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青瓯柑果实成熟衰老延缓调控机制研究

摘要第7-10页
ABSTRACT第10-12页
缩略词表第13-14页
第一章 前言第14-31页
    1.课题提出第14-31页
        1.1 果实成熟衰老表型研究进展第14-21页
            1.1.1 果实成熟衰老的形态学变化第15-18页
            1.1.2 果实成熟衰老的细胞学变化第18-19页
            1.1.3 果实成熟衰老果实内在风味的变化第19-21页
        1.2 果实成熟衰老的调控机制研究进展第21-28页
            1.2.1 植物激素对果实成熟衰老调控第21-26页
            1.2.2 转录因子对果实成熟衰老调控第26-28页
        1.3 果实成熟衰老的调控及产业应用第28-30页
        1.4 本研究目的和内容第30-31页
第二章 青瓯柑果实成熟衰老延缓表型评价第31-49页
    1.引言第31-32页
    2.材料方法第32-37页
        2.1 实验材料第32页
        2.2 取样方法第32-33页
        2.3 腐烂率统计第33页
        2.4 果实内在品质测定第33页
        2.5 果实色差测定第33页
        2.6 叶绿素测定第33-34页
        2.7 类胡萝卜素测定第34-35页
        2.8 ABA测定及ABA处理表型分析第35-37页
        2.9 DNA提取及测序流程、质量评估及重测序数据分析第37页
    3.实验结果及分析第37-46页
        3.1 果实外观品质差异第37-39页
        3.2 果实内在品质差异第39-40页
        3.3 果实贮藏期腐烂率差异第40页
        3.4 有色层叶绿素及类胡萝卜素差异第40-42页
        3.5 有色层ABA含量差异及ABA处理对果实色差指数的影响第42-43页
        3.6 青瓯柑及回复突变材料相关生理品质差异第43-44页
        3.7 普通瓯柑、青瓯柑及回复突变材料重测序数据SNP差异第44-46页
    4.讨论第46-49页
第三章 转录因子CrMYB68和CrNAC036对青瓯柑类胡萝卜素及ABA代谢的调控第49-87页
    1.引言第49页
    2.材料方法第49-60页
        2.1 实验材料第49-50页
        2.2 菌株和质粒第50页
        2.3 RNA提取及定量分析第50-51页
        2.4 目的基因全长克隆第51-52页
        2.5 原核表达载体构建及蛋白表达分析第52-53页
        2.6 超量表达载体构建第53-54页
        2.7 序列分析第54页
        2.8 亚细胞定位分析第54-55页
        2.9 选择性扩增结合位点分析第55-57页
        2.10 双荧光素酶瞬时表达分析第57-58页
        2.11 凝胶迁移分析第58页
        2.12 烟草瞬时表达分析第58-59页
        2.13 柑橘愈伤遗传转化第59-60页
    3.结果与分析第60-80页
        3.1 有色层类胡萝卜素及ABA代谢相关基因表达分析第60-61页
        3.2 CrBCH2、CrNCED5、CrMYB68及CrNAC036表达及序列分析第61-63页
        3.3 CrMYB68序列分析第63-64页
        3.4 CrMYB68的亚细胞定位分析第64-65页
        3.5 CrMYB68-HIS标签蛋白表达纯化第65-66页
        3.6 CrMYB68蛋白DNA结合序列筛选第66-67页
        3.7 CrMYB68结合CrBCH2和CrNCED5启动子相关序列分析第67-68页
        3.8 CrMYB68调控CrBCH2和CrNCED5的启动子活性分析第68-69页
        3.9 利用烟草叶片瞬时超表达CrMYB68的表型分析第69-71页
        3.10 利用烟草叶片瞬时超表达CrBCH2和CrNCED5表型分析第71-72页
        3.11 CrBCH2超表达柑橘愈伤表型分析第72-74页
        3.12 CrNAC036基因序列分析第74-75页
        3.13 CrNAC036蛋白的亚细胞定位及重组蛋白表达分析第75-77页
        3.14 CrNAC036结合并调控CrNCED5启动子分析第77-79页
        3.15 青瓯柑与普通瓯柑间衰老相关基因表达分析第79-80页
    4.讨论第80-87页
        4.1 CrMYB68对青瓯柑果实α、β-胡萝卜素转化的可能调控机制第80-83页
        4.2 CrMYB68和CrNAC036对ABA合成的可能调控机制第83-87页
第四章 外源水杨酸(SA)及24-表油菜素内酯(EBR)对柑橘果实采后衰老的影响第87-103页
    1.引言第87页
    2.材料方法第87-90页
        2.1 实验材料第87页
        2.2 材料处理第87-88页
        2.3 材料收集第88页
        2.4 腐烂率测定第88页
        2.5 失重率测定第88页
        2.6 硬度测定第88页
        2.7 果实内在品质测定第88-89页
        2.8 过氧化氢含量及相关氧化还原酶酶活测定第89页
        2.9 初生代谢物含量测定第89-90页
        2.10 类黄酮含量测定第90页
        2.11 果皮总RNA及基因表达量分析第90页
    3.结果与分析第90-99页
        3.1 外源SA处理对温州蜜柑采后衰老相关性状的影响第90-94页
            3.1.1 外源SA处理显著降低温州蜜柑果实采后腐烂率并增加果实硬度第90-91页
            3.1.2 外源SA处理显著增加果实H_2O_2含量第91-92页
            3.1.3 外源SA处理能特异性的诱导果实脂溶性多甲基黄酮积累第92-94页
        3.2 外源EBR处理对温州蜜柑采后衰老相关性状的影响第94-99页
            3.1.1 外源EBR处理显著降低了温州蜜柑果实采后腐烂率第94-95页
            3.1.2 外源EBR处理显著增加果皮中H_2O_2含量第95-96页
            3.1.3 外源EBR处理显著增加果皮中抗性物质的含量第96-98页
            3.1.4 外源EBR处理显著诱导了果皮中抗逆相关基因的表达第98-99页
    4.讨论第99-103页
        4.1 外源SA处理诱导温州蜜柑果实采后抗性增强的可能机制第99-100页
        4.2 外源EBR处理诱导温州蜜柑果实采后抗性增强的可能机制第100-103页
第五章 总结与展望第103-105页
参考文献第105-121页
附录I 相关基因编码区及启动子序列比对第121-126页
附录II CrMYB68和CrNAC036重组蛋白质谱鉴定结果第126-127页
附录III CrNAC036及其他植物中NAC转录调控因子的蛋白序列比对第127-128页
附录IV 本实验所用部分引物第128-131页
附录V 博士期间发表的论文第131-132页
致谢第132-134页

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