中文摘要 | 第3-5页 |
英文摘要 | 第5-6页 |
英文缩略词对照表 | 第12-14页 |
1 绪论 | 第14-26页 |
1.1 问题的提出 | 第14-15页 |
1.2 国内外研究进展 | 第15-22页 |
1.2.1 上皮-间质转化过程研究进展 | 第15-18页 |
1.2.2 钙网蛋白研究进展 | 第18-19页 |
1.2.3 胞内钙离子信号研究进展 | 第19-22页 |
1.3 研究意义 | 第22页 |
1.4 研究目的以及研究内容 | 第22-26页 |
1.4.1 研究目的 | 第22页 |
1.4.2 主要研究内容 | 第22-23页 |
1.4.3 本研究的技术路线 | 第23页 |
1.4.4 本研究的创新性 | 第23-26页 |
2 CRT在TGF-β1 诱导的EMT模型中高表达 | 第26-44页 |
2.1 引言 | 第26页 |
2.2 实验仪器、材料与试剂 | 第26-29页 |
2.2.1 实验仪器 | 第26-27页 |
2.2.2 实验材料与试剂 | 第27-29页 |
2.3 实验方法 | 第29-36页 |
2.3.1 试剂配置 | 第29页 |
2.3.2 细胞培养 | 第29-30页 |
2.3.3 不同浓度TGF-β1 诱导肺癌细胞发生EMT | 第30页 |
2.3.4 10ng/mL的TGF-β1 作用不同时间诱导肺癌细胞发生EMT | 第30-31页 |
2.3.5 建立TGF-β1 诱导肺癌细胞发生EMT模型 | 第31页 |
2.3.6 半定量RT-PCR检测目的基因表达 | 第31-33页 |
2.3.7 Western Blot检测目的蛋白表达 | 第33-36页 |
2.3.8 数据处理 | 第36页 |
2.4 实验结果 | 第36-42页 |
2.4.1 细胞培养 | 第36页 |
2.4.2 不同浓度TGF-β1 诱导肺癌细胞发生EMT | 第36-38页 |
2.4.3 10ng/mL的TGF-β1 作用不同时间诱导肺癌细胞发生EMT | 第38-40页 |
2.4.4 建立TGF-β1 诱导肺癌细胞发生EMT模型 | 第40-41页 |
2.4.5 CRT在TGF-β1 诱导的EMT模型中高表达 | 第41-42页 |
2.5 讨论 | 第42-43页 |
2.6 本章小结 | 第43-44页 |
3 CRT对肺癌细胞EMT过程的影响 | 第44-66页 |
3.1 前言 | 第44页 |
3.2 实验仪器、材料与试剂 | 第44-47页 |
3.2.1 实验仪器 | 第44-45页 |
3.2.2 实验材料与试剂 | 第45-47页 |
3.3 实验方法 | 第47-57页 |
3.3.1 CRT过表达重组质粒构建 | 第47-50页 |
3.3.2 CRT过表达重组质粒转染 | 第50-51页 |
3.3.3 过表达CRT对肺癌细胞EMT过程的影响 | 第51页 |
3.3.4 siRNA转染 | 第51-52页 |
3.3.5 沉默CRT对肺癌细胞EMT过程的影响 | 第52页 |
3.3.6 半定量RT-PCR检测目的基因表达 | 第52-54页 |
3.3.7 Western Blot检测目的蛋白表达 | 第54-57页 |
3.3.8 数据处理 | 第57页 |
3.4 实验结果 | 第57-63页 |
3.4.1 CRT过表达重组质粒构建 | 第57-58页 |
3.4.2 重组质粒转染及过表达检测 | 第58-60页 |
3.4.3 过表达CRT对肺癌细胞EMT过程的影响 | 第60-61页 |
3.4.4 siRNA转染及沉默效率检测 | 第61-62页 |
3.4.5 沉默CRT对肺癌细胞EMT过程的影响 | 第62-63页 |
3.5 讨论 | 第63-64页 |
3.6 本章小结 | 第64-66页 |
4 CRT对肺癌细胞迁移的影响 | 第66-74页 |
4.1 引言 | 第66页 |
4.2 实验仪器、材料与试剂 | 第66-67页 |
4.2.1 实验仪器 | 第66-67页 |
4.2.2 实验材料与试剂 | 第67页 |
4.3 实验方法 | 第67-69页 |
4.3.1 过表达CRT对肺癌细胞迁移的影响 | 第67-68页 |
4.3.2 沉默CRT对肺癌细胞迁移的影响 | 第68-69页 |
4.3.3 过表达CRT和TGF-β1 共同作用对肺癌细胞迁移的影响 | 第69页 |
4.3.4 数据处理 | 第69页 |
4.4 实验结果 | 第69-71页 |
4.4.1 过表达CRT对肺癌细胞迁移的影响 | 第69-70页 |
4.4.2 沉默CRT对肺癌细胞迁移的影响 | 第70-71页 |
4.4.3 过表达CRT和TGF-β1 共同作用对肺癌细胞迁移的影响 | 第71页 |
4.5 讨论 | 第71-72页 |
4.6 本章小结 | 第72-74页 |
5 CRT通过Smad信号通路调控TGF-β1 诱导的EMT | 第74-88页 |
5.1 前言 | 第74页 |
5.2 实验仪器、材料与试剂 | 第74-76页 |
5.2.1 实验仪器 | 第74-75页 |
5.2.2 实验材料与试剂 | 第75-76页 |
5.3 实验方法 | 第76-81页 |
5.3.1 TGF-β1 诱导肺癌细胞发生EMT | 第76页 |
5.3.2 TGF-β1 处理CRT过表达肺癌细胞 | 第76-77页 |
5.3.3 TGF-β1 处理CRT低表达肺癌细胞 | 第77页 |
5.3.4 SB-431542 抑制Smad信号通路 | 第77-78页 |
5.3.5 Western Blot检测目的蛋白表达 | 第78-81页 |
5.3.6 数据处理 | 第81页 |
5.4 实验结果 | 第81-85页 |
5.4.1 TGF-β1 诱导的EMT激活Smad信号通路。 | 第81页 |
5.4.2 过表达CRT增强TGF-β1 下游Smad信号通路 | 第81-82页 |
5.4.3 沉默CRT抑制TGF-β1 下游Smad信号通路 | 第82-83页 |
5.4.4 CRT通过Smad信号通路调控TGF-β1 诱导的EMT | 第83-84页 |
5.4.5 CRT调控转录因子SLUG的表达 | 第84-85页 |
5.5 讨论 | 第85-86页 |
5.6 本章小结 | 第86-88页 |
6 肺癌细胞发生EMT对胞内钙离子信号的影响 | 第88-96页 |
6.1 前言 | 第88页 |
6.2 实验仪器、材料与试剂 | 第88-90页 |
6.2.1 实验仪器 | 第88-89页 |
6.2.2 实验材料与试剂 | 第89-90页 |
6.3 实验方法 | 第90-92页 |
6.3.1 试剂配制 | 第90页 |
6.3.2 TGF-β1 诱导肺癌细胞发生EMT | 第90-91页 |
6.3.3 CRT过表达重组质粒转染 | 第91页 |
6.3.4 siRNA转染 | 第91页 |
6.3.5 钙离子信号检测 | 第91-92页 |
6.3.6 数据处理 | 第92页 |
6.4 实验结果 | 第92-94页 |
6.4.1 肺癌细胞发生EMT影响胞内钙离子信号 | 第92-93页 |
6.4.2 过表达CRT影响胞内钙离子信号 | 第93-94页 |
6.4.3 CRT参与调控EMT下游胞内钙离子信号 | 第94页 |
6.5 讨论 | 第94-95页 |
6.6 本章小结 | 第95-96页 |
7 胞内钙信号调控肺癌细胞发生EMT | 第96-110页 |
7.1 引言 | 第96页 |
7.2 实验仪器、材料和试剂 | 第96-99页 |
7.2.1 实验仪器 | 第96-97页 |
7.2.2 实验材料与试剂 | 第97-99页 |
7.3 实验方法 | 第99-104页 |
7.3.1 TG对肺癌细胞EMT过程的影响 | 第99页 |
7.3.2 BAPTA-AM对肺癌细胞EMT过程的影响 | 第99页 |
7.3.3 半定量RT-PCR检测目的基因表达 | 第99-101页 |
7.3.4 Western Blot检测目的蛋白表达 | 第101-104页 |
7.3.5 数据处理 | 第104页 |
7.4 实验结果 | 第104-108页 |
7.4.1 TG对肺癌细胞EMT过程的影响 | 第104-105页 |
7.4.2 TG对Smad信号通路的影响 | 第105-106页 |
7.4.3 BAPTA-AM对肺癌细胞EMT过程的影响 | 第106-107页 |
7.4.4 BAPTA-AM对Smad信号通路的影响。 | 第107-108页 |
7.5 讨论 | 第108-109页 |
7.6 本章小结 | 第109-110页 |
8 结论与展望 | 第110-114页 |
8.1 主要结论 | 第110-111页 |
8.2 工作展望 | 第111-114页 |
致谢 | 第114-116页 |
参考文献 | 第116-130页 |
附录 | 第130页 |
A 作者在攻读博士学位期间发表论文及专利情况 | 第130页 |
B 作者在攻读博士学位期间参加的科研项目 | 第130页 |