| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 缩略词中英文对照表 | 第11-12页 |
| 第一章 脂肪干细胞在组织工程领域中的研究进展(文献综述) | 第12-20页 |
| 1 ADSCs的生物学特征 | 第12-13页 |
| 1.1 ADSCs的形态 | 第12-13页 |
| 1.2 ADSCs的免疫表型及多向分化潜能 | 第13页 |
| 2 ADSCs在组织工程中的应用进展 | 第13-17页 |
| 2.1 ADSCs在皮肤创伤愈合过程中的应用 | 第13-14页 |
| 2.2 ADSCs在骨组织工程中的应用 | 第14-15页 |
| 2.3 ADSCs在神经组织工程中的应用 | 第15-16页 |
| 2.4 ADSCs在肝脏疾病治疗中的应用 | 第16-17页 |
| 2.5 ADSCs在其他方面的应用 | 第17页 |
| 3 ADSCs的临床应用 | 第17-19页 |
| 4 问题及展望 | 第19-20页 |
| 第二章 hADSCs过表达hTβ4细胞系的制备及其鉴定 | 第20-46页 |
| 1 引言 | 第20-21页 |
| 2 实验材料与溶液配制 | 第21-24页 |
| 2.1 实验材料 | 第21页 |
| 2.2 主要仪器与设备 | 第21-22页 |
| 2.3 主要实验试剂和耗材 | 第22-23页 |
| 2.4 实验材料 | 第23-24页 |
| 3 实验方法 | 第24-37页 |
| 3.1 hADSCs的培养 | 第24-27页 |
| 3.1.1 hADSCs的分离及原代培养 | 第24-25页 |
| 3.1.2 hADSCs传代 | 第25-26页 |
| 3.1.3 hADSCs的冻存 | 第26页 |
| 3.1.4 hADSCs的复苏 | 第26-27页 |
| 3.2 细胞计数 | 第27页 |
| 3.3 hADSCs的鉴定 | 第27-29页 |
| 3.3.1 细胞形态学观察 | 第27页 |
| 3.3.2 MTS法检测hADSCs的增殖能力 | 第27-28页 |
| 3.3.3 免疫荧光染色检测hADSCs表面标记蛋白 | 第28页 |
| 3.3.4 hADSCs多向分化能力检测 | 第28-29页 |
| 3.4 转染hTβ4的hADSCs的制备 | 第29-32页 |
| 3.4.1 大肠杆菌感受态转化 | 第29-30页 |
| 3.4.2 去内毒素质粒大量提取 | 第30-31页 |
| 3.4.3 脂质体转染法 | 第31-32页 |
| 3.4.4 Lonza电转法 | 第32页 |
| 3.5 hTβ4-hADSCs与hADSCsRNA提取 | 第32-33页 |
| 3.6 RNA反转录为cDNA | 第33-35页 |
| 3.7 细胞蛋白提取 | 第35-36页 |
| 3.8 WesternBlot | 第36-37页 |
| 3.8.1 制胶 | 第36页 |
| 3.8.2 上样跑胶 | 第36页 |
| 3.8.3 转膜及检测 | 第36-37页 |
| 4 实验结果 | 第37-44页 |
| 4.1 hADSCs的培养 | 第37-38页 |
| 4.2 hADSCs增殖能力的检测 | 第38-39页 |
| 4.3 hADSCs的表面标志蛋白检测 | 第39-40页 |
| 4.4 hADSCs多向分化能力检测 | 第40-41页 |
| 4.5 转染pEX4-hTβ4质粒载体于hADSCs中 | 第41-43页 |
| 4.5.1 脂质体转染法将hTβ4基因转入hADSCs中 | 第41-42页 |
| 4.5.2 电转染法将hTβ4基因转入hADSCs中 | 第42-43页 |
| 4.6 hADSCs转染hTβ4鉴定 | 第43页 |
| 4.7 转染hTβ4基因的hADSCsWesternBlot检测 | 第43-44页 |
| 5 讨论 | 第44-46页 |
| 第三章 转染hTβ4的hADSCs复合羊ADM对创面愈合影响的鉴定 | 第46-66页 |
| 1 引言 | 第46页 |
| 2 实验材料与溶液配制 | 第46-48页 |
| 2.1 实验材料 | 第46-47页 |
| 2.2 主要仪器与设备 | 第47页 |
| 2.3 主要实验试剂和耗材 | 第47-48页 |
| 3 实验方法 | 第48-52页 |
| 3.1 羊ADM制备 | 第48页 |
| 3.2 羊ADM细胞毒性的检测 | 第48-49页 |
| 3.3 羊ADM分别与hADSCs和hTβ4-hADSCs复合 | 第49页 |
| 3.4 裸小鼠植皮实验 | 第49-50页 |
| 3.5 裸小鼠创面组织提取 | 第50-52页 |
| 3.5.1 裸小鼠创面组织RNA提取 | 第50-51页 |
| 3.5.2 裸小鼠创面组织HE染色 | 第51-52页 |
| 3.6 组织蛋白提取 | 第52页 |
| 4 结果 | 第52-64页 |
| 4.1 羊ADM制备 | 第52-53页 |
| 4.2 羊ADM细胞毒性的检测 | 第53-54页 |
| 4.3 羊ADM分别与hADSCs和hTβ4-hADSCs复合 | 第54-55页 |
| 4.4 裸小鼠植皮实验 | 第55-57页 |
| 4.5 创面愈合率计算 | 第57-58页 |
| 4.6 裸小鼠创面组织HE染色及新生血管组织观察 | 第58-60页 |
| 4.7 裸小鼠创面愈合相关基因检测 | 第60-63页 |
| 4.8 裸小鼠创面愈合相关蛋白检测 | 第63-64页 |
| 5 讨论 | 第64-66页 |
| 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-73页 |
| 致谢 | 第73-75页 |
