| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4页 |
| 目录 | 第5-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-20页 |
| 1.1 类胡萝卜素与植物抗逆 | 第8-12页 |
| 1.1.1 类胡萝卜素的结构与生物学功能 | 第8-9页 |
| 1.1.2 类胡萝卜素生物合成途径 | 第9-12页 |
| 1.1.3 PSY 基因的耐盐机理 | 第12页 |
| 1.2 茉莉酸类物质研究进展 | 第12-18页 |
| 1.2.1 植物次生代谢 | 第12-13页 |
| 1.2.2 茉莉酸类物质研究进展 | 第13-14页 |
| 1.2.3 茉莉酸生物合成途径 | 第14页 |
| 1.2.4 茉莉酸生物合成途径的关键酶 | 第14-18页 |
| 1.3 洋桔梗简介 | 第18-19页 |
| 1.4 本研究的目的意义 研究内容 | 第19-20页 |
| 1.4.1 研究目的意义 | 第19页 |
| 1.4.2 研究内容 | 第19-20页 |
| 第二章 转 LcPSY 洋桔梗获得过程及分子检测 | 第20-36页 |
| 2.1 植物材料 | 第20-22页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第20页 |
| 2.1.2 质粒和农杆菌菌株 | 第20页 |
| 2.1.3 主要实验仪器 | 第20-21页 |
| 2.1.4 主要实验试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.5 实验所用培养基 | 第22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-28页 |
| 2.2.1 外植体的制备 | 第22-23页 |
| 2.2.2 次氯酸钠灭菌时间的优化 | 第23页 |
| 2.2.3 筛选培养基中卡纳霉素浓度的探究 | 第23页 |
| 2.2.4 农杆菌侵染液的制备 | 第23页 |
| 2.2.5 洋桔梗叶盘的侵染及转化 | 第23页 |
| 2.2.6 叶盘与农杆菌的共培养 | 第23-24页 |
| 2.2.7 转化细胞系的筛选 | 第24页 |
| 2.2.8 抗性不定芽的 PCR 验证 | 第24-25页 |
| 2.2.9 生根培养基的优化 | 第25页 |
| 2.2.10 非转基因洋桔梗的获得 | 第25-26页 |
| 2.2.11 不定芽的生根与移栽 | 第26页 |
| 2.2.12 洋桔梗种子的收获及 T1 代转基因苗的选育 | 第26-27页 |
| 2.2.13 T1 代转基因洋桔梗苗的分子检测 | 第27-28页 |
| 2.3 结果与分析 | 第28-34页 |
| 2.3.1 筛选培养基中卡纳霉素浓度的探索 | 第28-29页 |
| 2.3.2 次氯酸钠灭菌时间 | 第29页 |
| 2.3.3 生根培养基中 NAA 的优化结果 | 第29-30页 |
| 2.3.4 转基因洋桔梗的获得 | 第30-31页 |
| 2.3.5 T1 代洋桔梗植株的分子检测 | 第31-34页 |
| 2.4 讨论 | 第34-35页 |
| 2.5 小结 | 第35-36页 |
| 第三章 外源 LcPSY 基因对洋桔梗耐盐性影响 | 第36-44页 |
| 3.1 实验试剂及材料 | 第36-37页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第36页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第36页 |
| 3.1.3 实验试剂 | 第36-37页 |
| 3.2 实验方法 | 第37-38页 |
| 3.2.1 总类胡萝卜素的提取及检测 | 第37页 |
| 3.2.2 盐胁迫 | 第37页 |
| 3.2.3 叶绿素的荧光动力学研究和净光合速率测定 | 第37-38页 |
| 3.2.4 MDA 的测定 | 第38页 |
| 3.2.5 SOD，POD，CAT 酶活测定 | 第38页 |
| 3.3 结果与分析 | 第38-41页 |
| 3.3.1 总类胡萝卜素的提取及检测 | 第38-39页 |
| 3.3.2 盐胁迫后生理生化指标的测定结果 | 第39-40页 |
| 3.3.3 叶绿素荧光参数(F_v/F_m)的测定 | 第40-41页 |
| 3.3.4 Pn 的测定 | 第41页 |
| 3.4 讨论 | 第41-42页 |
| 3.5 小结 | 第42-44页 |
| 第四章 LcAOC 基因的克隆及表达分析 | 第44-59页 |
| 4.1 实验材料与设备 | 第44-45页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第44页 |
| 4.1.2 质粒和菌株 | 第44页 |
| 4.1.3 设备和仪器 | 第44页 |
| 4.1.4 实验所用培养基 | 第44页 |
| 4.1.5 实验所用主要试剂 | 第44-45页 |
| 4.2 实验方法 | 第45-51页 |
| 4.2.1 基本的实验操作 | 第45-46页 |
| 4.2.2 枸杞叶片总 RNA 的提取和 cDNA 的合成 | 第46-47页 |
| 4.2.3 LcAOC 基因 3'端的克隆 | 第47-48页 |
| 4.2.4 LcAOC 基因的获得 | 第48-49页 |
| 4.2.5 生物信息学分析 | 第49-50页 |
| 4.2.6 枸杞的非生物胁迫 | 第50页 |
| 4.2.7 组织差异表达 | 第50页 |
| 4.2.8 RT-qPCR | 第50-51页 |
| 4.3 结果及分析 | 第51-57页 |
| 4.3.1 枸杞总 RNA 提取 | 第51页 |
| 4.3.2 LcAOC 基因全长的获得 | 第51页 |
| 4.3.3 推导的组成 LcAOC 的氨基酸序列的性质分析 | 第51-53页 |
| 4.3.4 跨膜结构域的预测 | 第53页 |
| 4.3.5 LcAOC 氨基酸序列的疏水性分析 | 第53-54页 |
| 4.3.6 多序列比对结果 | 第54页 |
| 4.3.7 亲缘关系的分析 | 第54页 |
| 4.3.8 组织差异表达 | 第54页 |
| 4.3.9 LcAOC 基因的非生物响应 | 第54-57页 |
| 4.4 讨论 | 第57页 |
| 4.5 小结 | 第57-59页 |
| 第五章 结论与展望 | 第59-62页 |
| 5.1 研究总结 | 第59-60页 |
| 5.2 创新点 | 第60页 |
| 5.3 展望 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-69页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
