| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-30页 |
| 1.1 引言 | 第12页 |
| 1.2 雷公藤研究概述 | 第12-21页 |
| 1.2.1 雷公藤主要化学成分 | 第12-20页 |
| 1.2.2 雷公藤药理研究 | 第20-21页 |
| 1.3 雷公藤杀虫作用研究进展 | 第21-22页 |
| 1.4 植物次生代谢物生物合成途径 | 第22-27页 |
| 1.4.1 萜类物质MVA生物合成途径 | 第22页 |
| 1.4.2 萜类物质MEP生物合成途径 | 第22-23页 |
| 1.4.3 生物碱合成途径 | 第23-24页 |
| 1.4.4 雷公藤活性次生代谢物生物合成 | 第24-27页 |
| 1.5 选题依据及研究思路 | 第27-30页 |
| 第二章 雷公藤植株及不同组织培养中活性物质检测方法研究 | 第30-40页 |
| 2.1 材料与方法 | 第30-33页 |
| 2.1.1 仪器、药剂及供试菌株 | 第30-31页 |
| 2.1.2 供试雷公藤采样及处理 | 第31-32页 |
| 2.1.3 试验方法 | 第32-33页 |
| 2.1.4 添加回收试验 | 第33页 |
| 2.2 结果与分析 | 第33-38页 |
| 2.2.1 紫外检测波长的选择 | 第33页 |
| 2.2.2 色谱柱的选择 | 第33-34页 |
| 2.2.3 质谱定性检测 | 第34-36页 |
| 2.2.4 方法学验证 | 第36-37页 |
| 2.2.5 样品测定 | 第37-38页 |
| 2.3 小结 | 第38-40页 |
| 第三章 雷公藤生物合成途径相关基因表达分析 | 第40-70页 |
| 3.1 雷公藤内参基因筛选 | 第40-54页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第40-42页 |
| 3.1.2 试验方法 | 第42-44页 |
| 3.1.3 结果与分析 | 第44-54页 |
| 3.2 雷公藤生物合成基因表达分析 | 第54-67页 |
| 3.2.1 材料与方法 | 第54-60页 |
| 3.2.2 结果与分析 | 第60-67页 |
| 3.3 小结 | 第67-70页 |
| 第四章 TwTR-1、Tw6OMT基因功能鉴定 | 第70-88页 |
| 4.1 材料与方法 | 第70-71页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第70页 |
| 4.1.2 仪器和试剂 | 第70-71页 |
| 4.2 试验方法 | 第71-76页 |
| 4.2.1 雷公藤cDNA制备 | 第71-72页 |
| 4.2.2 TwTR-1、Tw6OMT基因原核表达载体构建和蛋白纯化 | 第72-75页 |
| 4.2.3 雷公藤代谢物提取分离 | 第75-76页 |
| 4.2.4 酶活测定 | 第76页 |
| 4.2.5 HPLC和HPLC-MS分析 | 第76页 |
| 4.2.6 系统发育树分析 | 第76页 |
| 4.3 结果与分析 | 第76-85页 |
| 4.3.1 TwTR-1、Tw6OMT系统发育树分析 | 第76-77页 |
| 4.3.2 蛋白表达 | 第77页 |
| 4.3.3 液质联用分析 | 第77-85页 |
| 4.4 讨论与小结 | 第85-88页 |
| 4.4.1 讨论 | 第85-87页 |
| 4.4.1.1 雷公藤活性次生代谢产物的液质联用分析 | 第85页 |
| 4.4.1.2 TwTR-1、Tw6OMT基因催化产物的裂解规律 | 第85-86页 |
| 4.4.1.3 初步推测TwTR-1、Tw6OMT基因生物合成步骤 | 第86-87页 |
| 4.4.2 小结 | 第87-88页 |
| 第五章 讨论与总结 | 第88-93页 |
| 5.1 讨论 | 第88-90页 |
| 5.1.1 雷公藤活性次生代谢产物检测分析条件优化 | 第88-89页 |
| 5.1.2 内参基因的筛选 | 第89-90页 |
| 5.1.3 雷公藤生物合成途径基因表达 | 第90页 |
| 5.2 主要结论 | 第90-91页 |
| 5.3 本论文创新点 | 第91-92页 |
| 5.4 有待进一步研究的问题 | 第92页 |
| 5.5 前景展望 | 第92-93页 |
| 参考文献 | 第93-108页 |
| 致谢 | 第108-110页 |
| 作者简介 | 第110页 |
