| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-21页 |
| 1.1 作用于昆虫消化系统的杀虫剂的研究 | 第13-15页 |
| 1.1.1 Bt 毒素 | 第13-14页 |
| 1.1.2 二氢沉香呋喃类化合物 | 第14页 |
| 1.1.3 氧肟酸类化合物 | 第14页 |
| 1.1.4 鬼臼毒素类化合物 | 第14-15页 |
| 1.1.5 其它作用于昆虫消化系统的化合物 | 第15页 |
| 1.2 昆虫胰蛋白酶的性质及其应用 | 第15-16页 |
| 1.2.1 胰蛋白酶的性质研究 | 第15-16页 |
| 1.2.2 胰蛋白酶在昆虫防治方面的研究 | 第16页 |
| 1.3 杠柳杀虫作用研究进展 | 第16-19页 |
| 1.3.1 杠柳杀虫活性成分的分离 | 第17页 |
| 1.3.2 杠柳杀虫活性成分作用机理研究 | 第17-19页 |
| 1.4 论文设计思路 | 第19-21页 |
| 第二章 粘虫中肠胰蛋白酶的 cDNA 克隆 | 第21-37页 |
| 2.1 材料和方法 | 第21-29页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第21-22页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第22页 |
| 2.1.3 粘虫胰蛋白酶的中间片段扩增 | 第22-25页 |
| 2.1.4 胰蛋白酶基因全长扩增 | 第25-29页 |
| 2.1.5 序列的生物信息学分析 | 第29页 |
| 2.2 结果与分析 | 第29-35页 |
| 2.2.1 总 RNA 提取及基因克隆 | 第29-31页 |
| 2.2.2 粘虫中肠胰蛋白酶 cDNA 序列分析 | 第31-32页 |
| 2.2.3 粘虫中肠胰蛋白酶核酸序列比对和系统发生树分析 | 第32-35页 |
| 2.2.4 粘虫中肠胰蛋白酶基因推导蛋白的基本参数 | 第35页 |
| 2.3 小结与讨论 | 第35-37页 |
| 第三章 粘虫中肠胰蛋白酶的原核表达及活性检测 | 第37-49页 |
| 3.1 材料和方法 | 第37-44页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第37-40页 |
| 3.1.2 粘虫中肠胰蛋白酶基因片段的制备 | 第40-42页 |
| 3.1.3 表达载体的构建 | 第42-43页 |
| 3.1.4 目标蛋白诱导表达 | 第43-44页 |
| 3.1.5 胰蛋白酶的纯化 | 第44页 |
| 3.2 结果分析 | 第44-48页 |
| 3.2.1 粘虫中肠胰蛋白酶基因片段制备 | 第44-45页 |
| 3.2.2 双酶切制备表达载体和目标基因片段 | 第45-46页 |
| 3.2.3 目标片段和表达载体（PET28a）连接检测 | 第46页 |
| 3.2.5 粘虫胰蛋白酶的诱导表达及表达条件优化 | 第46-47页 |
| 3.2.6 胰蛋白酶的分离纯化 | 第47-48页 |
| 3.3 小结与讨论 | 第48-49页 |
| 第四章 胰蛋白酶活性检测及其杠柳新苷类化合物对其活性的影响 | 第49-53页 |
| 4.1 材料和方法 | 第49-50页 |
| 4.1.1 供试药剂 | 第49页 |
| 4.1.2 供试昆虫 | 第49页 |
| 4.1.3 酶活测定方法 | 第49-50页 |
| 4.1.4 蛋白含量的测定 | 第50页 |
| 4.2 结果分析 | 第50-52页 |
| 4.2.1 原核表达的胰蛋白酶活性测定 | 第50-51页 |
| 4.2.2 杠柳新苷类化合物对胰蛋白酶活性的影响 | 第51-52页 |
| 4.3 小结与讨论 | 第52-53页 |
| 第五章 讨论与结论 | 第53-56页 |
| 参考文献 | 第56-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 作者简介 | 第62页 |
