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G250抗原肽与HBcAg融合基因原核表达载体的构建及表达蛋白的免疫分析

目录第4-6页
CONTENTS第6-8页
中文摘要第8-11页
ABSTRACT第11-13页
英文缩略词表第15-17页
第一章 前言第17-18页
第二章 背景回顾第18-26页
    2.1 肾癌的免疫治疗概况第18-20页
    2.2 G250抗原的结构、功能及免疫原性第20-21页
    2.3 G250抗原与肾癌免疫治疗概况第21-22页
    2.4 肾癌肽疫苗的研究进展第22-23页
    2.5 乙肝核心抗原作为疫苗载体的研究进展第23-25页
    2.6 表达系统的选择第25-26页
第三章 重组G250抗原肽-HBcAg融合基因原核表达载体的构建、表达和融合蛋白的纯化第26-40页
    3.1 材料和仪器第26-28页
    3.2 实验方法第28-38页
        3.2.1 PCR扩增目的基因片段第28-29页
        3.2.2 构建重组质粒pGEM-T/G250抗原肽(图1)第29-31页
        3.2.3 构建重组质粒pGEMEX-C-6250肽-C(图2)第31-33页
        3.2.4 PCR扩增C-6250肽-C基因片段第33-34页
        3.2.5 构建重组质粒pGEM-T/C-6250肽-C(图3)第34-35页
        3.2.6 构建原核表达质粒pET28 a(+)/C-6250肽-C(图4)第35-37页
        3.2.7 pET28a(+)/C-G250-肽-C原核表达质粒的IPTG诱导表达第37-38页
        3.2.8 Ni2+NTA亲和层析法分离纯化目的蛋白第38页
    3.3 结果第38-39页
        3.3.1 G250抗原肽PCR产物的酶切鉴定结果第38页
        3.3.2 重组质粒pGEM-T/G250肽的酶切鉴定及测序第38页
        3.3.3 重组质粒pGEMEX-1/C-6250肽-C的基因测序结果第38页
        3.3.4 C-6250肽-C PCR产物的凝胶电泳鉴定第38-39页
        3.3.5 重组质粒pGEM-T/C-G250肽-C的酶切鉴定与测序第39页
        3.3.6 原核表达质粒pET28a(+)/C-G250肽-C的酶切鉴定、测序及比对结果第39页
        3.3.7 pET28a(+)/CG250肽C表达质粒经IPTG诱导表达融合蛋白及纯化第39页
    3.4 小结第39-40页
第四章 重组融合蛋白的免疫分析第40-42页
    4.1 实验材料和仪器第40页
    4.2 实验方法第40-42页
    4.3 结果第42页
    4.4 小结第42页
第五章 讨论第42-45页
    5.1 G250抗原—理想的肾癌疫苗治疗靶点第42-43页
    5.2 乙肝核心抗原-理想的疫苗载体第43-44页
    5.3 重组融合蛋白的免疫分析第44-45页
第六章 结论第45-46页
    6.1.成功制备了G250抗原肽-HBcAg重组融合蛋白第45页
    6.2.重组融合蛋白可有效诱导小鼠产生髙滴度、髙特异性抗体第45-46页
附图表第46-55页
参考文献第55-61页
致谢第61-62页
攻读硕士学位期间发表的论文第62-63页
学位论文评闽及答辩情况表第63页

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