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超高分辨率荧光显微镜中单分子识别和定位算法及抗漂移方法

摘要第3-4页
ABSTRACT第4页
1 绪论第8-14页
    1.1 引言第8-11页
    1.2 研究现状及意义第11页
    1.3 本课题的研究目标第11页
    1.4 本文需要解决的关键问题第11-12页
    1.5 论文的内容安排第12-14页
2 超高分辨率光学显微镜第14-32页
    2.1 远场光学显微镜分辨率极限第14-15页
    2.2 隐失波探测成像第15-17页
        2.2.1 近场扫描光学显微镜第15-16页
        2.2.2 光学超结构透镜成像第16-17页
    2.3 远场增强分辨率光学显微镜第17-21页
        2.3.1 激光扫描共聚焦显微镜及双光子激发第17-19页
        2.3.2 4Pi 和 I5M 显微镜第19-20页
        2.3.3 SIM 显微镜第20-21页
    2.4 远场超高分辨率 RESOLFT 显微镜第21-25页
        2.4.1 STED/CW-STED第21-23页
        2.4.2 GSD第23-24页
        2.4.3 SSIM/SPEM第24-25页
    2.5 远场超高分辨率定位显微镜第25-27页
        2.5.1 (f)PALM 和(d)STORM第25-26页
        2.5.2 其他远场超高分辨率定位显微镜第26-27页
    2.6 三维(f)PALM 和(d)STORM 成像第27-30页
    2.7 (d)STORM 和(f)PALM 图像重建现状第30-32页
3 (f)PALM 和(d)STORM 成像系统搭建第32-42页
    3.1 (f)PALM 和(d)STORM 硬件系统搭建第32-38页
        3.1.1 光学系统设计第32页
        3.1.2 激光光源第32-34页
        3.1.3 激光控制第34-35页
        3.1.4 宽场照明/全内反射照明自由切换第35页
        3.1.5 显微镜系统第35-36页
        3.1.6 荧光激光与 EMCCD 曝光同步控制第36-37页
        3.1.7 信号采集第37-38页
    3.2 f(PALM)和(d)STORM 软件系统搭建第38-42页
4 单分子定位荧光显微镜及定位算法理论第42-50页
    4.1 远场光学显微镜点扩散函数第42页
    4.2 高斯近似第42-43页
    4.3 EMCCD第43-45页
        4.3.1 EMCCD 噪声第44页
        4.3.2 光电子数估计第44-45页
    4.4 单分子理论定位精度第45-46页
    4.5 基于 CUDA 的 Levenberg-Marquardt 非线性最小二乘拟合第46-50页
5 超高分辨率图像重建算法 SNSMIL第50-72页
    5.1 Rose 判据和单分子闪烁质量第50页
    5.2 SNSMIL 算法步骤第50-55页
        5.2.1 第 1 步:强度转为光电子数第51-52页
        5.2.2 第 2 步:查找局域最大点第52页
        5.2.3 第 3 步:剔除太近的局域最大点第52页
        5.2.4 第 4 步:高斯平滑第52-53页
        5.2.5 第 5 步:估计局域背景,CNR,质量第53页
        5.2.6 第 6 步:通过 Rose 判据和质量Q识别单分子信号第53页
        5.2.7 第 7 步:Levenberg-Marquardt 非线性拟合及筛选第53-54页
        5.2.8 第 8 步:渲染重建第54-55页
    5.3 SNSMIL 与其他算法比较第55-60页
        5.3.1 模拟第55-56页
        5.3.2 比较第56-60页
    5.4 SNSMIL 参数对识别精度和定位精度的影响第60-64页
    5.5 实验结果第64-70页
    5.6 SNSMIL 实时分析能力第70-72页
6 样本漂移修正第72-84页
    6.1 引言第72页
    6.2 二维样品漂移修正第72-84页
        6.2.1 光路设计第72-73页
        6.2.2 理论模型第73-74页
        6.2.3 漂移步长为正态分布的模拟结果第74-76页
        6.2.4 漂移步长为均匀分布的模拟结果第76-78页
        6.2.5 线性漂移的模拟结果第78-80页
        6.2.6 dSTORM 实验第80-81页
        6.2.7 实验结果第81-84页
7 总结与展望第84-86页
    7.1 全篇总结第84页
    7.2 正在进行的及后续研究工作的展望第84-86页
        7.2.1 自动单分子荧光事件识别第84-85页
        7.2.2 三维样品漂移修正第85页
        7.2.3 基于超级振荡透镜的超高分辨率扫描光学显微镜第85页
        7.2.4 基于 Airy 光束的超高分辨率光学显微镜第85-86页
致谢第86-88页
参考文献第88-96页
附录第96-110页
    A 作者在攻读博士学位期间发表和拟发表论文目录第96页
    B 作者在攻读博士学位期间参加的科研项目第96页
    C 单分子定位精度推导过程第96-100页
    D 单分子识别定位软件参数设置第100-109页
    E SNSMIL 软件使用第109-110页

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