目录 | 第4-6页 |
CONTENTS | 第6-8页 |
中文摘要 | 第8-11页 |
ABSTRACT | 第11-13页 |
英文缩略词表 | 第15-17页 |
第一章 前言 | 第17-18页 |
第二章 背景回顾 | 第18-26页 |
2.1 肾癌的免疫治疗概况 | 第18-20页 |
2.2 G250抗原的结构、功能及免疫原性 | 第20-21页 |
2.3 G250抗原与肾癌免疫治疗概况 | 第21-22页 |
2.4 肾癌肽疫苗的研究进展 | 第22-23页 |
2.5 乙肝核心抗原作为疫苗载体的研究进展 | 第23-25页 |
2.6 表达系统的选择 | 第25-26页 |
第三章 重组G250抗原肽-HBcAg融合基因原核表达载体的构建、表达和融合蛋白的纯化 | 第26-40页 |
3.1 材料和仪器 | 第26-28页 |
3.2 实验方法 | 第28-38页 |
3.2.1 PCR扩增目的基因片段 | 第28-29页 |
3.2.2 构建重组质粒pGEM-T/G250抗原肽(图1) | 第29-31页 |
3.2.3 构建重组质粒pGEMEX-C-6250肽-C(图2) | 第31-33页 |
3.2.4 PCR扩增C-6250肽-C基因片段 | 第33-34页 |
3.2.5 构建重组质粒pGEM-T/C-6250肽-C(图3) | 第34-35页 |
3.2.6 构建原核表达质粒pET28 a(+)/C-6250肽-C(图4) | 第35-37页 |
3.2.7 pET28a(+)/C-G250-肽-C原核表达质粒的IPTG诱导表达 | 第37-38页 |
3.2.8 Ni2+NTA亲和层析法分离纯化目的蛋白 | 第38页 |
3.3 结果 | 第38-39页 |
3.3.1 G250抗原肽PCR产物的酶切鉴定结果 | 第38页 |
3.3.2 重组质粒pGEM-T/G250肽的酶切鉴定及测序 | 第38页 |
3.3.3 重组质粒pGEMEX-1/C-6250肽-C的基因测序结果 | 第38页 |
3.3.4 C-6250肽-C PCR产物的凝胶电泳鉴定 | 第38-39页 |
3.3.5 重组质粒pGEM-T/C-G250肽-C的酶切鉴定与测序 | 第39页 |
3.3.6 原核表达质粒pET28a(+)/C-G250肽-C的酶切鉴定、测序及比对结果 | 第39页 |
3.3.7 pET28a(+)/CG250肽C表达质粒经IPTG诱导表达融合蛋白及纯化 | 第39页 |
3.4 小结 | 第39-40页 |
第四章 重组融合蛋白的免疫分析 | 第40-42页 |
4.1 实验材料和仪器 | 第40页 |
4.2 实验方法 | 第40-42页 |
4.3 结果 | 第42页 |
4.4 小结 | 第42页 |
第五章 讨论 | 第42-45页 |
5.1 G250抗原—理想的肾癌疫苗治疗靶点 | 第42-43页 |
5.2 乙肝核心抗原-理想的疫苗载体 | 第43-44页 |
5.3 重组融合蛋白的免疫分析 | 第44-45页 |
第六章 结论 | 第45-46页 |
6.1.成功制备了G250抗原肽-HBcAg重组融合蛋白 | 第45页 |
6.2.重组融合蛋白可有效诱导小鼠产生髙滴度、髙特异性抗体 | 第45-46页 |
附图表 | 第46-55页 |
参考文献 | 第55-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第62-63页 |
学位论文评闽及答辩情况表 | 第63页 |