摘要 | 第4-5页 |
abstract | 第5页 |
第1章 前言 | 第8-17页 |
1.1 木质素及木质素的生物合成 | 第8-13页 |
1.1.1 木质素的结构与功能 | 第8-9页 |
1.1.2 木质素的生物合成 | 第9-10页 |
1.1.3 木质素生物合成的基因调控 | 第10-11页 |
1.1.4 苯丙烷次生代谢途径 | 第11-12页 |
1.1.5 苎麻木质素合成酶的研究进展 | 第12-13页 |
1.2 原核表达 | 第13-15页 |
1.2.1 pET原核表达系统 | 第13-14页 |
1.2.2 原核表达载体构建和重组蛋白纯化 | 第14-15页 |
1.3 本研究的目的、意义和主要内容 | 第15-17页 |
第2章 BnC3H-1基因cDNA序列克隆和分析 | 第17-41页 |
2.1 实验材料、试剂与仪器 | 第17页 |
2.2 实验方法 | 第17-31页 |
2.2.1 苎麻茎秆总RNA的提取 | 第17-18页 |
2.2.2 逆转录合成cDNA第一链 | 第18-19页 |
2.2.3 苎麻木质素合成酶基因核心片段的克隆 | 第19-25页 |
2.2.4 RACE首链cDNA的合成 | 第25-30页 |
2.2.5 RACE引物设计 | 第30页 |
2.2.6 PCR扩增及目的基因片段的纯化回收 | 第30-31页 |
2.3 结果与分析 | 第31-39页 |
2.3.1 苎麻总RNA提取 | 第31-32页 |
2.3.2 BnC3H-1基因cDNA全长序列的克隆 | 第32-33页 |
2.3.3 BnC3H-1基因生物信息学分析 | 第33-39页 |
2.4 讨论 | 第39-41页 |
第3章 苎麻BnC3H-1基因的表达特征分析 | 第41-45页 |
3.1 实验材料、试剂与仪器 | 第41页 |
3.2 方法 | 第41-42页 |
3.2.1 苎麻各组织RNA的提取 | 第41页 |
3.2.2 实时荧光定量PCR引物设计 | 第41-42页 |
3.2.3 第一链cDNA合成 | 第42页 |
3.2.4 实时荧光定量PCR | 第42页 |
3.3 结果与分析 | 第42-44页 |
3.3.1 不同时期木质部和韧皮部RNA提取 | 第42-43页 |
3.3.2 BnC3H-1基因的组织表达差异分析 | 第43-44页 |
3.4 讨论 | 第44-45页 |
第4章 原核表达载体构建及蛋白诱导表达 | 第45-53页 |
4.1 实验材料、试剂与仪器 | 第45-46页 |
4.2 实验方法 | 第46-51页 |
4.2.1 原核表达载体构建 | 第46-49页 |
4.2.2 蛋白诱导表达 | 第49-50页 |
4.2.3 蛋白纯化 | 第50-51页 |
4.3 结果分析 | 第51-52页 |
4.4 讨论 | 第52-53页 |
第5章 结论与展望 | 第53-54页 |
5.1 论文结论 | 第53页 |
5.2 展望 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-59页 |
缩写表(Abbreviation) | 第59-60页 |
附录1:LB培养基的配置 | 第60页 |
附录2:常用试剂的配置 | 第60-61页 |
附录3:表达模式数据处理公式(2-~(△△CT)) | 第61-62页 |
附录4:电泳缓冲液的配置 | 第62页 |
附录5:SDS-PAGE凝胶配置 | 第62-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
作者简介 | 第65页 |