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三种四膜虫砷甲基化酶基因鉴定及功能分析

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
目录第10-13页
第一章 综述第13-24页
    1.1 砷及其危害第13-15页
    1.2 砷的生物代谢途径第15-20页
        1.2.1 原核生物中的砷代谢途径第15-17页
        1.2.2 真核生物中的砷代谢途径第17-20页
    1.3 基因预测简介第20-21页
    1.4 四膜虫在毒理学和环境毒理学中的应用第21-22页
        1.4.1 四膜虫的特征第21页
        1.4.2 四膜虫在毒理学及环境毒理学的应用第21-22页
    1.5 研究目的及意义第22-24页
第二章 砷(AsⅤ)对三种四膜虫的毒性效应第24-32页
    2.1 材料与方法第24-26页
        2.1.1 实验四膜虫及试剂第24页
        2.1.2 慢性毒性实验第24页
        2.1.3 急性毒性实验第24-26页
    2.2 结果与分析第26-29页
        2.2.1 砷对三种四膜虫生长的影响第26-27页
        2.2.2 不同浓度砷(AsⅤ)对三种四膜虫生长率的影响第27-28页
        2.2.3 砷(AsⅤ)对三种四膜虫 24h 半数效应浓度(EC_(50))的差别第28-29页
    2.3 讨论第29-32页
第三章 三种四膜虫砷甲基化酶(arsM)基因预测第32-51页
    3.1 材料与方法第32-33页
        3.1.1 多种生物砷甲基化酶氨基酸序列获取及分析第32页
        3.1.2 三种四膜虫砷甲基化酶(arsM)基因预测方法第32-33页
    3.3 结果与分析第33-48页
        3.3.1 三种四膜虫砷甲基化酶基因编码区序列预测第33-41页
        3.3.2 四膜虫砷甲基化酶氨基酸序列保守性与同源性第41-47页
        3.3.3 三种四膜虫砷甲基化酶基因分布特征第47-48页
    3.4 讨论第48-51页
        3.4.1 三种四膜虫砷甲基化酶(arsM)基因保守性及其砷代谢潜力第48-49页
        3.4.2 砷甲基化酶基因在四膜虫中存在多种分布模式第49-51页
第四章 砷诱导下三种四膜虫砷甲基化酶(arsM)基因表达情况第51-59页
    4.1 材料与方法第51-54页
        4.1.1 主要仪器及试剂第51页
        4.1.2 毒物诱导及 RNA 提取第51-52页
        4.1.3 cDNA 制备过程第52页
        4.1.4 定量引物的设计第52-53页
        4.1.5 定量 PCR(RT_qPCR)及其条件的优化第53页
        4.1.6 定量 PCR 结果分析第53-54页
    4.2 结果与分析第54-57页
        4.2.1 引物特异性检测第54页
        4.2.2 溶解曲线第54-56页
        4.2.3 砷处理下三种四膜虫 arsM 基因相对表达变化第56-57页
    4.3 讨论第57-59页
        4.3.1 实时定量 PCR 条件的优化第57-58页
        4.3.2 砷诱导了三种四膜虫 arsM 基因的相对表达第58-59页
第五章 砷(AsⅤ)胁迫下三种四膜虫砷形态的变化第59-72页
    5.1 材料与方法第59-60页
        5.1.1 主要仪器与试剂第59页
        5.1.2 实验方法第59-60页
    5.2 结果与分析第60-69页
        5.2.1 三种四膜虫细胞及培养基中砷形态变化第60-67页
        5.2.2 三种四膜虫细胞中总砷及各形态砷含量变化第67-69页
    5.3 讨论第69-72页
        5.3.1 三种四膜虫体内存在砷甲基化现象及砷甲基化酶第69-70页
        5.3.2 三种四膜虫砷甲基化能力存在差异第70-72页
第六章 总结第72-73页
参考文献第73-77页
致谢第77页

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