| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第12-31页 |
| 1.1 霉菌毒素检测技术的研究进展 | 第12-22页 |
| 1.1.1 全球霉菌毒素的污染现状、危害及安全管理 | 第12-13页 |
| 1.1.2 霉菌毒素中呕吐毒素的分析方法 | 第13-22页 |
| 1.1.2.1 样品预处理 | 第15-16页 |
| 1.1.2.1.1 提取方法 | 第15页 |
| 1.1.2.1.2 纯化 | 第15-16页 |
| 1.1.2.2 快速筛选的方法 | 第16-20页 |
| 1.1.2.2.1 薄层层析法（Thin layer chromatography, TLC） | 第16页 |
| 1.1.2.2.2 酶联免疫吸附法（Enzyme-linked immune-sorbent assay, ELISA） | 第16-17页 |
| 1.1.2.2.3 时间分辨荧光免疫分析法（Time-resolved fluoroimmunoassay, TRFIA） | 第17页 |
| 1.1.2.2.4 多路复合流式微球免疫（Multiplex flow cytometric microsphere immunoassay） | 第17页 |
| 1.1.2.2.5 免疫芯片（Immunochip） | 第17页 |
| 1.1.2.2.6 免疫旋转式生物传感器（Immuno-rotary biosensor, IRB） | 第17-18页 |
| 1.1.2.2.7 侧向免疫层析法（Lateral flow immunoassay, LFI） | 第18-19页 |
| 1.1.2.2.8 平面型波导（Planar waveguide, PWG） | 第19页 |
| 1.1.2.2.9 表面等离子共振（Surface plasmon resonance, SPR） | 第19-20页 |
| 1.1.2.2.10 双层干涉法（Biolayer interferometry, BLI） | 第20页 |
| 1.1.2.2.11 电子鼻（Electronic nose, EN） | 第20页 |
| 1.1.2.3 色谱或质谱的检测方法 | 第20-22页 |
| 1.1.2.3.1 高效液相色谱（High performance liquid chromatography, HPLC） | 第20-21页 |
| 1.1.2.3.2 气相色谱质谱联用（Gas chromatography-mass spectrometry, GC-MS） | 第21页 |
| 1.1.2.3.3 液相色谱质谱联用（Liquid chromatography-mass spectrometry, LC-MS） | 第21-22页 |
| 1.1.3 呕吐毒素课题研究的内容与意义 | 第22页 |
| 1.2 转基因作物检测技术的研究进展 | 第22-31页 |
| 1.2.1 全球转基因作物的种植情况及安全管理 | 第22-24页 |
| 1.2.2 转基因作物的分析方法 | 第24-30页 |
| 1.2.2.1 样品预处理 | 第25-26页 |
| 1.2.2.1.1 提取 | 第25页 |
| 1.2.2.1.2 纯化 | 第25-26页 |
| 1.2.2.2 核酸检测技术 | 第26-30页 |
| 1.2.2.2.1 定性 PCR 技术（Qualitative polymerase chain reaction） | 第26页 |
| 1.2.2.2.2 定量 PCR 技术（Quantitative polymerase chain reaction） | 第26-27页 |
| 1.2.2.2.3 Southern 印迹杂交（Southern blot） | 第27-28页 |
| 1.2.2.2.4 DNA 芯片（DNA chip） | 第28-29页 |
| 1.2.2.2.5 环介导等温扩增技术（Loop-mediated isothermal amplification, LAMP） | 第29页 |
| 1.2.2.2.6 数字 PCR（Digital polymerase chain reaction） | 第29-30页 |
| 1.2.3 转基因抗虫水稻检测的内容与意义 | 第30-31页 |
| 第二章 呕吐毒素的检测方法与代谢规律的研究 | 第31-49页 |
| 2.1 实验材料、试剂与仪器 | 第32页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第32页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第32页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第32页 |
| 2.2 实验方法 | 第32-37页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第32-33页 |
| 2.2.1.1 超高效液相质谱（UPLC-MS）分析 | 第32-33页 |
| 2.2.1.2 MTT 实验分析 | 第33页 |
| 2.2.1.3 采用单细胞凝胶电泳实验分析 | 第33页 |
| 2.2.2 样品处理 | 第33-34页 |
| 2.2.2.1 UPLC-MS 标准品配制 | 第33页 |
| 2.2.2.2 UPLC-MS 细胞样品处理 | 第33-34页 |
| 2.2.2.3 单细胞凝胶电泳毒素配制 | 第34页 |
| 2.2.2.4 单细胞凝胶电泳细胞样品处理 | 第34页 |
| 2.2.3 UPLC-MS 实验条件 | 第34-35页 |
| 2.2.4 UPLC-MS 检测方法的验证实验 | 第35-36页 |
| 2.2.5 单细胞凝胶电泳的实验流程 | 第36-37页 |
| 2.3 实验结果 | 第37-48页 |
| 2.3.1 UPLC-MS 检测细胞模型中的呕吐毒素 | 第37-43页 |
| 2.3.1.1 UPLC 条件的优化 | 第37-39页 |
| 2.3.1.1.1 流动相的优化 | 第37-38页 |
| 2.3.1.1.2 梯度洗脱程序的优化 | 第38-39页 |
| 2.3.1.2 线性度 | 第39页 |
| 2.3.1.3 回收率 | 第39-40页 |
| 2.3.1.4 精确性 | 第40-41页 |
| 2.3.1.5 稳定性 | 第41页 |
| 2.3.1.6 MTT 实验 | 第41-42页 |
| 2.3.1.7 实际样品的分析 | 第42-43页 |
| 2.3.2 单细胞凝胶电泳检测细胞的遗传毒性 | 第43-48页 |
| 2.3.2.1 检测条件的优化 | 第43-45页 |
| 2.3.2.1.1 Hep G2 细胞处理状态的优化 | 第43-44页 |
| 2.3.2.1.2 Hep G2 细胞浓度的确定 | 第44-45页 |
| 2.3.2.2 呕吐毒素对细胞的遗传毒性 | 第45-47页 |
| 2.3.2.3 呕吐毒素与 T2 毒素对细胞的遗传毒性 | 第47-48页 |
| 2.4 小结 | 第48-49页 |
| 第三章 转基因水稻科丰 6 号特异性检测方法的研究 | 第49-62页 |
| 3.1 实验材料、试剂与仪器 | 第49-50页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第49页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第49页 |
| 3.1.3 仪器 | 第49-50页 |
| 3.2 实验方法 | 第50-55页 |
| 3.2.1 基因组 DNA 的提取纯化及纯合子鉴定 | 第50-52页 |
| 3.2.2 科丰 6 号 PCR 检测目标旁侧序列与引物 | 第52-53页 |
| 3.2.3 科丰 6 号定性 PCR 的特异性与灵敏度检测 | 第53-54页 |
| 3.2.3.1 定性 PCR 的检测体系与程序 | 第53页 |
| 3.2.3.2 定性 PCR 的灵敏度检测 | 第53-54页 |
| 3.2.4 科丰 6 号定量 PCR 的检测与验证 | 第54-55页 |
| 3.2.4.1 定量 PCR 的检测体系与程序 | 第54页 |
| 3.2.4.2 定量 PCR 的灵敏度、标准曲线及重复性验证 | 第54-55页 |
| 3.2.4.3 定量 PCR 的实验室内部协同验证 | 第55页 |
| 3.3 实验结果 | 第55-61页 |
| 3.3.1 转基因水稻科丰 6 号纯合子鉴定 | 第55-56页 |
| 3.3.2 科丰 6 号定性 PCR 检测方法 | 第56-57页 |
| 3.3.2.1 定性 PCR 特异性分析 | 第56页 |
| 3.3.2.2 定性 PCR 灵敏度分析 | 第56-57页 |
| 3.3.3 科丰 6 号定量 PCR 检测方法 | 第57-60页 |
| 3.3.3.1 定量 PCR 特异性分析 | 第57-58页 |
| 3.3.3.2 定量 PCR 灵敏度分析 | 第58页 |
| 3.3.3.3 定量 PCR 标准曲线 | 第58-59页 |
| 3.3.3.4 定量 PCR 重复性与重演性验证 | 第59-60页 |
| 3.3.4 科丰 6 号定量 PCR 检测方法的实验室内部协同验证 | 第60-61页 |
| 3.3.4.1 标准曲线的扩增效率与线性相关系数 | 第60页 |
| 3.3.4.2 盲样测定 | 第60-61页 |
| 3.4 小结 | 第61-62页 |
| 第四章 总结与展望 | 第62-64页 |
| 4.1 全文总结 | 第62页 |
| 4.2 展望 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 攻读硕士学位期间已发表或录用的论文 | 第69页 |
