| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 英文缩略词表 | 第16-17页 |
| 前言 | 第17-25页 |
| 第一章 食管鳞癌中mTORC2/Akt信号通路的激活状态及临床意义分析 | 第25-33页 |
| 引言 | 第25页 |
| 1 实验材料 | 第25-27页 |
| 1.1 实验设备 | 第25页 |
| 1.2 实验试剂 | 第25-26页 |
| 1.3 试剂配制 | 第26-27页 |
| 1.4 组织样本 | 第27页 |
| 2 实验方法 | 第27-29页 |
| 2.1 免疫组织化学法 | 第27-29页 |
| 2.2 统计学分析 | 第29页 |
| 3 结果 | 第29-31页 |
| 3.1 食管鳞癌组织和正常食管组织中Rictor及p-Akt蛋白的表达情况 | 第29-30页 |
| 3.2 食管鳞癌组织中Rictor与p-Akt蛋白表达水平的相关性 | 第30页 |
| 3.3 食管鳞癌组织中Rictor及p-Akt蛋白表达与临床病理参数的关系 | 第30-31页 |
| 4 讨论 | 第31-32页 |
| 5 小结 | 第32-33页 |
| 第二章 体外下调Rictor表达后细胞对mTOR抑制剂敏感性的变化及分子机制 | 第33-54页 |
| 引言 | 第33页 |
| 第一节 筛选稳定表达Rictor的ECa109细胞株 | 第33-46页 |
| 1 实验材料 | 第33-37页 |
| 1.1 实验设备 | 第33-34页 |
| 1.2 实验试剂 | 第34-35页 |
| 1.3 试剂配制 | 第35-36页 |
| 1.4 食管鳞癌细胞株 | 第36-37页 |
| 2 实验方法 | 第37-43页 |
| 2.1 细胞培养 | 第37-38页 |
| 2.2 细胞转染 | 第38-39页 |
| 2.3 筛选稳定表达株 | 第39页 |
| 2.4 免疫印迹法 | 第39-42页 |
| 2.5 统计学分析 | 第42-43页 |
| 3 结果 | 第43-45页 |
| 3.1 Rictor-shRNA、Control-shRNA在ECa109细胞中转染效率 | 第43-44页 |
| 3.2 稳定表达株筛选结果 | 第44页 |
| 3.3 稳定表达株中Rictor蛋白的表达水平 | 第44-45页 |
| 4 讨论 | 第45页 |
| 5 小结 | 第45-46页 |
| 第二节 体外下调Rictor表达后细胞对mTOR抑制剂敏感性变化的分子机制 | 第46-54页 |
| 1 实验材料 | 第46-48页 |
| 1.1 实验设备 | 第46页 |
| 1.2 实验试剂 | 第46页 |
| 1.3 试剂配制 | 第46-47页 |
| 1.4 食管鳞癌细胞株 | 第47-48页 |
| 2 实验方法 | 第48-49页 |
| 2.1 CCK-8法 | 第48页 |
| 2.2 免疫印迹法 | 第48-49页 |
| 2.3 统计学处理 | 第49页 |
| 3 结果 | 第49-52页 |
| 3.1 依维莫司分别对食管鳞癌ECa109和EC9706细胞增殖的影响 | 第49页 |
| 3.2 PP242分别对食管鳞癌ECa109和EC9706细胞增殖的影响 | 第49-50页 |
| 3.3 下调Rictor表达后mTOR抑制剂对细胞增殖、凋亡、周期和迁移的影响 | 第50页 |
| 3.4 下调Rictor表达后细胞对mTOR抑制剂敏感性的分子机制 | 第50-52页 |
| 4 讨论 | 第52-53页 |
| 5 小结 | 第53-54页 |
| 第三章 体内下调Rictor表达后细胞对mTOR抑制剂敏感性变化及分子机制 | 第54-71页 |
| 引言 | 第54页 |
| 第一节 mTOR抑制剂对不同Rictor水平裸鼠移植瘤生长的影响 | 第54-66页 |
| 1 实验材料 | 第54-55页 |
| 1.1 实验设备 | 第54-55页 |
| 1.2 实验试剂 | 第55页 |
| 1.3 试剂配制 | 第55页 |
| 2 实验方法 | 第55-58页 |
| 2.1 裸鼠移植瘤实验 | 第55-56页 |
| 2.2 H&E染色实验 | 第56-57页 |
| 2.3 TUNEL实验 | 第57-58页 |
| 2.4 统计学分析 | 第58页 |
| 3 结果 | 第58-64页 |
| 3.1 依维莫司对不同Rictor水平裸鼠移植瘤生长的影响 | 第58-61页 |
| 3.1.1 裸鼠移植瘤生长情况 | 第58-60页 |
| 3.1.2 肿瘤组织H&E染色情况 | 第60页 |
| 3.1.3 肿瘤组织TUNEL检测细胞凋亡情况 | 第60-61页 |
| 3.2 PP242对不同Rictor水平裸鼠移植瘤生长的影响 | 第61-64页 |
| 3.2.1 裸鼠移植瘤生长情况 | 第61-62页 |
| 3.2.2 肿瘤组织中H&E染色情况 | 第62-63页 |
| 3.2.3 肿瘤组织TUNEL检测细胞凋亡情况 | 第63-64页 |
| 4 讨论 | 第64-65页 |
| 5 小结 | 第65-66页 |
| 第二节 体内下调Rictor表达后细胞对mTOR抑制剂敏感性变化的分子机制 | 第66-71页 |
| 1 实验材料 | 第66页 |
| 1.1 实验设备 | 第66页 |
| 1.2 实验试剂 | 第66页 |
| 1.3 试剂配制 | 第66页 |
| 2 实验方法 | 第66-67页 |
| 2.1 液氮研磨法提组织蛋白 | 第66-67页 |
| 2.2 免疫印迹法 | 第67页 |
| 2.2 统计学数据分析 | 第67页 |
| 3 结果 | 第67-69页 |
| 3.1 依维莫司对肿瘤组织中PI3K/Akt/mTOR通路相关蛋白表达的影响 | 第67-68页 |
| 3.2 PP242对肿瘤组织中PI3K/Akt/mTOR通路相关蛋白表达的影响 | 第68-69页 |
| 4 讨论 | 第69-70页 |
| 5 小结 | 第70-71页 |
| 结论 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-76页 |
| 综述：Rictor/mTORC2的功能及研究进展 | 第76-85页 |
| 参考文献 | 第82-85页 |
| 个人简历 | 第85-86页 |
| 致谢 | 第86页 |
