摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
目录 | 第10-13页 |
第一章 综述 | 第13-24页 |
1.1 砷及其危害 | 第13-15页 |
1.2 砷的生物代谢途径 | 第15-20页 |
1.2.1 原核生物中的砷代谢途径 | 第15-17页 |
1.2.2 真核生物中的砷代谢途径 | 第17-20页 |
1.3 基因预测简介 | 第20-21页 |
1.4 四膜虫在毒理学和环境毒理学中的应用 | 第21-22页 |
1.4.1 四膜虫的特征 | 第21页 |
1.4.2 四膜虫在毒理学及环境毒理学的应用 | 第21-22页 |
1.5 研究目的及意义 | 第22-24页 |
第二章 砷(AsⅤ)对三种四膜虫的毒性效应 | 第24-32页 |
2.1 材料与方法 | 第24-26页 |
2.1.1 实验四膜虫及试剂 | 第24页 |
2.1.2 慢性毒性实验 | 第24页 |
2.1.3 急性毒性实验 | 第24-26页 |
2.2 结果与分析 | 第26-29页 |
2.2.1 砷对三种四膜虫生长的影响 | 第26-27页 |
2.2.2 不同浓度砷(AsⅤ)对三种四膜虫生长率的影响 | 第27-28页 |
2.2.3 砷(AsⅤ)对三种四膜虫 24h 半数效应浓度(EC_(50))的差别 | 第28-29页 |
2.3 讨论 | 第29-32页 |
第三章 三种四膜虫砷甲基化酶(arsM)基因预测 | 第32-51页 |
3.1 材料与方法 | 第32-33页 |
3.1.1 多种生物砷甲基化酶氨基酸序列获取及分析 | 第32页 |
3.1.2 三种四膜虫砷甲基化酶(arsM)基因预测方法 | 第32-33页 |
3.3 结果与分析 | 第33-48页 |
3.3.1 三种四膜虫砷甲基化酶基因编码区序列预测 | 第33-41页 |
3.3.2 四膜虫砷甲基化酶氨基酸序列保守性与同源性 | 第41-47页 |
3.3.3 三种四膜虫砷甲基化酶基因分布特征 | 第47-48页 |
3.4 讨论 | 第48-51页 |
3.4.1 三种四膜虫砷甲基化酶(arsM)基因保守性及其砷代谢潜力 | 第48-49页 |
3.4.2 砷甲基化酶基因在四膜虫中存在多种分布模式 | 第49-51页 |
第四章 砷诱导下三种四膜虫砷甲基化酶(arsM)基因表达情况 | 第51-59页 |
4.1 材料与方法 | 第51-54页 |
4.1.1 主要仪器及试剂 | 第51页 |
4.1.2 毒物诱导及 RNA 提取 | 第51-52页 |
4.1.3 cDNA 制备过程 | 第52页 |
4.1.4 定量引物的设计 | 第52-53页 |
4.1.5 定量 PCR(RT_qPCR)及其条件的优化 | 第53页 |
4.1.6 定量 PCR 结果分析 | 第53-54页 |
4.2 结果与分析 | 第54-57页 |
4.2.1 引物特异性检测 | 第54页 |
4.2.2 溶解曲线 | 第54-56页 |
4.2.3 砷处理下三种四膜虫 arsM 基因相对表达变化 | 第56-57页 |
4.3 讨论 | 第57-59页 |
4.3.1 实时定量 PCR 条件的优化 | 第57-58页 |
4.3.2 砷诱导了三种四膜虫 arsM 基因的相对表达 | 第58-59页 |
第五章 砷(AsⅤ)胁迫下三种四膜虫砷形态的变化 | 第59-72页 |
5.1 材料与方法 | 第59-60页 |
5.1.1 主要仪器与试剂 | 第59页 |
5.1.2 实验方法 | 第59-60页 |
5.2 结果与分析 | 第60-69页 |
5.2.1 三种四膜虫细胞及培养基中砷形态变化 | 第60-67页 |
5.2.2 三种四膜虫细胞中总砷及各形态砷含量变化 | 第67-69页 |
5.3 讨论 | 第69-72页 |
5.3.1 三种四膜虫体内存在砷甲基化现象及砷甲基化酶 | 第69-70页 |
5.3.2 三种四膜虫砷甲基化能力存在差异 | 第70-72页 |
第六章 总结 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-77页 |
致谢 | 第77页 |