| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-24页 |
| 1.1 引言 | 第13页 |
| 1.2 ABA 的研究进展 | 第13-17页 |
| 1.2.1 ABA 在植物中的生物学功能及作用机制 | 第13-14页 |
| 1.2.2 ABA 信号转导调控机理的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.2.3 ABA 调节植物的抗逆性 | 第15-17页 |
| 1.3 蛋白激酶 OST1/SnRK2.6 的功能研究 | 第17-20页 |
| 1.3.1 SnRK 家族 | 第17-18页 |
| 1.3.2 SnRK2 的结构特点 | 第18页 |
| 1.3.3 蛋白激酶 OST1/SnRK2.6 的功能研究 | 第18-20页 |
| 1.4 甘蓝、白菜、油菜等芸薹属植物中 ABA 反应的研究进展 | 第20-22页 |
| 1.4.1 甘蓝、白菜、油菜的重要地位 | 第20页 |
| 1.4.2 甘蓝、白菜、甘蓝型油菜等芸薹属植物的进化亲缘关系—禹氏三角 | 第20-21页 |
| 1.4.3 甘蓝、白菜、甘蓝型油菜等芸薹属植物 ABA 反应研究进展 | 第21-22页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第22-24页 |
| 第二章 甘蓝 BolOST1 基因的克隆与序列分析 | 第24-31页 |
| 2.1 材料与方法 | 第24-26页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第24页 |
| 2.1.1.1 植物材料 | 第24页 |
| 2.1.1.2 主要试剂 | 第24页 |
| 2.1.2 试验方法 | 第24-26页 |
| 2.1.2.1 甘蓝总 RNA 的提取 | 第24页 |
| 2.1.2.2 cDNA 的合成 | 第24-25页 |
| 2.1.2.3 BolOST1 基因的克隆 | 第25页 |
| 2.1.2.4 序列分析 | 第25-26页 |
| 2.2 结果与分析 | 第26-29页 |
| 2.2.1 BolOST1 基因克隆和测序分析 | 第26页 |
| 2.2.2 BolOST1 结构特征预测分析 | 第26-27页 |
| 2.2.3 BolOST1 蛋白进化树和进化关系比较分析 | 第27-29页 |
| 2.3 讨论与结论 | 第29-31页 |
| 第三章 BolOST1 基因组织表达谱与逆境胁迫响应表达谱分析 | 第31-35页 |
| 3.1 材料与方法 | 第31-32页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第31页 |
| 3.1.1.1 植物材料 | 第31页 |
| 3.1.1.2 主要试剂 | 第31页 |
| 3.1.1.3 主要仪器 | 第31页 |
| 3.1.1.4 实时定量 PCR (Real-time quantitative PCR ,qRT-PCR) 引物 | 第31页 |
| 3.1.2 试验方法 | 第31-32页 |
| 3.1.2.1 BolOST1 基因组织表达谱分析 | 第31-32页 |
| 3.1.2.2 BolOST1 逆境胁迫响应表达谱分析 | 第32页 |
| 3.2 结果与分析 | 第32-33页 |
| 3.2.1 BolOST1 基因组织表达量分析 | 第32-33页 |
| 3.3 讨论与结论 | 第33-35页 |
| 第四章 BolOST1 对 ABA 反应以及非生物胁迫的调控 | 第35-41页 |
| 4.1 材料与方法 | 第35-37页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第35页 |
| 4.1.1.1 植物材料 | 第35页 |
| 4.1.1.2 主要试剂 | 第35页 |
| 4.1.1.3 菌种 | 第35页 |
| 4.1.2 试验方法 | 第35-37页 |
| 4.1.2.1 拟南芥的培养 | 第35页 |
| 4.1.2.2 构建拟南芥 BolOST1 转基因突变体植株 | 第35-36页 |
| 4.1.2.3 免疫印迹 (Western blot) 鉴定 BolOST1 转基因植株 | 第36页 |
| 4.1.2.4 BolOST1 转基因植株对 ABA 反应性的分析 | 第36-37页 |
| 4.1.2.5 BolOST1 转基因植株对逆境胁迫反应性的分析 | 第37页 |
| 4.2 结果与分析 | 第37-40页 |
| 4.2.1 BolOST1 转基因植株的鉴定 | 第37页 |
| 4.2.2 BolOST1 转基因植株对 ABA 反应性表型分析 | 第37-38页 |
| 4.2.3 BolOST1 转基因植株对干旱胁迫反应性表型分析 | 第38-40页 |
| 4.3 讨论与结论 | 第40-41页 |
| 第五章 BolOST1 蛋白亚细胞定位分析 | 第41-45页 |
| 5.1 材料与方法 | 第41-42页 |
| 5.1.1 试验材料 | 第41页 |
| 5.1.1.1 植物材料 | 第41页 |
| 5.1.1.2 试验试剂 | 第41页 |
| 5.1.1.3 质粒 | 第41页 |
| 5.1.2 试验方法 | 第41-42页 |
| 5.1.2.1 拟南芥叶片原生质体转化 | 第42页 |
| 5.1.2.2 亚细胞定位分析 | 第42页 |
| 5.2 结果与分析 | 第42-43页 |
| 5.3 讨论与结论 | 第43-45页 |
| 第六章 BolOST1 蛋白体外激酶活性分析 | 第45-49页 |
| 6.1 材料与方法 | 第45-46页 |
| 6.1.1 试验材料 | 第45页 |
| 6.1.1.1 主要试剂 | 第45页 |
| 6.1.1.2 菌种和质粒 | 第45页 |
| 6.1.1.3 主要仪器 | 第45页 |
| 6.1.2 试验方法 | 第45-46页 |
| 6.1.2.1 构建 GST- BolOST1 和 GST- ABI5-N 融合蛋白重组质粒 | 第45页 |
| 6.1.2.2 重组蛋白的表达、纯化及检测 | 第45页 |
| 6.1.2.3 体外分析 BolOST1-GST 蛋白激酶活性 | 第45-46页 |
| 6.2 结果与分析 | 第46-47页 |
| 6.2.1 重组蛋白的表达、纯化与检测 | 第46页 |
| 6.2.2 BolOST1-GST 融合蛋白体外激酶活性分析 | 第46-47页 |
| 6.3 讨论与结论 | 第47-49页 |
| 第七章 BolOST1 与 BolABI5 和 BolABI1 蛋白相互作用 | 第49-53页 |
| 7.1 材料与方法 | 第49-50页 |
| 7.1.1 试验材料 | 第49页 |
| 7.1.1.1 植物材料 | 第49页 |
| 7.1.1.2 主要试剂 | 第49页 |
| 7.1.1.3 质粒 | 第49页 |
| 7.1.1.4 主要仪器 | 第49页 |
| 7.1.2 试验方法 | 第49-50页 |
| 7.1.2.1 构建 LUC 标记的表达载体 | 第49页 |
| 7.1.2.2 LUC 重组蛋白的表达 | 第49-50页 |
| 7.1.2.3 检测 LUC 活性 | 第50页 |
| 7.2 结果与分析 | 第50-51页 |
| 7.3 讨论与结论 | 第51-53页 |
| 第八章 结论与展望 | 第53-55页 |
| 8.1 结论 | 第53-54页 |
| 8.2 创新点 | 第54页 |
| 8.3 展望 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 作者简介 | 第63页 |
