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钙网蛋白调控肺癌细胞上皮间质转化过程及相关机制研究

中文摘要第3-5页
英文摘要第5-6页
英文缩略词对照表第12-14页
1 绪论第14-26页
    1.1 问题的提出第14-15页
    1.2 国内外研究进展第15-22页
        1.2.1 上皮-间质转化过程研究进展第15-18页
        1.2.2 钙网蛋白研究进展第18-19页
        1.2.3 胞内钙离子信号研究进展第19-22页
    1.3 研究意义第22页
    1.4 研究目的以及研究内容第22-26页
        1.4.1 研究目的第22页
        1.4.2 主要研究内容第22-23页
        1.4.3 本研究的技术路线第23页
        1.4.4 本研究的创新性第23-26页
2 CRT在TGF-β1 诱导的EMT模型中高表达第26-44页
    2.1 引言第26页
    2.2 实验仪器、材料与试剂第26-29页
        2.2.1 实验仪器第26-27页
        2.2.2 实验材料与试剂第27-29页
    2.3 实验方法第29-36页
        2.3.1 试剂配置第29页
        2.3.2 细胞培养第29-30页
        2.3.3 不同浓度TGF-β1 诱导肺癌细胞发生EMT第30页
        2.3.4 10ng/mL的TGF-β1 作用不同时间诱导肺癌细胞发生EMT第30-31页
        2.3.5 建立TGF-β1 诱导肺癌细胞发生EMT模型第31页
        2.3.6 半定量RT-PCR检测目的基因表达第31-33页
        2.3.7 Western Blot检测目的蛋白表达第33-36页
        2.3.8 数据处理第36页
    2.4 实验结果第36-42页
        2.4.1 细胞培养第36页
        2.4.2 不同浓度TGF-β1 诱导肺癌细胞发生EMT第36-38页
        2.4.3 10ng/mL的TGF-β1 作用不同时间诱导肺癌细胞发生EMT第38-40页
        2.4.4 建立TGF-β1 诱导肺癌细胞发生EMT模型第40-41页
        2.4.5 CRT在TGF-β1 诱导的EMT模型中高表达第41-42页
    2.5 讨论第42-43页
    2.6 本章小结第43-44页
3 CRT对肺癌细胞EMT过程的影响第44-66页
    3.1 前言第44页
    3.2 实验仪器、材料与试剂第44-47页
        3.2.1 实验仪器第44-45页
        3.2.2 实验材料与试剂第45-47页
    3.3 实验方法第47-57页
        3.3.1 CRT过表达重组质粒构建第47-50页
        3.3.2 CRT过表达重组质粒转染第50-51页
        3.3.3 过表达CRT对肺癌细胞EMT过程的影响第51页
        3.3.4 siRNA转染第51-52页
        3.3.5 沉默CRT对肺癌细胞EMT过程的影响第52页
        3.3.6 半定量RT-PCR检测目的基因表达第52-54页
        3.3.7 Western Blot检测目的蛋白表达第54-57页
        3.3.8 数据处理第57页
    3.4 实验结果第57-63页
        3.4.1 CRT过表达重组质粒构建第57-58页
        3.4.2 重组质粒转染及过表达检测第58-60页
        3.4.3 过表达CRT对肺癌细胞EMT过程的影响第60-61页
        3.4.4 siRNA转染及沉默效率检测第61-62页
        3.4.5 沉默CRT对肺癌细胞EMT过程的影响第62-63页
    3.5 讨论第63-64页
    3.6 本章小结第64-66页
4 CRT对肺癌细胞迁移的影响第66-74页
    4.1 引言第66页
    4.2 实验仪器、材料与试剂第66-67页
        4.2.1 实验仪器第66-67页
        4.2.2 实验材料与试剂第67页
    4.3 实验方法第67-69页
        4.3.1 过表达CRT对肺癌细胞迁移的影响第67-68页
        4.3.2 沉默CRT对肺癌细胞迁移的影响第68-69页
        4.3.3 过表达CRT和TGF-β1 共同作用对肺癌细胞迁移的影响第69页
        4.3.4 数据处理第69页
    4.4 实验结果第69-71页
        4.4.1 过表达CRT对肺癌细胞迁移的影响第69-70页
        4.4.2 沉默CRT对肺癌细胞迁移的影响第70-71页
        4.4.3 过表达CRT和TGF-β1 共同作用对肺癌细胞迁移的影响第71页
    4.5 讨论第71-72页
    4.6 本章小结第72-74页
5 CRT通过Smad信号通路调控TGF-β1 诱导的EMT第74-88页
    5.1 前言第74页
    5.2 实验仪器、材料与试剂第74-76页
        5.2.1 实验仪器第74-75页
        5.2.2 实验材料与试剂第75-76页
    5.3 实验方法第76-81页
        5.3.1 TGF-β1 诱导肺癌细胞发生EMT第76页
        5.3.2 TGF-β1 处理CRT过表达肺癌细胞第76-77页
        5.3.3 TGF-β1 处理CRT低表达肺癌细胞第77页
        5.3.4 SB-431542 抑制Smad信号通路第77-78页
        5.3.5 Western Blot检测目的蛋白表达第78-81页
        5.3.6 数据处理第81页
    5.4 实验结果第81-85页
        5.4.1 TGF-β1 诱导的EMT激活Smad信号通路。第81页
        5.4.2 过表达CRT增强TGF-β1 下游Smad信号通路第81-82页
        5.4.3 沉默CRT抑制TGF-β1 下游Smad信号通路第82-83页
        5.4.4 CRT通过Smad信号通路调控TGF-β1 诱导的EMT第83-84页
        5.4.5 CRT调控转录因子SLUG的表达第84-85页
    5.5 讨论第85-86页
    5.6 本章小结第86-88页
6 肺癌细胞发生EMT对胞内钙离子信号的影响第88-96页
    6.1 前言第88页
    6.2 实验仪器、材料与试剂第88-90页
        6.2.1 实验仪器第88-89页
        6.2.2 实验材料与试剂第89-90页
    6.3 实验方法第90-92页
        6.3.1 试剂配制第90页
        6.3.2 TGF-β1 诱导肺癌细胞发生EMT第90-91页
        6.3.3 CRT过表达重组质粒转染第91页
        6.3.4 siRNA转染第91页
        6.3.5 钙离子信号检测第91-92页
        6.3.6 数据处理第92页
    6.4 实验结果第92-94页
        6.4.1 肺癌细胞发生EMT影响胞内钙离子信号第92-93页
        6.4.2 过表达CRT影响胞内钙离子信号第93-94页
        6.4.3 CRT参与调控EMT下游胞内钙离子信号第94页
    6.5 讨论第94-95页
    6.6 本章小结第95-96页
7 胞内钙信号调控肺癌细胞发生EMT第96-110页
    7.1 引言第96页
    7.2 实验仪器、材料和试剂第96-99页
        7.2.1 实验仪器第96-97页
        7.2.2 实验材料与试剂第97-99页
    7.3 实验方法第99-104页
        7.3.1 TG对肺癌细胞EMT过程的影响第99页
        7.3.2 BAPTA-AM对肺癌细胞EMT过程的影响第99页
        7.3.3 半定量RT-PCR检测目的基因表达第99-101页
        7.3.4 Western Blot检测目的蛋白表达第101-104页
        7.3.5 数据处理第104页
    7.4 实验结果第104-108页
        7.4.1 TG对肺癌细胞EMT过程的影响第104-105页
        7.4.2 TG对Smad信号通路的影响第105-106页
        7.4.3 BAPTA-AM对肺癌细胞EMT过程的影响第106-107页
        7.4.4 BAPTA-AM对Smad信号通路的影响。第107-108页
    7.5 讨论第108-109页
    7.6 本章小结第109-110页
8 结论与展望第110-114页
    8.1 主要结论第110-111页
    8.2 工作展望第111-114页
致谢第114-116页
参考文献第116-130页
附录第130页
    A 作者在攻读博士学位期间发表论文及专利情况第130页
    B 作者在攻读博士学位期间参加的科研项目第130页

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