| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 引言 | 第10-28页 |
| 一、 前列腺癌与全反式维甲酸（ATRA） | 第10-14页 |
| （一） 前列腺癌的发病原因及机制 | 第10-11页 |
| （二） 维甲酸（RA）与 ATRA | 第11-13页 |
| （三） ATRA 与前列腺癌 | 第13-14页 |
| 二、 HOX 基因家族简介 | 第14-18页 |
| （一） HOX 基因概述 | 第14-16页 |
| （二） HOX 基因的生物功能 | 第16-17页 |
| （三） HOXB13 及其与前列腺癌的关系研究 | 第17-18页 |
| 三、 真核生物基因表达与表观遗传调控 | 第18-26页 |
| （一） 真核生物中的染色质结构及其功能 | 第18-20页 |
| （二） 组蛋白甲基化与真核生物基因的表达沉默 | 第20-24页 |
| （三） DNA 的甲基化修饰与真核生物基因表达沉默 | 第24-26页 |
| 五、 本论文研究的内容和意义 | 第26-28页 |
| （一） 立题依据 | 第26页 |
| （二） 研究内容及意义 | 第26-28页 |
| 实验材料与方法 | 第28-33页 |
| 一、 实验材料 | 第28-29页 |
| （一） 质粒构建 | 第28页 |
| （二） 抗体信息 | 第28页 |
| （三） 细胞的培养与试剂信息 | 第28-29页 |
| 二、 实验方法 | 第29-33页 |
| I. 细胞生物学实验方法 | 第29-30页 |
| （一） 哺乳动物细胞的培养 | 第29页 |
| （二） 哺乳动物细胞的瞬时转染与双荧光素酶报告基因检测 | 第29页 |
| （三） MTT 法检测细胞的增殖活性 | 第29-30页 |
| II. 分子生物学实验方法 | 第30-32页 |
| （一） 分子克隆与质粒制备 | 第30页 |
| （二） 核酸与蛋白电泳技术 | 第30页 |
| （三） 动物细胞总 RNA 的提取与逆转录 | 第30-31页 |
| （四） RT-PCR 与 Real-time PCR | 第31页 |
| （五） 动物细胞全基因组提取与亚硫酸氢钠测序（Bisulfite genomic sequencing） | 第31页 |
| （六） 染色质免疫沉淀（ChIP）实验 | 第31-32页 |
| （七） Western Blot 检测与免疫共沉淀（CoIP）实验 | 第32页 |
| III. 统计分析 | 第32-33页 |
| 实验结果与分析 | 第33-50页 |
| 一、 甲基化修饰参与了前列腺癌细胞 DU145 中 HOXB13 基因的沉默 | 第33-41页 |
| （一） EZH2 通过影响 HOXB13 基因启动子上 H3K27me3的水平调控基因的表达 | 第33-36页 |
| （二） DNA 甲基化参与了 DU145 细胞中 HOXB13 基因表达的沉默 | 第36-39页 |
| （三） EZH2 能够与 DNMT3b 结合并且招募其到 HOXB13 基因启动子上 | 第39-41页 |
| 二、 HOXB13 参与 ATRA 介导的前列腺癌细胞 DU145 增殖停滞 | 第41-45页 |
| （一） ATRA 能够抑制 DU145 细胞的增殖并激活 HOXB13 基因的表达 | 第41-43页 |
| （二） ATRA 抑制前列腺癌细胞增殖要依赖于细胞内 HOXB13 基因的表达 | 第43-45页 |
| 三、 ATRA 上调前列腺癌细胞 DU145 中 HOXB13 基因表达及机制 | 第45-47页 |
| （一） ATRA 能够抑制 EZH2 对 HOXB13 基因介导的 H3K27me3修饰 | 第45页 |
| （二） ATRA 能够抑制 DNMT3b 对 HOXB13 基因的 DNA 甲基化修饰 | 第45-47页 |
| 四、 ATRA 与 5-aza-dC 协同抑制前列腺癌细胞 DU145 的增殖及机制 | 第47-50页 |
| （一） ATRA 与 5-aza-dC 协同抑制前列腺癌细胞 DU145 的增殖 | 第47页 |
| （二） ATRA 与 5-aza-dC 协同促进前列腺癌细胞 DU145 中 HOXB13 基因的表达 | 第47-50页 |
| 讨论 | 第50-54页 |
| 一、 HOXB13 与癌症的关系 | 第50页 |
| 二、 高恶性前列腺癌细胞中 HOXB13 基因沉默的分子机制 | 第50-51页 |
| 三、 ATRA 抑制前列腺癌细胞增殖的机制研究 | 第51-52页 |
| 四、 ATRA 与表观调控药物在抗肿瘤中的协同作用 | 第52-54页 |
| 主要结论和创新点 | 第54-55页 |
| 一、 主要结论 | 第54页 |
| 二、 主要创新点 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-72页 |
| 附录 | 第72-76页 |
| 作者简历 | 第76-78页 |
| 致谢 | 第78-80页 |
| 在学期间公开发表论文及著作情况 | 第80页 |
