摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第1章 绪论 | 第10-20页 |
1.1 丙型肝炎病毒(HCV)及其研究概况 | 第10-16页 |
1.1.1 丙型肝炎病毒基因组结构和蛋白的功能 | 第10-11页 |
1.1.2 丙型肝炎病毒生活周期 | 第11-13页 |
1.1.3 丙型肝炎流行现状 | 第13页 |
1.1.4 抗丙型肝炎病毒药物的研究 | 第13-16页 |
1.2 丙型肝炎病毒非结构蛋白 5A 的研究概况 | 第16-17页 |
1.3 核酸适体在生物医药研究中的应用 | 第17-19页 |
1.4 本课题研究方案及目的 | 第19-20页 |
第2章 丙型肝炎病毒全长 NS5A 蛋白原核表达及纯化 | 第20-26页 |
2.1 前言 | 第20页 |
2.2 材料与方法 | 第20-24页 |
2.2.1 实验材料 | 第20-21页 |
2.2.2 实验方法 | 第21-24页 |
2.3 实验结果 | 第24页 |
2.4 小结与讨论 | 第24-26页 |
第3章 NS5A 蛋白核酸适体的筛选 | 第26-30页 |
3.1 前言 | 第26页 |
3.2 材料与方法 | 第26-28页 |
3.2.1 实验材料 | 第26页 |
3.2.2 实验方法 | 第26-28页 |
3.3 实验结果 | 第28-29页 |
3.3.1 不同筛选轮数 aptamers 和蛋白的结合情况 | 第28页 |
3.3.2 Aptamers 和 NS5A 蛋白的亲和性的检测 | 第28-29页 |
3.4 小结与讨论 | 第29-30页 |
第4章 NS5A 核酸适体对 HCV 生活周期的影响 | 第30-45页 |
4.1 前言 | 第30页 |
4.2 材料与方法 | 第30-37页 |
4.2.1 实验材料 | 第30-31页 |
4.2.2 实验方法 | 第31-37页 |
4.3 实验结果 | 第37-43页 |
4.3.1 NS5A aptamers 抑制 FCA1 细胞中复制子的复制 | 第37-39页 |
4.3.2 NS5A aptamers 影响可感染 HCV 细胞系中病毒 RNA 的复制以及病毒颗粒的组装 | 第39-41页 |
4.3.3 NS5A aptamers 影响不同基因亚型 HCV RNA 的复制 | 第41-42页 |
4.3.4 NS5A aptamers 不影响 HepG2.2.15 细胞系中 HBV DNA 的复制 | 第42-43页 |
4.4 小结与讨论 | 第43-45页 |
第5章 NS5A 核酸适体抗病毒机制的探究 | 第45-62页 |
5.1 前言 | 第45-46页 |
5.2 材料与方法 | 第46-53页 |
5.2.1 实验材料 | 第46-47页 |
5.2.2 实验方法 | 第47-53页 |
5.3 实验结果 | 第53-60页 |
5.3.1 pEF6/V5-His TOPO-NS5A DI、pEF6/V5-His TOPO-NS5A DI-II、pEF6/V5-His TOPO-NS5A DI-III 重组质粒的构建 | 第53-57页 |
5.3.2 NS5A Domain I 与 NS5A-4 的抗病毒作用有关 | 第57-58页 |
5.3.3 NS5A-4 抑制细胞内病毒 NS5A 在 LDs 上的定位 | 第58页 |
5.3.4 NS5A-5 抑制细胞内 HCV NS5A 与 Core 蛋白的相互作用 | 第58-59页 |
5.3.5 NS5A aptamers 抑制细胞内 HCV Core 蛋白与 RNA 的结合 | 第59-60页 |
5.4 小结与讨论 | 第60-62页 |
结论 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
附录 攻读学位期间参与项目及发表论文 | 第72页 |