| 中文摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-30页 |
| 1. 表观遗传学 | 第8页 |
| 1.1 表观遗传学定义 | 第8页 |
| 1.2 表观遗传学范畴 | 第8页 |
| 2. DNA甲基化 | 第8-11页 |
| 3. 组蛋白修饰 | 第11-25页 |
| 3.1 乙酰化 | 第12-16页 |
| 3.2 甲基化 | 第16-23页 |
| 3.3 泛素化 | 第23-24页 |
| 3.4 磷酸化 | 第24-25页 |
| 4. PRMT5概述 | 第25-30页 |
| 4.1 PRMT5调节细胞生长与转化 | 第26-27页 |
| 4.2 PRMT5在发育以及分化过程中的作用 | 第27页 |
| 4.3 PRMT5在细胞质中的作用 | 第27-28页 |
| 4.4. PRMT5在γ-globin基因表达中的作用 | 第28-30页 |
| 第二章 材料与方法 | 第30-40页 |
| 1. 实验试剂与仪器 | 第30页 |
| 1.1 实验试剂 | 第30页 |
| 1.2 实验仪器 | 第30页 |
| 2. 实验方法 | 第30-40页 |
| 2.1 针对PRMT5甲基化位点抗体的制备 | 第30-31页 |
| 2.2 构建PRMT5甲基化位点突变的原核表达载体 | 第31-32页 |
| 2.3 构建PRMT5甲基化位点突变的真核表达载体 | 第32页 |
| 2.4 PRMT5甲基化位点突变体稳定细胞系的构建 | 第32-34页 |
| 2.5 体外甲基化检测PRMT5酶活 | 第34-35页 |
| 2.6 细胞内提取核小体 | 第35-36页 |
| 2.7 计算细胞数量测定细胞生长速度 | 第36页 |
| 2.8 γ-globin gene的mRNA水平检测 | 第36-38页 |
| 2.9 DNMT3A PWWP结构域的表达与纯化 | 第38-39页 |
| 2.10 免疫共沉降 | 第39-40页 |
| 第三章 实验结果与讨论 | 第40-53页 |
| 第一节 针对PRMT5甲基化特异性抗体的制备 | 第40-44页 |
| 1. 质谱分析发现PRMT5第505位精氨酸(R)在体内被双甲基化 | 第40-41页 |
| 2. 质谱分析发现PRMT5第458位赖氨酸(K)在体内被单甲基化 | 第41页 |
| 3. 针对PRMT5 R505甲基化抗体的制备 | 第41-42页 |
| 4. 针对PRMT5 K458甲基化抗体的制备 | 第42-44页 |
| 第二节 PRMT5 R505A与K458A稳定细胞系的构建 | 第44-46页 |
| 1. PRMT5 R505A与K458A原核表达载体的构建 | 第44页 |
| 2. PRMT5 R505A与K458A真核表达载体的构建 | 第44-45页 |
| 3. PRMT5 R505A稳定细胞系的构建及鉴定 | 第45-46页 |
| 第三节 PRMT5 R505A酶活测定 | 第46-48页 |
| 1. PRMT5 R505A降低其体外酶活 | 第46页 |
| 2. PRMT5 R505A降低其体内酶活 | 第46-48页 |
| 第四节 PRMT5 R505A减缓细胞的生长 | 第48-49页 |
| 第五节 PRMT5 R505A提高γ-globin gene水平 | 第49-50页 |
| 第六节 PRMT5 R505A不改变与DNMT3A的相互作用 | 第50-53页 |
| 1. DNMT3A PWWP结构域的原核表达与纯化 | 第50页 |
| 2. PRMT5 R505A不改变与DNMT3A的相互作用 | 第50-53页 |
| 总结与讨论 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-66页 |
| 论文发表 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
