摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
缩写略表 | 第9-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-25页 |
1.1 DNA损伤应答及修复 | 第13-18页 |
1.1.1 不同DNA损伤修复途径以及双链断裂修复的生物学意义 | 第15-18页 |
1.2 体细胞非同源末端连接(NHEJ)修复机制 | 第18-20页 |
1.3 体细胞同源重组(HR)修复机制 | 第20-22页 |
1.4 体细胞同源重组(HR)修复检测体系的最新研究进展 | 第22-23页 |
1.5 RAD51 paralogs的功能研究 | 第23-24页 |
1.5.1 RAD51 paralogs在减数分裂同源重组中的作用 | 第23-24页 |
1.5.2 RAD51 paralogs在体细胞同源重组修复中的作用 | 第24页 |
1.6 R4D51 paralogs在植物体细胞同源重组修复中的研究进展 | 第24-25页 |
第二章 论文研究意义和目标 | 第25-26页 |
2.1 研究意义 | 第25页 |
2.2 研究目标 | 第25-26页 |
第三章 材料与方法 | 第26-40页 |
3.1 实验材料 | 第26-28页 |
3.1.1 水稻材料 | 第26页 |
3.1.2 质粒及菌株 | 第26-27页 |
3.1.3 工具酶及各种生化试剂 | 第27页 |
3.1.4 本研究所用蛋白的序列号(accession number) | 第27页 |
3.1.5 本研究所用试剂的配方 | 第27-28页 |
3.2 实验方法 | 第28-40页 |
3.2.1 水稻总DNA的提取 | 第28-29页 |
3.2.2 水稻总RNA的提取 | 第29页 |
3.2.3 荧光定量PCR分析 | 第29-31页 |
3.2.4 质粒DNA小量提取 | 第31-32页 |
3.2.5 体细胞重组修复率分析 | 第32-38页 |
3.2.5.1 构建水稻体细胞重组修复率分析的载体 | 第32-35页 |
3.2.5.2 农杆菌电击感受态的制备 | 第35页 |
3.2.5.3 电击转化农杆菌 | 第35-36页 |
3.2.5.4 水稻愈伤转化过程以及重组修复率分析 | 第36-38页 |
3.2.6 博莱霉素敏感性分析 | 第38页 |
3.2.7 抗体制备 | 第38页 |
3.2.8 根尖免疫染色 | 第38-39页 |
3.2.9 Wortmannin处理 | 第39-40页 |
第四章 结果与分析 | 第40-59页 |
4.1 水稻RAD51 paralogs响应γ射线的表达谱分析 | 第40-42页 |
4.2 水稻rad51 paralogs突变体对博莱霉素的敏感性分析 | 第42-44页 |
4.3 水稻体细胞重组修复率分析 | 第44-46页 |
4.4 Wortmannin抑制水稻H2AX的磷酸化,而且特异性地影响XRCC3和RAD51B蛋白的DSB位点募集,但不影响RAD51和RAD51C | 第46-51页 |
4.5 RAD51C、RAD51D、和XRCC3参与水稻体细胞SDSA重组修复过程 | 第51-54页 |
4.6 RAD51C在响应γ射线时,优先于其他成员在DSB位点进行蛋白募集 | 第54-57页 |
4.7 DMC1蛋白在体细胞响应DSB损伤过程中,不能在细胞核中形成点信号 | 第57-59页 |
第五章 讨论 | 第59-63页 |
5.1 水稻BCDX2复合物参与SSA途径,而CDX3复合物参与SDSA途径 | 第59-61页 |
5.2 Wortmannin处理可以强烈得抑制XRCC3的免疫信号,但不足以影响RAD51在DSB位点募集 | 第61-62页 |
5.3 基于RAD51C的支点作用,PI3K-like激酶促进RAD51 paralogs参与的体细胞同源重组修复 | 第62-63页 |
第六章 结论与展望 | 第63-64页 |
6.1 结论 | 第63页 |
6.2 研究展望 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-69页 |
附录 | 第69-73页 |
致谢 | 第73-75页 |
博士在读期间发表的论文 | 第75页 |