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苎麻木质素合成相关基因BnC3H-1的克隆、表达分析及原核表达

摘要第4-5页
abstract第5页
第1章 前言第8-17页
    1.1 木质素及木质素的生物合成第8-13页
        1.1.1 木质素的结构与功能第8-9页
        1.1.2 木质素的生物合成第9-10页
        1.1.3 木质素生物合成的基因调控第10-11页
        1.1.4 苯丙烷次生代谢途径第11-12页
        1.1.5 苎麻木质素合成酶的研究进展第12-13页
    1.2 原核表达第13-15页
        1.2.1 pET原核表达系统第13-14页
        1.2.2 原核表达载体构建和重组蛋白纯化第14-15页
    1.3 本研究的目的、意义和主要内容第15-17页
第2章 BnC3H-1基因cDNA序列克隆和分析第17-41页
    2.1 实验材料、试剂与仪器第17页
    2.2 实验方法第17-31页
        2.2.1 苎麻茎秆总RNA的提取第17-18页
        2.2.2 逆转录合成cDNA第一链第18-19页
        2.2.3 苎麻木质素合成酶基因核心片段的克隆第19-25页
        2.2.4 RACE首链cDNA的合成第25-30页
        2.2.5 RACE引物设计第30页
        2.2.6 PCR扩增及目的基因片段的纯化回收第30-31页
    2.3 结果与分析第31-39页
        2.3.1 苎麻总RNA提取第31-32页
        2.3.2 BnC3H-1基因cDNA全长序列的克隆第32-33页
        2.3.3 BnC3H-1基因生物信息学分析第33-39页
    2.4 讨论第39-41页
第3章 苎麻BnC3H-1基因的表达特征分析第41-45页
    3.1 实验材料、试剂与仪器第41页
    3.2 方法第41-42页
        3.2.1 苎麻各组织RNA的提取第41页
        3.2.2 实时荧光定量PCR引物设计第41-42页
        3.2.3 第一链cDNA合成第42页
        3.2.4 实时荧光定量PCR第42页
    3.3 结果与分析第42-44页
        3.3.1 不同时期木质部和韧皮部RNA提取第42-43页
        3.3.2 BnC3H-1基因的组织表达差异分析第43-44页
    3.4 讨论第44-45页
第4章 原核表达载体构建及蛋白诱导表达第45-53页
    4.1 实验材料、试剂与仪器第45-46页
    4.2 实验方法第46-51页
        4.2.1 原核表达载体构建第46-49页
        4.2.2 蛋白诱导表达第49-50页
        4.2.3 蛋白纯化第50-51页
    4.3 结果分析第51-52页
    4.4 讨论第52-53页
第5章 结论与展望第53-54页
    5.1 论文结论第53页
    5.2 展望第53-54页
参考文献第54-59页
缩写表(Abbreviation)第59-60页
附录1:LB培养基的配置第60页
附录2:常用试剂的配置第60-61页
附录3:表达模式数据处理公式(2-~(△△CT))第61-62页
附录4:电泳缓冲液的配置第62页
附录5:SDS-PAGE凝胶配置第62-64页
致谢第64-65页
作者简介第65页

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