| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第1章 绪论 | 第11-24页 |
| 1.1 关节软骨组织 | 第11-12页 |
| 1.2 关节软骨损伤的临床治疗 | 第12-13页 |
| 1.3 软骨组织工程 | 第13-17页 |
| 1.3.1 生物支架材料 | 第14-15页 |
| 1.3.2 种子细胞 | 第15-17页 |
| 1.3.2.1 软骨细胞 | 第15页 |
| 1.3.2.2 干细胞 | 第15-17页 |
| 1.4 培养方式对软骨细胞表型的影响 | 第17-18页 |
| 1.5 MSCs成软骨诱导分化的研究 | 第18-20页 |
| 1.6 共培养在软骨组织工程中的应用 | 第20-22页 |
| 1.6.1 共培养 | 第20-21页 |
| 1.6.2 基于共培养诱导MSCs成软骨分化 | 第21-22页 |
| 1.7 研究内容、目的和意义 | 第22-24页 |
| 第2章 海藻酸凝胶中MSCs与软骨细胞间接共培养成软骨分化研究 | 第24-49页 |
| 2.1 前言 | 第24-25页 |
| 2.2 材料与方法 | 第25-33页 |
| 2.2.1 主要实验试剂及来源 | 第25页 |
| 2.2.2 细胞分离和培养 | 第25-26页 |
| 2.2.3 细胞包埋 | 第26-27页 |
| 2.2.4 共培养实验设计 | 第27页 |
| 2.2.5 死活染色 | 第27-28页 |
| 2.2.6 MTT测定 | 第28页 |
| 2.2.7 DNA、GAG定量检测 | 第28-29页 |
| 2.2.8 冷冻切片和石蜡切片制备 | 第29页 |
| 2.2.9 H&E染色 | 第29-30页 |
| 2.2.10 番红-O染色 | 第30页 |
| 2.2.11 天狼猩红染色 | 第30页 |
| 2.2.12 免疫组化染色 | 第30页 |
| 2.2.13 扫描电子显微镜 | 第30页 |
| 2.2.14 RT-PCR | 第30-32页 |
| 2.2.15 统计学分析 | 第32-33页 |
| 2.3 结果 | 第33-46页 |
| 2.3.1 rMSCs在海藻酸钠凝胶微球中的生长状况 | 第33-35页 |
| 2.3.1.1 死活染色 | 第33页 |
| 2.3.1.2 MTT检测和DNA含量 | 第33-34页 |
| 2.3.1.3 组织学分析 | 第34-35页 |
| 2.3.1.4 SEM观察 | 第35页 |
| 2.3.2 rACs在海藻酸钠水凝胶微球中的生长状况 | 第35-39页 |
| 2.3.2.1 死活染色 | 第35-36页 |
| 2.3.2.2 MTT检测以及DNA和GAG含量 | 第36-37页 |
| 2.3.2.3 组织学分析 | 第37-38页 |
| 2.3.2.4 SEM观察 | 第38-39页 |
| 2.3.3 在共培养中rMSCs的成软骨分化 | 第39-46页 |
| 2.3.3.1 rMSCs凝胶微球的死活染色 | 第39-40页 |
| 2.3.3.2 MTT、DNA和GAG检测 | 第40-41页 |
| 2.3.3.3 组织学分析 | 第41-44页 |
| 2.3.3.4 rMSCs的基因表达分析 | 第44-46页 |
| 2.4 讨论 | 第46-47页 |
| 2.5 结论 | 第47-49页 |
| 第3章 培养方式对软骨细胞在海藻酸凝胶微球中表型的影响 | 第49-59页 |
| 3.1 前言 | 第49-50页 |
| 3.2 材料和方法 | 第50-51页 |
| 3.2.1 rACs分离与培养 | 第50页 |
| 3.2.2 基于微载体培养rACs | 第50页 |
| 3.2.3 软骨聚团制备 | 第50页 |
| 3.2.4 海藻酸凝胶微球包埋 | 第50-51页 |
| 3.2.5 死活染色 | 第51页 |
| 3.2.6 MTT检测 | 第51页 |
| 3.2.7 DNA和GAG定量测定 | 第51页 |
| 3.2.8 石蜡切片制备 | 第51页 |
| 3.2.9 H&E染色 | 第51页 |
| 3.2.10 番红-O染色 | 第51页 |
| 3.2.11 免疫荧光染色 | 第51页 |
| 3.3 结果 | 第51-57页 |
| 3.3.1 基于微载体的rACs转瓶培养 | 第51-52页 |
| 3.3.2 rACs聚团的制备 | 第52-53页 |
| 3.3.3 海藻酸凝胶微球中rACs的死活染色 | 第53-54页 |
| 3.3.4 海藻酸凝胶微球中rACs的MTT、DNA和GAG检测 | 第54-56页 |
| 3.3.5 组织学分析 | 第56-57页 |
| 3.4 讨论 | 第57-58页 |
| 3.5 本章小结 | 第58-59页 |
| 第4章 MSCs在氧化处理的海藻酸凝胶微球中成软骨分化研究 | 第59-71页 |
| 4.1 概述 | 第59-60页 |
| 4.2 材料与方法 | 第60-62页 |
| 4.2.1 氧化处理海藻酸钠 | 第60页 |
| 4.2.2 傅里叶红外光谱(FTIR) | 第60页 |
| 4.2.3 溶胀曲线 | 第60-61页 |
| 4.2.4 降解曲线 | 第61页 |
| 4.2.5 细胞包埋 | 第61页 |
| 4.2.6 死活染色 | 第61页 |
| 4.2.7 MTT检测 | 第61页 |
| 4.2.8 DNA、GAG含量测定 | 第61页 |
| 4.2.9 H&E染色 | 第61-62页 |
| 4.2.10 番红-O染色 | 第62页 |
| 4.2.11 统计学分析 | 第62页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第62-68页 |
| 4.3.1 氧化海藻酸的红外表征结果 | 第62页 |
| 4.3.2 海藻酸凝胶微球的溶胀和降解行为 | 第62-64页 |
| 4.3.3 海藻酸凝胶微球的微观结构 | 第64-65页 |
| 4.3.4 rMSCs在海藻酸凝胶微球中的活性 | 第65-66页 |
| 4.3.5 MTT、DNA和GAG检测 | 第66-68页 |
| 4.3.6 组织学染色 | 第68页 |
| 4.4 讨论 | 第68-70页 |
| 4.5 本章小结 | 第70-71页 |
| 第5章 全文总结和展望 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
