缩略词表 | 第10-12页 |
摘要 | 第12-14页 |
Abstract | 第14-16页 |
第一章 文献综述 | 第17-27页 |
1. 猴头菇的研究进展 | 第18-21页 |
1.1 猴头菇 | 第18页 |
1.2 猴头菇的化学成分 | 第18-21页 |
1.2.1 猴头菇多糖的提取 | 第18-19页 |
1.2.2 猴头菇多糖的生物活性 | 第19-21页 |
2. 硒多糖的研究进展 | 第21-23页 |
2.1 硒的来源 | 第21页 |
2.2 硒多糖的生物活性 | 第21-23页 |
3. 树突状细胞 | 第23-25页 |
3.1 DCs的来源和特点 | 第23页 |
3.2 DCs的供体 | 第23-24页 |
3.3 DCs的信号通路 | 第24-25页 |
4. 本研究的目的及其意义 | 第25-27页 |
第二章 猴头菇多糖的提取与纯化 | 第27-34页 |
1 试验材料 | 第27-28页 |
1.1 材料 | 第27页 |
1.2 主要试剂及溶液配制 | 第27页 |
1.3 主要试验仪器 | 第27-28页 |
2 试验方法 | 第28-30页 |
2.1 猴头菇粗多糖的制备 | 第28页 |
2.2 纯化 | 第28-29页 |
2.2.1 除蛋白 | 第28页 |
2.2.2 多糖的纯化和回收 | 第28-29页 |
2.3 含量的测定 | 第29-30页 |
2.3.1 糖含量的测定 | 第29页 |
2.3.2 蛋白含量的测定 | 第29-30页 |
3 试验结果 | 第30-32页 |
3.1 猴头菇粗多糖的得率 | 第30页 |
3.2 葡萄糖标准曲线 | 第30页 |
3.3 蛋白质标准曲线 | 第30-31页 |
3.4 DEAE-52纤维柱纯化结果 | 第31-32页 |
3.5 Sephadex-G100柱层析纯化结果 | 第32页 |
3.6 各部分多糖的糖含量和蛋白质含量 | 第32页 |
4 讨论 | 第32-33页 |
5 小结 | 第33-34页 |
第三章 猴头菇多糖的硒化修饰 | 第34-44页 |
1 试验材料 | 第34-35页 |
1.1 材料 | 第34页 |
1.2 主要试剂及溶液配制 | 第34页 |
1.3 主要仪器 | 第34-35页 |
2 试验方法 | 第35-36页 |
2.1 HEP硒化修饰条件的选择 | 第35页 |
2.2 硒含量的测定 | 第35-36页 |
2.2.1 标准曲线的绘制 | 第35-36页 |
2.2.2 样品硒含量的测定 | 第36页 |
2.3 糖含量的测定 | 第36页 |
2.4 红外光谱 | 第36页 |
2.5 sHEP分子质量和主要多糖成分的测定 | 第36页 |
3 结果与分析 | 第36-41页 |
3.1 sHEP的得率、硒含量和糖含量 | 第36-37页 |
3.2 红外光谱分析 | 第37-39页 |
3.3 sHEP分子质量和主要多糖成分 | 第39-41页 |
4 讨论 | 第41-42页 |
5 小结 | 第42-44页 |
第四章 树突状细胞的体外培养和鉴定 | 第44-51页 |
1 材料 | 第44-45页 |
1.1 试验动物 | 第44页 |
1.2 主要试剂和溶液 | 第44页 |
1.3 主要仪器 | 第44-45页 |
2 试验方法 | 第45-46页 |
2.1 DCs的制备 | 第45页 |
2.2 DCs的诱导培养和形态学观察 | 第45页 |
2.3 流式细胞仪检测DCs的成熟度 | 第45-46页 |
2.4 数据分析 | 第46页 |
3 结果与分析 | 第46-49页 |
3.1 DCs的形态变化 | 第46-47页 |
3.2 树突状细胞成熟度的鉴定 | 第47-49页 |
4 讨论 | 第49-50页 |
5 小结 | 第50-51页 |
第五章 硒化猴头菇多糖对DCs表型及功能的影响 | 第51-72页 |
1 材料 | 第51-52页 |
1.1 试验动物 | 第51页 |
1.2 主要试剂和溶液 | 第51-52页 |
1.3 主要仪器 | 第52页 |
2 试验方法 | 第52-55页 |
2.1 对DCs前体细胞增殖的影响 | 第52页 |
2.2 对DCs刺激T淋巴细胞增殖的影响 | 第52-53页 |
2.2.1 刺激细胞的制备 | 第52页 |
2.2.2 反应细胞的制备 | 第52-53页 |
2.3 MTT法测定HEP和sHEP对DCs抗原提呈能力的影响 | 第53-54页 |
2.3.1 刺激细胞的制备 | 第53页 |
2.3.2 反应细胞的制备 | 第53-54页 |
2.4 ELISA法测定HEP和sHEP对DCs分泌IL-12和IFN-γ的影响 | 第54页 |
2.5 流式细胞仪测定HEP和sHEP对DCs吞噬功能的影响 | 第54-55页 |
2.6 流式细胞仪测定HEP和sHEP对DCs表面分子表达的影响 | 第55页 |
2.7 数据处理 | 第55页 |
3 结果与分析 | 第55-69页 |
3.1 HEP和sHEP对DCs前体细胞增殖的变化 | 第55-57页 |
3.2 HEP和sHEP对DCs刺激T淋巴细胞增殖影响 | 第57-58页 |
3.3 HEP和sHEP对DCs抗原提呈能力的影响 | 第58-60页 |
3.4 HEP和sHEP对DCs分泌细胞因子的影响 | 第60-63页 |
3.4.1 小鼠IFN-γ标准曲线 | 第60页 |
3.4.2 HEP和sHEP对刺激DCs分泌小鼠γ干扰素的影响 | 第60-61页 |
3.4.3 小鼠IL-12标准曲线 | 第61-62页 |
3.4.4 HEP和sHEP对DCs分泌IL-12的影响 | 第62-63页 |
3.5 HEP和sHEP对DCs吞噬功能的影响 | 第63-65页 |
3.6 HEP和sHEP对DCs表达MHc Ⅱ类分子的影响 | 第65-67页 |
3.7 HEP和sHEP对DCs表达CD86类分子的影响 | 第67-69页 |
4 讨论 | 第69-71页 |
5 小结 | 第71-72页 |
第六章 HEP和sHEP_2对DCs MAPK和NF-κB信号通路的影响 | 第72-82页 |
1 材料 | 第72-73页 |
1.1 试验动物 | 第72页 |
1.2 主要试剂和溶液 | 第72-73页 |
1.3 主要仪器 | 第73页 |
2 试验方法 | 第73-75页 |
2.1 Western Blot法检测HEP和sHEP_2对DCs的MAPK信号通路蛋白影响 | 第73-75页 |
2.1.1 细胞培养 | 第73页 |
2.1.2 蛋白质的提取 | 第73页 |
2.1.3 SDS-PAGE电泳 | 第73-74页 |
2.1.4 转膜 | 第74页 |
2.1.5 免疫反应 | 第74页 |
2.1.6 化学发光、显影 | 第74-75页 |
2.2 Western Blot法检测HEP和sHEP_2对DCs的NF-κB信号通路蛋白影响 | 第75页 |
3 结果 | 第75-78页 |
3.1 比较HEP和sHEP_2对DCs的MAPK信号通路蛋白影响 | 第75-76页 |
3.2 比较HEP和sHEP_2对DCs的 NF-κB信号通路蛋白影响 | 第76-78页 |
4 讨论 | 第78-81页 |
5 小结 | 第81-82页 |
全文结论 | 第82-83页 |
创新点 | 第83页 |
尚待深入的研究 | 第83-84页 |
参考文献 | 第84-94页 |
致谢 | 第94-95页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第95-96页 |
经费来源 | 第96页 |