3 ASCs和BMSCs的应用前景第25-26页
            3.3.1 作为核移植供体细胞第25页
            3.3.2 用于组织修复第25-26页
            3.3.3 用于疾病模型治疗第26页
        3.4 亟待解决的问题第26-27页
    4 研究的目的和意义第27-28页
第二章 广西巴马香猪ASCS和BMSCS分离培养及生物学特性第28-48页
    1 材料第29-30页
        1.1 实验材料第29页
        1.2 主要试剂第29页
        1.3 主要溶液配制第29-30页
        1.4 实验仪器第30页
    2 试验方法第30-34页
        2.1 巴马香猪ASCs和BMSC的原代培养第30-32页
            2.1.1 巴马香猪ASCs的原代培养第30-31页
            2.1.2 巴马香猪BMSCs的原代培养第31页
            2.1.3 巴马香猪PEFs的原代培养第31-32页
        2.2 巴马香猪ASCs和BMSCs的传代培养第32页
        2.3 巴马香猪ASCs和BMSCs的冻存与复苏第32页
        2.4 巴马香猪ASCs和BMSCs的形态观察和生长特性第32-33页
            2.4.1 细胞形态观察第32页
            2.4.2 巴马香猪ASCs和BMSCs的生长曲线第32-33页
        2.5 巴马香猪ASCs和BMSCs细胞集落第33页
        2.6 巴马香猪ASCs和BMSCs核型分析第33页
        2.7 巴马香猪ASCs和BMSCs的免疫荧光第33-34页
        2.8 数据分析第34页
    3 试验结果第34-43页
        3.1 巴马香猪ASCs和BMSCs的形态学观察第34-36页
        3.2 巴马香猪ASCs和BMSCs生长曲线的测定第36-37页
        3.3 巴马香猪ASCs和BMSCs细胞集落试验第37-39页
        3.4 巴马香猪ASCs和BMSCs的核型分析第39-40页
        3.5 巴马香猪ASCs和BMSCs的免疫荧光第40-43页
    4 分析与讨论第43-46页
        4.1 巴马香猪ASCs和BMSCs的分离培养及其生物学特性第44-45页
        4.2 巴马香猪ASCs和BMSCs的核型检测第45-46页
        4.3 巴马香猪ASCs和BMSCs的免疫组化第46页
    5 小结第46-48页
第三章 巴马香猪ASCs和BMSCs的鉴定第48-63页
    1 材料与方法第48-50页
        1.1 实验试剂第48-49页
        1.2 主要溶液配制第49-50页
        1.3 实验仪器第50页
    2 方法第50-54页
        2.1 巴马香猪ASCs和BMSCs的表面抗原检测第50页
        2.2 巴马香猪ASCs和BMSCs诱导分化第50-51页
        2.3 巴马香猪ASCs和BMSCs的诱导分化后鉴定第51-54页
            2.3.1 组织染色第51-52页
            2.3.2 特异性基因检测第52-54页
    3 结果第54-59页
        3.1 巴马香猪ASCs和BMSCs的表面抗原检测第54-56页
        3.2 形态观察及组织染色第56-58页
        3.3 特异性基因检测第58-59页
    4 分析与讨论第59-62页
        4.1 巴马香猪ASCs和BMSCs表面抗原检测第59-60页
        4.2 巴马香猪ASCs和BMSCs的体外诱导及鉴定第60-62页
    5 小结第62-63页
第四章 巴马香猪ASCs和BMSCs作为供体细胞生产手工克隆胚胎第63-74页
    1 材料第64-65页
        1.1 试验材料第64页
        1.2 主要试剂第64页
        1.3 主要溶液的配制第64页
        1.4 试验仪器第64-65页
    2 方法第65-68页
        2.1 巴马香猪ASCs和BMSCs为供体进行手工克隆第65-66页
            2.1.1 猪卵母细胞的成熟第65页
            2.1.2 透明带的消化和去核第65页
            2.1.3 供/受体细胞的粘合、融合激活第65-66页
            2.1.4 重构胚的培养第66页
            2.1.5 囊胚细胞计数第66页
            2.1.6 数据统计第66页
        2.2 QRT PCR检测相关基因的表达第66-68页
            2.2.1 胚胎的收集第66页
            2.2.2 反转第66-67页
            2.2.3 QRT-PCR第67页
            2.2.4 数据分析第67-68页
    3 结果第68-70页
        3.1 巴马香猪ASCs和BMSCs为HMC供体重构胚的发育效果第68-69页
        3.2 QRT-PCR结果第69-70页
    4 分析与讨论第70-73页
    5 小结第73-74页
参考文献第74-82页
致谢第82-83页
攻读学位期间发表的学术论文目录第83页

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