| 致谢 | 第9-10页 |
| 摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 一 文献综述 | 第14-46页 |
| 1. 杂草 | 第14-20页 |
| 1.1. 杂草概况 | 第14-15页 |
| 1.2. 杂草防治 | 第15-20页 |
| 1.2.1. 农业防治 | 第15-16页 |
| 1.2.2. 生物防治 | 第16-18页 |
| 1.2.3. 化学防治 | 第18-20页 |
| 1.2.4. 杂草综合治理 | 第20页 |
| 2. 除草剂 | 第20-40页 |
| 2.1. 除草剂概况 | 第21-30页 |
| 2.1.1. 生物除草剂 | 第21-22页 |
| 2.1.2. 化学除草剂 | 第22-27页 |
| 2.1.3. 除草剂发展方向 | 第27-28页 |
| 2.1.4. 抗性杂草 | 第28-30页 |
| 2.1.4.1. 抗性杂草概况 | 第28页 |
| 2.1.4.2. 抗性杂草发生机理 | 第28-30页 |
| 2.1.4.2.1. 导致杂草抗性的因素 | 第28-29页 |
| 2.1.4.1.2. 抗性杂草发生机理 | 第29-30页 |
| 2.1.4.3. 抗性杂草治理 | 第30页 |
| 2.2. 烟嘧磺隆 | 第30-36页 |
| 2.2.1. 烟嘧磺隆概述 | 第30-31页 |
| 2.2.2. 烟嘧磺隆理化性质 | 第31-33页 |
| 2.2.3. 烟嘧磺隆合成 | 第33-34页 |
| 2.2.4. 烟嘧磺隆除草机理 | 第34-35页 |
| 2.2.5. 乙酰乳酸合成酶(ALS)及其抑制剂研究概况 | 第35-36页 |
| 2.3. 硝磺草酮 | 第36-40页 |
| 2.3.1. 硝磺草酮概述 | 第36页 |
| 2.3.2. 硝磺草酮理化性质 | 第36-37页 |
| 2.3.3. 硝磺草酮合成 | 第37-38页 |
| 2.3.4. 硝磺草酮除草机理 | 第38-39页 |
| 2.3.5. 对羟基苯基丙酮酸双氧化酶(HPPD)及其抑制剂研究概况 | 第39-40页 |
| 3. 作物抗除草剂途径 | 第40-41页 |
| 4. 细胞色素P450S基因 | 第41-43页 |
| 4.1. 细胞色素P450s基因功能 | 第41页 |
| 4.2. 细胞色素P450s转基因植物研究现状 | 第41-43页 |
| 5. 转基因作物研究概况 | 第43-45页 |
| 5.1. 转基因作物历史、现状 | 第43-44页 |
| 5.2. 转基因抗除草剂作物研究概况 | 第44页 |
| 5.3. 转基因抗除草剂作物面临的问题 | 第44-45页 |
| 6. 本研究的目的及意义 | 第45-46页 |
| 二. 材料与方法 | 第46-66页 |
| 1. 材料 | 第46页 |
| 1.1. 植物材料 | 第46页 |
| 1.2. 常用实验菌株 | 第46页 |
| 1.3. 常用试剂与仪器 | 第46页 |
| 1.4. 实验常用溶液配制方法 | 第46页 |
| 2. 方法 | 第46-66页 |
| 2.1. 常用的分子生物学实验方法 | 第46-61页 |
| 2.1.1. PCR反应 | 第46-50页 |
| 2.1.2. DNA琼脂糖凝胶(1%)电泳 | 第50页 |
| 2.1.3. DNA凝胶回收 | 第50-51页 |
| 2.1.4. 连接反应 | 第51-52页 |
| 2.1.6. 大肠杆菌TG1感受态细胞的制备及转化 | 第52-53页 |
| 2.1.7. 质粒提取 | 第53-54页 |
| 2.1.8. 酶切反应 | 第54-55页 |
| 2.1.9. 菌株保存 | 第55页 |
| 2.1.10. 基因表达及多克隆抗体制备 | 第55-58页 |
| 2.1.11. 植物组织蛋白质提取(TRIzol法) | 第58-59页 |
| 2.1.12. Western blot | 第59页 |
| 2.1.13. 农杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第59-60页 |
| 2.1.14. 植物总DNA的提取(CTAB法) | 第60-61页 |
| 2.2. 水稻转化表达载体的构建 | 第61-62页 |
| 2.2.1. KC 3-1基因的获得 | 第61页 |
| 2.2.2. KC 3-(?)基因的克隆鉴定及测序 | 第61页 |
| 2.2.3. 水稻转化载体1300-35s-Ubi-1174-Ubi-KC 3-1的构建 | 第61-62页 |
| 2.3. 农杆菌介导的KC 3-1基因转化 | 第62-63页 |
| 2.3.1. 水稻成熟胚愈伤组织的诱导 | 第62页 |
| 2.3.2. 农杆菌与水稻愈伤的共培养 | 第62-63页 |
| 2.3.3. 抗性愈伤组织的筛选 | 第63页 |
| 2.3.4. 转化植株的再生与培养 | 第63页 |
| 2.4. KC 3-1转基因水稻植株生根阶段烟嘧磺隆抗性预分析 | 第63-64页 |
| 2.5. 温室水培KC 3-1转基因水稻对烟嘧磺隆的抗性水平分析 | 第64页 |
| 2.6. 田间KC 3-1转基因水稻对烟嘧磺隆的抗性分析 | 第64页 |
| 2.7. KC 3-1转基因水稻除草剂抗性筛选 | 第64-65页 |
| 2.8. 温室水培KC 3-1转基因水稻对硝磺草酮的抗性水平分析 | 第65页 |
| 2.9. 田间KC 3-1转基因水稻对硝磺草酮的抗性分析 | 第65页 |
| 2.10. 转基因水稻的PCR鉴定 | 第65页 |
| 2.11. 转基因植株Western-blot检测 | 第65-66页 |
| 三. 结果分析 | 第66-81页 |
| 1. KC 3-1基因 | 第66-70页 |
| 2. KC 3-1基因表达 | 第70-71页 |
| 3. 转基因载体1300-35S-UBI-1174-UBI-KC 3-1 | 第71页 |
| 4. KC 3-1基因转基因植株获得 | 第71-72页 |
| 5. 组培KC 3-1转基因幼苗对烟嘧磺隆的敏感性检测 | 第72-73页 |
| 6. 温室KC 3-1转基因水稻对烟嘧磺隆的抗性分析 | 第73-74页 |
| 7. 田间KC 3-1转基因水稻对烟嘧磺隆的抗性分析 | 第74-75页 |
| 8. 温室KC 3-1转基因水稻对除草剂的抗性筛选 | 第75-76页 |
| 9. 温室KC 3-1转基因水稻对硝磺草酮的抗性分析 | 第76-77页 |
| 10. 田间KC 3-1转基因水稻对硝磺草酮的抗性分析 | 第77-78页 |
| 11. 转基因水稻PCR检测 | 第78-79页 |
| 12. 转基因水稻WESTERN BLOT检测 | 第79-81页 |
| 四. 讨论与分析 | 第81-87页 |
| 参考文献 | 第87-97页 |
| 附录Ⅰ 常用的生化试剂及仪器 | 第97-98页 |
| 附录Ⅱ 常用的实验溶液配置方法 | 第98-99页 |
