| 中文摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 符号说明 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-19页 |
| 1. 生长激素的研究进展 | 第10-13页 |
| 2. 转基因动物乳腺生物反应器生产重组t-PA的研究进展 | 第13-17页 |
| 3. 双基因的协同的作用 | 第17-19页 |
| 第二章 山羊生长激素基因载体的构建 | 第19-29页 |
| 1 试验材料 | 第19-21页 |
| 2 试验方法 | 第21-26页 |
| 2.1 gGH cDNA片段的获得 | 第21-23页 |
| 2.2 PCR扩增Neo基因序列 | 第23页 |
| 2.3 PLGH载体的构建 | 第23-26页 |
| 3. 结果 | 第26-27页 |
| 4. 讨论 | 第27-29页 |
| 第三章 双基因共整合山羊胎儿成纤维细胞系的制备 | 第29-40页 |
| 1. 试验材料 | 第29-30页 |
| 2. 试验方法 | 第30-35页 |
| 2.1 胎儿成纤维细胞的准备 | 第30-31页 |
| 2.2 质粒DNA的制备 | 第31页 |
| 2.3 PLGH与PtPA双基因共转染胎儿成纤维细胞 | 第31-35页 |
| 3 结果 | 第35-38页 |
| 4 讨论 | 第38-40页 |
| 第四章 双基因整合山羊乳腺上皮细胞系的建立 | 第40-47页 |
| 1. 试验材料 | 第40-41页 |
| 2 试验方法 | 第41-43页 |
| 2.1 奶山羊乳腺上皮细胞的原代培养 | 第41页 |
| 2.2 乳腺上皮细胞的纯化 | 第41页 |
| 2.3 细胞的冻存 | 第41页 |
| 2.4 PLGH与PtPA共转染山羊乳腺上皮细胞 | 第41-42页 |
| 2.5 G418的药物蹄选培养 | 第42页 |
| 2.6 挑取单克隆 | 第42页 |
| 2.7 细胞株的PCR整合检测 | 第42-43页 |
| 2.8 催乳素处理及ELISA检测 | 第43页 |
| 3 结果 | 第43-45页 |
| 4 讨论 | 第45-47页 |
| 第五章 PLGH与PtPA乳腺特异性表达载体制备转基因兔 | 第47-58页 |
| 1 试验材料 | 第47-48页 |
| 2 试验方法 | 第48-53页 |
| 2.1 显微注射用质粒载体的准备 | 第48-49页 |
| 2.2 转基因兔的制备 | 第49-51页 |
| 2.3 转基因兔的整合检测 | 第51-53页 |
| 3 结果 | 第53-56页 |
| 4 讨论 | 第56-58页 |
| 第六章 山羊转基因克隆胚的构建 | 第58-62页 |
| 1 试验材料 | 第58-59页 |
| 2 试验方法 | 第59-60页 |
| 2.1 卵母细胞供体羊的准备 | 第59页 |
| 2.2 供核细胞的准备 | 第59-60页 |
| 2.3 卵母细胞的准备和重构胚的制备 | 第60页 |
| 2.4 重组胚的电融合与核移植胚胎的激活 | 第60页 |
| 3 结果 | 第60-61页 |
| 4 讨论 | 第61-62页 |
| 全文总结 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
