中文摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
符号说明 | 第9-10页 |
1 文献综述 | 第10-19页 |
1.1 铁蛋白的研究进展 | 第10-13页 |
1.1.1 铁蛋白的结构 | 第10-11页 |
1.1.2 铁蛋白参与调节铁代谢 | 第11-12页 |
1.1.3 铁蛋白的表达调控 | 第12页 |
1.1.4 铁蛋白与疾病的研究现状 | 第12-13页 |
1.2 RNA干扰的研究进展 | 第13-18页 |
1.2.1 RNA干扰的发现 | 第14页 |
1.2.2 RNA干扰的作用机制 | 第14-15页 |
1.2.3 RNA干扰的特点 | 第15页 |
1.2.4 siRNA的制备 | 第15-16页 |
1.2.5 慢病毒载体介导的RNA干扰 | 第16-17页 |
1.2.6 RNA干扰的应用 | 第17-18页 |
1.3 本研究的目的、意义 | 第18-19页 |
2 鸭FTH1基因的克隆及表达的初步分析 | 第19-30页 |
2.1 实验材料及试剂 | 第19页 |
2.2 主要试验仪器设备 | 第19页 |
2.3 实验方法及步骤 | 第19-22页 |
2.3.1 鸭组织总RNA提取及反转录 | 第19-20页 |
2.3.2 PCR引物的设计及合成 | 第20页 |
2.3.3 鸭FTH1基因CDS区的克隆与测序 | 第20页 |
2.3.4 序列分析 | 第20-21页 |
2.3.5 鸭FTH1基因组织表达谱分析 | 第21-22页 |
2.3.6 DHV-1感染对FTH1基因表达的影响 | 第22页 |
2.3.7 感染DHV-1对组织中凋亡相关基因表达影响 | 第22页 |
2.4 结果 | 第22-27页 |
2.4.1 鸭FTH1基因CDS区的克隆 | 第22页 |
2.4.2 FTH1基因CDS区序列分析 | 第22-25页 |
2.4.3 FTH1基因组织表达谱分析 | 第25-26页 |
2.4.4 DHV-1感染对FTH1基因表达的影响 | 第26页 |
2.4.5 DHV-1感染后组织中凋亡相关基因mRNA的表达变化 | 第26-27页 |
2.5 讨论 | 第27-30页 |
2.5.1 FTH1基因CDS区的克隆及序列分析 | 第27-28页 |
2.5.2 鸭FTH1的组织表达分析 | 第28页 |
2.5.3 DHV-1感染对组织中FTH1与凋亡相关基因表达的影响 | 第28-30页 |
3 FTH1基因功能初步鉴定 | 第30-42页 |
3.1 实验材料及试剂 | 第30页 |
3.2 主要试验仪器设备 | 第30页 |
3.3 实验方法及步骤 | 第30-34页 |
3.3.1 pEGFP-C1-FTH1过表达载体的构建及功能初步分析 | 第30-32页 |
3.3.2 pGLVH1/GFP+Puro-FTH1干扰载体的构建及功能初步分析 | 第32-34页 |
3.4 结果 | 第34-38页 |
3.4.1 pEGFP-C1-FTH1重组质粒的双酶切鉴定 | 第34页 |
3.4.2 鸭胚成纤维细胞的形态特征 | 第34-35页 |
3.4.3 荧光显微镜下重组质粒在DEF中的表达 | 第35页 |
3.4.4 荧光定量检测相关基因的表达变化 | 第35-36页 |
3.4.5 荧光显微镜下慢病毒载体在DEF中的表达 | 第36-37页 |
3.4.6 干扰质粒的筛选 | 第37-38页 |
3.4.7 FTH1抑制后凋亡相关基因的表达变化 | 第38页 |
3.5 讨论 | 第38-42页 |
3.5.1 pEGFP-C1-FTH1过表达载体的构建及鉴定 | 第38-39页 |
3.5.2 RNAi载体的构建及干扰效果的鉴定 | 第39-40页 |
3.5.3 过表达或干扰FTH1后对凋亡相关基因表达的影响 | 第40-42页 |
4 全文结论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-48页 |
附录 | 第48-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
攻读硕士学位期间发表的文章 | 第51-52页 |