| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-20页 |
| 1.1 我国凡纳滨对虾养殖的现状 | 第12页 |
| 1.2 甲壳动物的免疫系统 | 第12-16页 |
| 1.2.1 器官免疫 | 第13-14页 |
| 1.2.2 细胞免疫 | 第14页 |
| 1.2.3 体液免疫 | 第14-16页 |
| 1.3 RNA 干扰技术在对虾免疫研究中的应用 | 第16-17页 |
| 1.3.1 dsRNA 的干扰机制 | 第16页 |
| 1.3.2 dsRNA 在免疫基因功能研究中的应用 | 第16-17页 |
| 1.4 对虾免疫基因 QM 和 serpin 的研究进展 | 第17-20页 |
| 1.4.1 QM 基因的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.4.2 Serpin 基因的研究进展 | 第18-20页 |
| 第二章 凡纳滨对虾 QM 基因的功能研究 | 第20-37页 |
| 2.1 材料和方法 | 第20-28页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第20页 |
| 2.1.2 感受态细胞的制备 | 第20-21页 |
| 2.1.3 总 RNA 的提取 | 第21页 |
| 2.1.4 cDNA 第一链的合成 | 第21页 |
| 2.1.5 LvQM 基因部分 cDNA 序列的获得 | 第21-23页 |
| 2.1.6 LvQM 基因的生物信息学分析 | 第23-24页 |
| 2.1.7 LvQM 基因双链 RNA 的体外合成 | 第24页 |
| 2.1.8 LvQM 基因重组蛋白的表达和纯化 | 第24-26页 |
| 2.1.9 利用实时定量 qRT-PCR 检测 LvQM 基因的表达量 | 第26-27页 |
| 2.1.10 双链 RNA 注射后对虾累积死亡率检测 | 第27-28页 |
| 2.1.11 细菌清除试验 | 第28页 |
| 2.1.12 酚氧化酶活力测定 | 第28页 |
| 2.2 结果和分析 | 第28-35页 |
| 2.2.1 LvQM 基因的克隆和序列分析 | 第28-29页 |
| 2.2.2 LvQM 基因氨基酸序列比对和系统进化树构建 | 第29-31页 |
| 2.2.3 LvQM 基因的组织差异表达 | 第31页 |
| 2.2.4 LvQM 基因在病菌刺激下的时序表达 | 第31-32页 |
| 2.2.5 RNA 干扰后相关基因表达量变化 | 第32页 |
| 2.2.6 RNA 干扰后累积死亡率变化 | 第32-33页 |
| 2.2.7 LvQM 基因重组蛋白的纯化 | 第33-34页 |
| 2.2.8 rLvQM 蛋白对细菌的清除 | 第34页 |
| 2.2.9 LvQM 基因对酚氧化酶活力的调节 | 第34-35页 |
| 2.3 讨论 | 第35-37页 |
| 第三章 凡纳滨对虾 SERPIN 基因的功能研究 | 第37-51页 |
| 3.1 材料和方法 | 第37-41页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第37页 |
| 3.1.2 Lvserpin 基因部分 cDNA 序列的获得 | 第37-38页 |
| 3.1.3 Lvserpin 基因的生物信息学分析 | 第38-39页 |
| 3.1.4 Lvserpin 基因的组织分布 | 第39页 |
| 3.1.5 不同病原刺激下 Lvserpin 基因的时序表达 | 第39页 |
| 3.1.6 Lvserpin 基因双链 RNA 的体外合成 | 第39-40页 |
| 3.1.7 注射 Lvserpin dsRNA 后相关基因表达量的检测 | 第40页 |
| 3.1.8 双链 RNA 注射后对虾累积死亡率检测 | 第40页 |
| 3.1.9 Lvserpin 基因重组蛋白的表达和纯化 | 第40页 |
| 3.1.10 蛋白酶活性抑制实验 | 第40页 |
| 3.1.11 细菌生长抑制实验 | 第40-41页 |
| 3.1.12 酚氧化酶系统抑制实验 | 第41页 |
| 3.2 结果和分析 | 第41-49页 |
| 3.2.1 Lvserpin 基因的克隆和序列分析 | 第41-42页 |
| 3.2.2 Lvserpin 基因氨基酸序列比对和系统进化树构建 | 第42-44页 |
| 3.2.3 Lvserpin 基因的组织分布 | 第44-45页 |
| 3.2.4 Lvserpin 基因应对不同病原刺激的时序表达 | 第45页 |
| 3.2.5 双链 RNA 对 Lvserpin 基因沉默 | 第45页 |
| 3.2.6 RNA 干扰后相关基因表达量变化 | 第45-47页 |
| 3.2.7 RNA 干扰后累积死亡率变化 | 第47页 |
| 3.2.8 Lvserpin 基因重组蛋白的表达和纯化 | 第47-48页 |
| 3.2.9 rLvserpin 蛋白对蛋白酶活力的抑制 | 第48页 |
| 3.2.10 rLvserpin 蛋白对细菌生长的抑制 | 第48页 |
| 3.2.11 rLvserpin 蛋白对酚氧化酶激活的抑制 | 第48-49页 |
| 3.3 讨论 | 第49-51页 |
| 第四章 结论、创新点和展望 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-59页 |
| 附录 | 第59-63页 |
| 缩略词 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 作者简介 | 第65页 |
