| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 第1章 绪论 | 第9-20页 |
| 1.1 课题来源 | 第9页 |
| 1.2 课题背景及目的和意义 | 第9-10页 |
| 1.3 国内外研究现状及分析 | 第10-18页 |
| 1.3.1 人类YRDC的首次发现 | 第10页 |
| 1.3.2 YRDC同源基因在核糖体成熟功能研究现状 | 第10-13页 |
| 1.3.3 YRDC同源基因在tRNA修饰功能研究现状 | 第13-16页 |
| 1.3.4 YRDC是新的缺血/再灌注诱导蛋白 | 第16页 |
| 1.3.5 YRDC影响肿瘤发生的研究现状 | 第16-18页 |
| 1.4 主要研究内容 | 第18-19页 |
| 1.4.1 生物信息学分析YRDC肺癌中的表达特性 | 第18页 |
| 1.4.2 检测YRDC对肺癌细胞生物特性的影响 | 第18页 |
| 1.4.3 YRDC蛋白同源建模及互作网络预测 | 第18页 |
| 1.4.4 YRDC蛋白纯化及活性检测 | 第18-19页 |
| 1.5 技术路线 | 第19-20页 |
| 第2章 材料及方法 | 第20-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-23页 |
| 2.1.1 细胞系 | 第20页 |
| 2.1.2 载体及菌株 | 第20页 |
| 2.1.3 抗体 | 第20页 |
| 2.1.4 实验试剂及材料 | 第20页 |
| 2.1.5 试剂及配方 | 第20-22页 |
| 2.1.6 实验分析软件和网站 | 第22页 |
| 2.1.7 PCR扩增引物及RNAi片段序列 | 第22-23页 |
| 2.1.8 主要仪器设备 | 第23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-34页 |
| 2.2.1 重组体构建 | 第23-26页 |
| 2.2.2 细胞培养 | 第26页 |
| 2.2.3 细胞转染(质粒或siRNA) | 第26-27页 |
| 2.2.4 全细胞蛋白提取 | 第27页 |
| 2.2.5 全细胞RNA提取 | 第27-28页 |
| 2.2.6 逆转录合成cDNA | 第28页 |
| 2.2.7 实时定量PCR | 第28-29页 |
| 2.2.8 Western Blot免疫印迹杂交 | 第29-30页 |
| 2.2.9 蛋白诱导表达纯化 | 第30-31页 |
| 2.2.10 MTT细胞增殖实验 | 第31-32页 |
| 2.2.11 细胞周期检测 | 第32页 |
| 2.2.12 细胞侵袭和迁移实验 | 第32-33页 |
| 2.2.13 细胞克隆形成实验 | 第33-34页 |
| 2.3 统计学分析方法 | 第34-35页 |
| 第3章 YRDC在非小细胞肺癌中的表达 | 第35-47页 |
| 3.1 引言 | 第35页 |
| 3.2 YRDC在肺腺癌中的表达特征 | 第35-40页 |
| 3.2.1 肺腺癌中YRDC的整体表达情况 | 第36-37页 |
| 3.2.2 肺腺癌中YRDC癌症分期表达情况 | 第37页 |
| 3.2.3 肺腺癌中YRDC在性别中的表达情况 | 第37-38页 |
| 3.2.4 肺腺癌中YRDC在不同年龄的表达情况 | 第38-39页 |
| 3.2.5 肺腺癌中YRDC在不同吸烟习惯的表达 | 第39-40页 |
| 3.3 YRDC在肺鳞癌中的表达特征 | 第40-43页 |
| 3.3.1 肺鳞癌中YRDC的整体表达情况 | 第40-41页 |
| 3.3.2 肺鳞癌中YRDC在癌症分期的表达情况 | 第41页 |
| 3.3.3 肺鳞癌中YRDC在性别中的表达情况 | 第41-42页 |
| 3.3.4 肺鳞癌中YRDC在不同年龄中的表达情况 | 第42-43页 |
| 3.3.5 肺鳞癌中YRDC在吸烟习惯中的表达情况 | 第43页 |
| 3.4 YRDC在非小细胞肺癌细胞系中的表达 | 第43-44页 |
| 3.5 讨论 | 第44-46页 |
| 3.6 本章小结 | 第46-47页 |
| 第4章 YRDC影响非小细胞肺癌的主要功能研究 | 第47-65页 |
| 4.1 引言 | 第47页 |
| 4.2 YRDC的RNAi细胞株和过表达细胞株构建 | 第47-48页 |
| 4.2.1 YRDC的siRNA设计和RNAi细胞株构建 | 第47-48页 |
| 4.2.2 YRDC病毒过表达细胞株构建 | 第48页 |
| 4.3 YRDC影响非小细胞肺癌的增殖能力 | 第48-51页 |
| 4.3.1 YRDC影响细胞增殖能力 | 第48-49页 |
| 4.3.2 YRDC对细胞周期的影响 | 第49-51页 |
| 4.4 YRDC基因调节迁移运动 | 第51-53页 |
| 4.4.1 YRDC下调抑制迁移侵袭 | 第52-53页 |
| 4.4.2 YRDC过表达促进细胞迁移和侵袭 | 第53页 |
| 4.5 YRDC影响细胞集落形成能力 | 第53-55页 |
| 4.5.1 YRDC下调影响细胞集落形成 | 第54页 |
| 4.5.2 YRDC上调促进细胞的集落形成 | 第54-55页 |
| 4.6 YRDC影响非小细胞肺癌细胞的机制探索 | 第55-63页 |
| 4.6.1 YRDC蛋白同源序列分析及同源建模 | 第55-56页 |
| 4.6.2 生物信息学预测YRDC蛋白相互作用网络 | 第56-57页 |
| 4.6.3 YRDC相互作用蛋白表达趋势分析 | 第57-60页 |
| 4.6.4 构建YRDC原核表达载体 | 第60-63页 |
| 4.6.5 YRDC的ATP酶活性比较分析 | 第63页 |
| 4.7 讨论 | 第63-64页 |
| 4.8 本章小结 | 第64-65页 |
| 结论 | 第65-66页 |
| 展望 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
