| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 英文缩略词 | 第14-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-28页 |
| 1 核移植技术概述 | 第15-20页 |
| 1.1 核移植技术及其存在的问题 | 第15-16页 |
| 1.2 手工克隆技术研究进展 | 第16-17页 |
| 1.3 手工克隆的应用前景和存在的问题 | 第17-18页 |
| 1.4 细胞核移植重编程 | 第18-19页 |
| 1.5 干细胞作为核移植的供体 | 第19-20页 |
| 2 间充质干细胞概述 | 第20-21页 |
| 3 ASCs和BMSCs研究进展 | 第21-27页 |
| 3.1 ASCs和BMSCs生物学特性 | 第21-23页 |
| 3.1.1 分离培养 | 第21-23页 |
| 3.1.2 ASCs和BMSCs的表面标志 | 第23页 |
| 3.2 分化潜能 | 第23-25页 |
| 3.2.1 ASCs和BMSCs成脂分化 | 第24页 |
| 3.2.2 ASCs和BMSCs成骨分化 | 第24-25页 |
| 3.2.3 ASCs和BMSCs成软骨分化 | 第25页 |
| 3.3 ASCs和BMSCs的应用前景 | 第25-26页 |
| 3.3.1 作为核移植供体细胞 | 第25页 |
| 3.3.2 用于组织修复 | 第25-26页 |
| 3.3.3 用于疾病模型治疗 | 第26页 |
| 3.4 亟待解决的问题 | 第26-27页 |
| 4 研究的目的和意义 | 第27-28页 |
| 第二章 广西巴马香猪ASCS和BMSCS分离培养及生物学特性 | 第28-48页 |
| 1 材料 | 第29-30页 |
| 1.1 实验材料 | 第29页 |
| 1.2 主要试剂 | 第29页 |
| 1.3 主要溶液配制 | 第29-30页 |
| 1.4 实验仪器 | 第30页 |
| 2 试验方法 | 第30-34页 |
| 2.1 巴马香猪ASCs和BMSC的原代培养 | 第30-32页 |
| 2.1.1 巴马香猪ASCs的原代培养 | 第30-31页 |
| 2.1.2 巴马香猪BMSCs的原代培养 | 第31页 |
| 2.1.3 巴马香猪PEFs的原代培养 | 第31-32页 |
| 2.2 巴马香猪ASCs和BMSCs的传代培养 | 第32页 |
| 2.3 巴马香猪ASCs和BMSCs的冻存与复苏 | 第32页 |
| 2.4 巴马香猪ASCs和BMSCs的形态观察和生长特性 | 第32-33页 |
| 2.4.1 细胞形态观察 | 第32页 |
| 2.4.2 巴马香猪ASCs和BMSCs的生长曲线 | 第32-33页 |
| 2.5 巴马香猪ASCs和BMSCs细胞集落 | 第33页 |
| 2.6 巴马香猪ASCs和BMSCs核型分析 | 第33页 |
| 2.7 巴马香猪ASCs和BMSCs的免疫荧光 | 第33-34页 |
| 2.8 数据分析 | 第34页 |
| 3 试验结果 | 第34-43页 |
| 3.1 巴马香猪ASCs和BMSCs的形态学观察 | 第34-36页 |
| 3.2 巴马香猪ASCs和BMSCs生长曲线的测定 | 第36-37页 |
| 3.3 巴马香猪ASCs和BMSCs细胞集落试验 | 第37-39页 |
| 3.4 巴马香猪ASCs和BMSCs的核型分析 | 第39-40页 |
| 3.5 巴马香猪ASCs和BMSCs的免疫荧光 | 第40-43页 |
| 4 分析与讨论 | 第43-46页 |
| 4.1 巴马香猪ASCs和BMSCs的分离培养及其生物学特性 | 第44-45页 |
| 4.2 巴马香猪ASCs和BMSCs的核型检测 | 第45-46页 |
| 4.3 巴马香猪ASCs和BMSCs的免疫组化 | 第46页 |
| 5 小结 | 第46-48页 |
| 第三章 巴马香猪ASCs和BMSCs的鉴定 | 第48-63页 |
| 1 材料与方法 | 第48-50页 |
| 1.1 实验试剂 | 第48-49页 |
| 1.2 主要溶液配制 | 第49-50页 |
| 1.3 实验仪器 | 第50页 |
| 2 方法 | 第50-54页 |
| 2.1 巴马香猪ASCs和BMSCs的表面抗原检测 | 第50页 |
| 2.2 巴马香猪ASCs和BMSCs诱导分化 | 第50-51页 |
| 2.3 巴马香猪ASCs和BMSCs的诱导分化后鉴定 | 第51-54页 |
| 2.3.1 组织染色 | 第51-52页 |
| 2.3.2 特异性基因检测 | 第52-54页 |
| 3 结果 | 第54-59页 |
| 3.1 巴马香猪ASCs和BMSCs的表面抗原检测 | 第54-56页 |
| 3.2 形态观察及组织染色 | 第56-58页 |
| 3.3 特异性基因检测 | 第58-59页 |
| 4 分析与讨论 | 第59-62页 |
| 4.1 巴马香猪ASCs和BMSCs表面抗原检测 | 第59-60页 |
| 4.2 巴马香猪ASCs和BMSCs的体外诱导及鉴定 | 第60-62页 |
| 5 小结 | 第62-63页 |
| 第四章 巴马香猪ASCs和BMSCs作为供体细胞生产手工克隆胚胎 | 第63-74页 |
| 1 材料 | 第64-65页 |
| 1.1 试验材料 | 第64页 |
| 1.2 主要试剂 | 第64页 |
| 1.3 主要溶液的配制 | 第64页 |
| 1.4 试验仪器 | 第64-65页 |
| 2 方法 | 第65-68页 |
| 2.1 巴马香猪ASCs和BMSCs为供体进行手工克隆 | 第65-66页 |
| 2.1.1 猪卵母细胞的成熟 | 第65页 |
| 2.1.2 透明带的消化和去核 | 第65页 |
| 2.1.3 供/受体细胞的粘合、融合激活 | 第65-66页 |
| 2.1.4 重构胚的培养 | 第66页 |
| 2.1.5 囊胚细胞计数 | 第66页 |
| 2.1.6 数据统计 | 第66页 |
| 2.2 QRT PCR检测相关基因的表达 | 第66-68页 |
| 2.2.1 胚胎的收集 | 第66页 |
| 2.2.2 反转 | 第66-67页 |
| 2.2.3 QRT-PCR | 第67页 |
| 2.2.4 数据分析 | 第67-68页 |
| 3 结果 | 第68-70页 |
| 3.1 巴马香猪ASCs和BMSCs为HMC供体重构胚的发育效果 | 第68-69页 |
| 3.2 QRT-PCR结果 | 第69-70页 |
| 4 分析与讨论 | 第70-73页 |
| 5 小结 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第83页 |
