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阴道上皮细胞转染抗菌肽LL-37和防御素5后对假丝酵母菌抑制作用的研究

中文摘要第4-6页
Abstract第6-8页
缩略语/符号说明第14-15页
前言第15-19页
    研究现状、成果第15-17页
    研究目的、方法第17-19页
一、LL37和HD5真核重组质粒构建第19-36页
    1.1 材料和方法第19-30页
        1.1.1 试验试剂及设备第19-22页
        1.1.2 人阴道上皮细胞总RNA的提取和cDNA第一链的获得第22-23页
        1.1.3 用PCR法从人阴道cDNA中扩增获编码HD5,LL-37成熟肽的DNA序列第23-24页
        1.1.4 目的基因克隆入pGEM-T-Easy载体第24-27页
        1.1.5 pcDNA3.1(+)/LL-37-EGFP和pcDNA3.1(+)/HD5-EGFP真核重组质粒构建第27-30页
    1.2 结果第30-31页
        1.2.1 人阴道上皮细胞总RNA的提取第30页
        1.2.2 人HD5和LL-37基因的获得第30-31页
        1.2.3 HD5、LL-37克隆入pGEM-T-Easy载体第31页
        1.2.4 真核重组质粒pcDNA3.1(+)/HD5-EGFP和pcDNA3.1(+)/LL-37-EGFP的酶切鉴定第31页
    1.3 讨论第31-35页
        1.3.1 AMPs生物特性及应用前景第31-32页
        1.3.2 HD5、LL-37目的基因的获得及亚克隆载体的构建第32-34页
        1.3.3 HD5和LL-37真核表达载体的选择和构建第34-35页
    1.4 小结第35-36页
二、阴道上皮原代培养及假丝酵母菌制备第36-46页
    2.1 资料和方法第36-39页
        2.1.1 材料和主要试剂第36页
        2.1.2 人阴道上皮细胞原代培养第36-37页
        2.1.3 人阴道上皮细胞传代培养第37-38页
        2.1.4 人阴道上皮细胞鉴定第38-39页
        2.1.5 白假丝酵母菌细胞制备第39页
    2.2 结果第39-42页
        2.2.1 人阴道上皮细胞的生长特点第39-40页
        2.2.2 细胞活力检测和纯度鉴定第40页
        2.2.3 免疫组化鉴定第40-41页
        2.2.4 假丝酵母菌生长情况第41-42页
    2.3 讨论第42-45页
        2.3.1 阴道上皮细胞培养方法的选择第42-44页
        2.3.2 假丝酵母菌的致病性第44-45页
    2.4 小结第45-46页
三、阴道上皮细胞转染LL37和HD5重组质粒后对假丝酵母菌抑制作用第46-62页
    3.1 资料和方法第46-50页
        3.1.1 实验材料和主要试剂第46页
        3.1.2 实验方法第46-50页
        3.1.3 统计学方法第50页
    3.2 结果第50-58页
        3.2.1 重组质粒pcDNA3.1(+)/HD5-EGFP及pcDNA3.1(+)/LL-37-EGFP的瞬时转染效率第50-51页
        3.2.2 重组质粒转染后阴道上皮细胞LL-37、HD5的分泌水平第51-53页
        3.2.3 抗菌肽LL-37和HD5真核重组质粒转染阴道上皮细胞后抑菌效果第53-56页
        3.2.4 阴道上皮细胞转染真核重组质粒后IL-8分泌水平变化第56-58页
    3.3 讨论第58-62页
        3.3.1 阴道上皮细胞转染HD5、LL-37真核重组质粒后HD5、LL-37的表达情况第58页
        3.3.2 阴道上皮细胞转染HD5、LL-37真核重组质粒后对假丝酵母菌的抑制作用第58-59页
        3.3.3 阴道上皮细胞转染AMPs重组质粒后对细胞因子的调节作用第59-62页
全文结论第62-64页
论文创新点第64-65页
参考文献第65-69页
发表论文和参加科研情况说明第69-70页
附录第70-72页
    附录1. HD5基因测序图谱第70-71页
    附录2. LL37基因测序图谱第71-72页
综述第72-87页
    抗菌肽在假丝酵母菌性阴道炎中的作用第72-82页
    综述参考文献第82-87页
致谢第87页

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