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Fosmid文库组装食蟹猴MHC基因组的初步探究

摘要第5-6页
Abstract第6-7页
第一章 绪论第13-28页
    1.1 食蟹猴生物学研究现状第13-14页
    1.2 大片段文库发展第14-18页
        1.2.1 噬菌体文库第14-15页
        1.2.2. cosmid文库第15页
        1.2.3 Fosmid文库第15-16页
        1.2.4 BAC文库第16-17页
        1.2.5 YAC文库第17页
        1.2.6 人工染色体HAC第17页
        1.2.7 BIBAC和TAC第17-18页
    1.3 大片段文库应用概述第18-20页
        1.3.1 测序第18页
        1.3.2 遗传和物理图谱构建第18-19页
        1.3.3 图位克隆第19-20页
        1.3.4 染色体定位第20页
    1.4 MHC研究概况第20-25页
        1.4.1 MHC结构及功能第21页
        1.4.2 MHC及其适应性进化第21-23页
            1.4.2.1 MHC的保守和分化第21-22页
            1.4.2.2 MHC多态性与维持机制第22-23页
        1.4.3 MHC目前研究进展第23页
        1.4.4 灵长类动物MHC研究概况第23-25页
    1.5 技术路线,研究内容以及意义,创新点第25-28页
        1.5.1 技术路线第25-26页
        1.5.2 研究意义第26-27页
        1.5.3 创新点第27-28页
第二章 食蟹猴基因组Fosmid文库构建第28-39页
    2.1 引言第28-29页
    2.2 材料第29-32页
        2.2.1 样品来源第29页
        2.2.2 Fosmid载体和E.coli菌株第29页
        2.2.3 主要仪器设备第29-30页
        2.2.4 主要试剂及耗材第30-32页
            2.2.4.1 试剂第30-31页
            2.2.4.2 耗材第31-32页
    2.3 方法与步骤第32-36页
        2.3.1 基因组DNA制备第32-33页
        2.3.2 DNA样品检测第33页
        2.3.3 DNA样品处理第33-34页
            2.3.3.1 DNA片段化第33-34页
            2.3.3.2 末端补平第34页
        2.3.4 连接第34-35页
        2.3.5 包装Fosmid克隆第35页
        2.3.6 转入感受态第35-36页
        2.3.7 克隆的pooling第36页
    2.4 结果与讨论第36-38页
        2.4.1 高质量DNA的获取第36-37页
        2.4.2 打断后回收片段胶图第37页
        2.4.4 酶切电泳结果第37-38页
    2.5 本章小结第38-39页
第三章 食蟹猴MHC Fosmid克隆重叠群的筛选第39-51页
    3.1 引言第39页
    3.2 材料第39-40页
        3.2.1 材料第39-40页
        3.2.2 重组引物和筛选引物设计第40页
        3.2.3 主要实验仪器设备第40页
        3.2.4 主要实验试剂及耗材第40页
    3.3 方法与步骤第40-45页
        3.3.1 食蟹猴MHC特异性引物获得第40-41页
        3.3.2 对pooling进行低深度测序第41页
        3.3.3 重组片段的获取第41-42页
        3.3.4 目标克隆同源重组第42-43页
        3.3.5 食蟹猴MHC阳性Fosmid克隆的筛选第43-44页
        3.3.6 测序第44-45页
    3.4 结果第45-49页
        3.4.1 引物第45页
        3.4.2 重组片段胶图第45-46页
        3.4.3 阳性Fosmid克隆胶图第46-47页
        3.4.4 测序结果分析第47-49页
    3.5 本章小结第49-51页
第四章 食蟹猴MHC-I区域contig分布密集基因组组装第51-64页
    4.1 引言第51-52页
    4.2 方法与步骤第52-53页
        4.2.1 材料第52页
        4.2.2 克隆定位第52-53页
        4.2.3 组装方法步骤第53页
    4.3 结果与讨论第53-62页
        4.3.1 大片段测序克隆第54-55页
        4.3.2 过滤结果第55页
        4.3.3 组装第55-57页
        4.3.4 重叠群分析第57-62页
    4.4 本章小结第62-64页
结论与展望第64-65页
参考文献第65-72页
附录第72-92页
攻读硕士学位期间研究成果第92-93页
致谢第93-94页
附件第94页

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