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金定鸭FTH1基因的克隆及功能初步鉴定

中文摘要第3-5页
Abstract第5-6页
符号说明第9-10页
1 文献综述第10-19页
    1.1 铁蛋白的研究进展第10-13页
        1.1.1 铁蛋白的结构第10-11页
        1.1.2 铁蛋白参与调节铁代谢第11-12页
        1.1.3 铁蛋白的表达调控第12页
        1.1.4 铁蛋白与疾病的研究现状第12-13页
    1.2 RNA干扰的研究进展第13-18页
        1.2.1 RNA干扰的发现第14页
        1.2.2 RNA干扰的作用机制第14-15页
        1.2.3 RNA干扰的特点第15页
        1.2.4 siRNA的制备第15-16页
        1.2.5 慢病毒载体介导的RNA干扰第16-17页
        1.2.6 RNA干扰的应用第17-18页
    1.3 本研究的目的、意义第18-19页
2 鸭FTH1基因的克隆及表达的初步分析第19-30页
    2.1 实验材料及试剂第19页
    2.2 主要试验仪器设备第19页
    2.3 实验方法及步骤第19-22页
        2.3.1 鸭组织总RNA提取及反转录第19-20页
        2.3.2 PCR引物的设计及合成第20页
        2.3.3 鸭FTH1基因CDS区的克隆与测序第20页
        2.3.4 序列分析第20-21页
        2.3.5 鸭FTH1基因组织表达谱分析第21-22页
        2.3.6 DHV-1感染对FTH1基因表达的影响第22页
        2.3.7 感染DHV-1对组织中凋亡相关基因表达影响第22页
    2.4 结果第22-27页
        2.4.1 鸭FTH1基因CDS区的克隆第22页
        2.4.2 FTH1基因CDS区序列分析第22-25页
        2.4.3 FTH1基因组织表达谱分析第25-26页
        2.4.4 DHV-1感染对FTH1基因表达的影响第26页
        2.4.5 DHV-1感染后组织中凋亡相关基因mRNA的表达变化第26-27页
    2.5 讨论第27-30页
        2.5.1 FTH1基因CDS区的克隆及序列分析第27-28页
        2.5.2 鸭FTH1的组织表达分析第28页
        2.5.3 DHV-1感染对组织中FTH1与凋亡相关基因表达的影响第28-30页
3 FTH1基因功能初步鉴定第30-42页
    3.1 实验材料及试剂第30页
    3.2 主要试验仪器设备第30页
    3.3 实验方法及步骤第30-34页
        3.3.1 pEGFP-C1-FTH1过表达载体的构建及功能初步分析第30-32页
        3.3.2 pGLVH1/GFP+Puro-FTH1干扰载体的构建及功能初步分析第32-34页
    3.4 结果第34-38页
        3.4.1 pEGFP-C1-FTH1重组质粒的双酶切鉴定第34页
        3.4.2 鸭胚成纤维细胞的形态特征第34-35页
        3.4.3 荧光显微镜下重组质粒在DEF中的表达第35页
        3.4.4 荧光定量检测相关基因的表达变化第35-36页
        3.4.5 荧光显微镜下慢病毒载体在DEF中的表达第36-37页
        3.4.6 干扰质粒的筛选第37-38页
        3.4.7 FTH1抑制后凋亡相关基因的表达变化第38页
    3.5 讨论第38-42页
        3.5.1 pEGFP-C1-FTH1过表达载体的构建及鉴定第38-39页
        3.5.2 RNAi载体的构建及干扰效果的鉴定第39-40页
        3.5.3 过表达或干扰FTH1后对凋亡相关基因表达的影响第40-42页
4 全文结论第42-43页
参考文献第43-48页
附录第48-50页
致谢第50-51页
攻读硕士学位期间发表的文章第51-52页

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